| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-26页 |
| ·植物遗传转化的研究与应用 | 第10-16页 |
| ·植物遗传转化的方法 | 第10页 |
| ·多基因植物遗传转化的研究 | 第10-14页 |
| ·多基因植物遗传转化的方法 | 第11-12页 |
| ·多基因表达载体的构建 | 第12-14页 |
| ·烟草遗传转化的研究与应用 | 第14-16页 |
| ·抗性转基因烟草的研究与应用 | 第14-15页 |
| ·转基因烟草用于基础理论研究 | 第15-16页 |
| ·转基因烟草作为生物反应器 | 第16页 |
| ·融合基因的研究概况 | 第16-20页 |
| ·融合基因的基本概念及分类 | 第16-18页 |
| ·融合基因的研究与应用 | 第18-20页 |
| ·睾丸酮丛毛单胞菌 3α-羟类固醇脱氢酶基因(3α-HSD/CR)研究概况 | 第20-22页 |
| ·睾丸酮丛毛单胞菌简介 | 第20页 |
| ·3α-羟类固醇脱氢酶基因(3α-HSD/CR)研究概况 | 第20-22页 |
| ·aiiA 基因的研究现状 | 第22-25页 |
| ·aiiA 基因及其功能简介 | 第22-23页 |
| ·aiiA 基因的应用研究进展 | 第23-25页 |
| ·aiiA 基因的发现及在微生物中的表达 | 第23-24页 |
| ·aiiA 基因在转基因植物中的应用研究 | 第24-25页 |
| ·本研究的目的意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-38页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第26-33页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·菌株及质粒 | 第26页 |
| ·酶及试剂盒 | 第26页 |
| ·仪器 | 第26页 |
| ·培养基及溶液的配制 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-33页 |
| ·引物设计 | 第27页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取——碱裂解法 | 第27页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备—TSS 法 | 第27-28页 |
| ·农杆菌电击感受态的制备 | 第28页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第28-31页 |
| ·质粒转化农杆菌——电击法 | 第31-32页 |
| ·转化子 PCR 鉴定 | 第32-33页 |
| ·转基因烟草的获得及阳性植株的分子检测 | 第33-35页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33页 |
| ·药品及试剂 | 第33页 |
| ·仪器 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-35页 |
| ·烟草无菌苗的培养 | 第33-34页 |
| ·根癌农杆菌的培养 | 第34页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第34-35页 |
| ·阳性植株的检测 | 第35页 |
| ·目的基因在转基因烟草阳性植株中的表达分析 | 第35-38页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·植物材料 | 第35页 |
| ·药品与试剂 | 第35页 |
| ·仪器 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-38页 |
| ·ELISA 检测转基因烟草中 3α-HSD/CR 蛋白的表达 | 第36页 |
| ·转基因烟草对胆固醇降解能力测定 | 第36-37页 |
| ·转基因烟草对胡萝卜软腐欧文氏杆菌抗病性测定 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-52页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第38-45页 |
| ·真核表达载体质粒的酶切鉴定 | 第38-40页 |
| ·农杆菌中质粒目的基因的 PCR 鉴定 | 第40-41页 |
| ·测序结果 | 第41-45页 |
| ·再生芽及转基因烟草阳性株的生长 | 第45-46页 |
| ·转基因烟草阳性植株的检测 | 第46-48页 |
| ·PCR 检测结果 | 第46-47页 |
| ·转基因烟草 GUS 组织化学染色结果分析 | 第47-48页 |
| ·目的基因在转基因烟草中的表达与分析 | 第48-52页 |
| ·ELISA 检测转基因烟草中 3α-HSD/CR 蛋白的表达 | 第48-49页 |
| ·转基因烟草降解胆固醇的能力测定 | 第49页 |
| ·转基因烟草对胡萝卜软腐欧文氏杆菌抗病性测定 | 第49-50页 |
| ·融合基因 3α-HSD/CR-aiiA 在转烟草中的表达 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-55页 |
| ·3α-HSD/CR 和 aiiA 基因 | 第52页 |
| ·融合基因 3α-HSD/CR-aiiA 的表达 | 第52-53页 |
| ·融合基因基因表达载体的构建 | 第53页 |
| ·融合基因中不同来源的基因的表达及各基因之间的干扰作用 | 第53-54页 |
| ·转基因植物抗病试验病原菌接种的方式的选择 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 附录Ⅰ 试验所用部分试剂配方 | 第63-65页 |
| 附录Ⅱ 缩略词 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
