Abstract | 第1-5页 |
论文摘要 | 第5-9页 |
引言 | 第9-10页 |
1 综述 | 第10-19页 |
·牛磺酸 | 第10-11页 |
·牛磺酸的合成 | 第11-13页 |
·牛磺酸转运蛋白 | 第13-15页 |
·影响 TauT 转运的因素 | 第15-16页 |
·在鱼类中研究现状 | 第16-17页 |
·牛磺酸与鱼类渗透压调节 | 第17-18页 |
·展望 | 第18-19页 |
2 鲈鱼 TauT 基因 cDNA 全长克隆和组织表达 | 第19-37页 |
·实验材料和仪器 | 第19-20页 |
·实验材料 | 第19页 |
·主要试剂和试剂盒 | 第19页 |
·主要仪器 | 第19-20页 |
·实验方法 | 第20-28页 |
·鲈鱼肝脏总 RNA 的抽提 | 第20页 |
·合成鲈鱼肝脏第一链 cDNA | 第20-21页 |
·合成鲈鱼 5’和 3’ Ready cDNA | 第21-22页 |
·克隆鲈鱼 TauT 核心片段 | 第22页 |
·鲈鱼 TauT 5’和 3’末端的克隆 | 第22-24页 |
·PCR 产物的处理 | 第24-26页 |
·序列分析 | 第26-27页 |
·鲈鱼 TauT 的组织表达 | 第27-28页 |
·结果与分析 | 第28-35页 |
·鲈鱼 TauT 基因的序列分析 | 第28-33页 |
·鲈鱼 TauT 基因同源性比较和系统发育分析 | 第33-34页 |
·鲈鱼 TauT 组织表达 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
3 质粒标准品的构建 | 第37-46页 |
·材料与仪器 | 第37页 |
·实验材料 | 第37页 |
·主要试剂和仪器 | 第37页 |
·实验方法 | 第37-40页 |
·RNA 提取 | 第37页 |
·荧光定量 PCR cDNA 的合成 | 第37-38页 |
·重组标准品质粒的制备 | 第38-40页 |
·结果与分析 | 第40-44页 |
·重组质粒的抽提 | 第40-41页 |
·重组质粒的鉴定 | 第41-42页 |
·构建鲈鱼 TauT 和 beta-actin 标准曲线 | 第42-44页 |
·讨论 | 第44-46页 |
4 高盐和外源牛磺酸对鲈鱼 TauT 表达的影响 | 第46-54页 |
·材料与方法 | 第46页 |
·材料 | 第46页 |
·方法 | 第46页 |
·半定量 PCR 检测高盐对鲈鱼 TauT 表达的影响 | 第46页 |
·荧光定量检测鲈鱼 TauT 与 beta-actin 基因表达 | 第46-47页 |
·统计分析 | 第47页 |
·实验结果 | 第47-52页 |
·RT-PCR 检测高盐对鲈鱼 TauT 表达的影响 | 第47-49页 |
·荧光定量 PCR 检测高盐对鲈鱼 TauT 基因表达的影响 | 第49-50页 |
·牛磺酸对鲈鱼 TauT 表达的影响 | 第50-52页 |
·讨论 | 第52-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
在学研究成果 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |