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复方芪参提取物抗瘢痕疙瘩的TGF-β/Smad信号转导及MAPK通路调控机制

缩略词表第1-10页
中文摘要第10-16页
Abstract第16-25页
1.前言第25-30页
2.材料与方法第30-48页
   ·材料第30-37页
     ·细胞第30-31页
     ·药品第31页
     ·主要仪器第31-32页
     ·主要试剂及抗体第32-34页
     ·主要试剂配制第34-37页
   ·方法第37-48页
     ·体外分离培养成纤维细胞第37页
     ·体外细胞划痕实验观察CASE对瘢痕疙瘩成纤维细胞移行能力的影响第37-38页
     ·CASE对瘢痕疙瘩成纤维细胞内TGF-β/Smad信号转导途径的调控作用第38-40页
       ·细胞培养与分组第38页
       ·免疫沉淀与western blot法检测CASE对TGF-β_1诱导的Smad2/3磷酸化及Smad2/3/4复合物表达的影响第38-39页
       ·细胞免疫荧光染色法检测CASE对TGF-β_1诱导的磷酸化Smad2/3转位入核的影响第39页
       ·Western blot法检测CASE对TGF-β_1介导的Smad7及PAI-1蛋白表达的影响第39页
       ·荧光实时定量RT-PCR法检测CASE对TGF-β_1诱导的PAI-1mRNA水平的影响第39-40页
     ·瘢痕疙瘩成纤维细胞内MAPK通路对TGF-β/Smad信号转导的调控作用第40-41页
       ·细胞培养与分组第40页
       ·免疫沉淀与western blot法检测三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导的Smad2磷酸化的影响第40页
       ·细胞免疫荧光染色法检测三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导的磷酸化Smad2转位入核的影响第40-41页
       ·Western blot法检测三种MAPK抑制因子对TGF-β_1介导的Smad7及PAI-1蛋白表达的影响第41页
     ·CASE对瘢痕疙瘩成纤维细胞内MAPK信号通路的调控作用第41-42页
       ·细胞培养与分组第41页
       ·Western blot法检测CASE对ERK1/2,JNK1/2和p38磷酸化的影响第41-42页
       ·细胞免疫荧光染色法检测CASE对pERK1/2,pJNK1/2和pp38核内表达的影响第42页
     ·检测方法第42-48页
       ·免疫沉淀和western blot分析第42-44页
       ·细胞免疫荧光染色法第44-45页
       ·SYBR Green Ⅰ荧光实时定量RT-PCR第45-48页
     ·统计分析第48页
3 结果第48-74页
   ·CASE明显抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的移行能力第48-52页
   ·CASE干扰瘢痕疙瘩成纤维细胞内TGF-β/Smad信号转导途径第52-63页
     ·CASE抑制TGF-β_1诱导的Smad2 C-末端和连接区磷酸化第52-54页
     ·CASE抑制TGF-β_1诱导的Smad3 C-末端和连接区磷酸化第54-56页
     ·CASE抑制TGF-β_1诱导的Smad2/3/4复合物形成第56-57页
     ·CASE阻断TGF-β_1诱导的磷酸化Smad2/3转位入核第57-59页
     ·CASE上调TGF-β_1介导的Smad7蛋白表达第59-60页
     ·CASE降低TGF-β_1诱导的PAI-1mRNA水平第60-62页
     ·CASE降低TGF-β_1诱导的PAI-1蛋白表达水平第62-63页
   ·瘢痕疙瘩成纤维细胞内MAPK通路对TGF-β/Smad信号转导的调控作用第63-68页
     ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导的Smad2磷酸化的影响第63-65页
     ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导的磷酸化Smad2转位入核的影响第65-66页
     ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1介导的Smad7蛋白水平的影响第66-67页
     ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导的PAI-1蛋白表达的影响第67-68页
   ·CASE对瘢痕疙瘩成纤维细胞内MAPK信号通路的调控作用第68-74页
     ·CASE对ERK1/2磷酸化的抑制作用第68-70页
     ·CASE对JNK1/2磷酸化的抑制作用第70-71页
     ·CASE对p38磷酸化的抑制作用第71-72页
     ·CASE对磷酸化ERK1/2核内表达的影响第72页
     ·CASE对磷酸化JNK1/2核内表达的影响第72-73页
     ·CASE对磷酸化p38核内表达的影响第73-74页
4 讨论第74-87页
5 结论第87-88页
6 下一步研究设想和展望第88-90页
参考文献第90-98页
附录第98-120页
 附录一 个人简历第98-101页
 附录二 致谢第101-103页
 附录三 文献综述第103-120页
  参考文献第114-120页

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