| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 中英符号缩略词表 | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1 ToMV的生物学特性 | 第11-13页 |
| ·ToMV的基因组结构 | 第11-12页 |
| ·病毒与寄主因子之间的竞争抑制 | 第12-13页 |
| 2 生物技术在抗病毒方面的研究进展 | 第13-15页 |
| ·CP介导的抗性 | 第13-14页 |
| ·复制酶基因介导的抗性 | 第14页 |
| ·小卫星RNA介导的抗性 | 第14页 |
| ·反义RNA介导的抗病毒特性 | 第14页 |
| ·缺陷型运动蛋白介导的抗病毒 | 第14-15页 |
| 3 RNAi技术在抗病毒中的应用 | 第15-20页 |
| ·RNAi技术的发展 | 第15页 |
| ·RNAi的原理 | 第15-16页 |
| ·RNAi特点 | 第16-17页 |
| ·RNAi在植物抗病毒中的应用研究 | 第17-18页 |
| ·病毒对寄主RNA干扰的抑制 | 第18-20页 |
| 第二章 番茄花叶病毒基因组克隆及序列分析 | 第20-28页 |
| 1 材料与试剂 | 第20页 |
| ·菌种和质粒 | 第20页 |
| ·常用酶和生化试剂 | 第20页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20页 |
| 2 方法 | 第20-25页 |
| ·番茄花叶病毒的鉴定 | 第20-22页 |
| ·番茄花叶病毒的分离、纯化 | 第22页 |
| ·番茄花叶病毒的基因组克隆扩增 | 第22-23页 |
| ·PCR产物的回收 | 第23页 |
| ·扩增产物的克隆 | 第23-25页 |
| ·序列测定、分析及比对 | 第25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-28页 |
| ·番茄花叶病毒的鉴定 | 第25页 |
| ·ToMV基因组序列扩增 | 第25-26页 |
| ·ToMV的核苷酸序列分析 | 第26-28页 |
| 第三章 植物表达载体的构建 | 第28-35页 |
| 1 实验材料 | 第28页 |
| ·菌株与质粒 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-31页 |
| ·PCR引物的设计与合成 | 第28-29页 |
| ·RNAi表达载体pBi35STo5的构建 | 第29页 |
| ·RNAi表达载体pBi35SToBK的构建 | 第29-30页 |
| ·RNAi表达载体pBi35SToMV3的构建 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-35页 |
| ·RNAi表达载体pBi35STo5的构建 | 第31-32页 |
| ·RNAi表达载体pBi35SToBK的构建 | 第32-33页 |
| ·RNAi表达载体pBi35SToMV3的构建 | 第33-35页 |
| 第四章 遗传转化研究 | 第35-40页 |
| 1. 实验材料 | 第35页 |
| ·菌株 | 第35页 |
| ·植物材料 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| 2 方法 | 第35-37页 |
| ·根癌农杆菌GV3101感受态细胞制备 | 第35页 |
| ·农杆菌转化——电激转化 | 第35-36页 |
| ·烟草无菌组培苗的培育 | 第36页 |
| ·转化烟草及转基因烟草获得 | 第36页 |
| ·转基因烟草的鉴定 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-40页 |
| ·转pBi35STo5载体烟草的筛选与分子检测 | 第37-38页 |
| ·转pBi35SToBK载体烟草的筛选与分子检测 | 第38页 |
| ·转pBi35SToMV3载体烟草的筛选与分子检测 | 第38-40页 |
| 第五章 讨论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 附录一 ToMV分离物CJ-2基因组核苷酸序列 | 第45-48页 |
| 附录二 主要培养基、溶液配制 | 第48-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简介 | 第51-52页 |
| 导师评阅表 | 第52页 |