目录 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
英文缩略表 | 第14-15页 |
第一部文 献综述 | 第15-36页 |
1 启动子概述 | 第15-16页 |
2 植物对Cd~(2+)胁迫反应的分子机制 | 第16-23页 |
·镉(Cd)对植物的毒害作用 | 第17-18页 |
·植物的抗镉胁迫机制 | 第18-23页 |
3. 植物热激蛋白的种类和功能 | 第23-31页 |
·热激蛋白的分类 | 第23-25页 |
·植物热激蛋白的功能 | 第25-31页 |
4. 植物热激蛋白启动子 | 第31-35页 |
·植物热激蛋白基因启动子结构特征 | 第31-32页 |
·植物热激蛋白基因的表达调控 | 第32-34页 |
·植物热激蛋白启动子在基因工程中的应用 | 第34-35页 |
5 本研究的目的和意义 | 第35-36页 |
第二部分 研究论文 | 第36-91页 |
第一章 拟南芥受Cd~(2+)诱导表达基因的筛选 | 第36-58页 |
1 材料与方法 | 第38-44页 |
·植物材料与胁迫处理方法 | 第38页 |
·总RNA提取 | 第38-39页 |
·RNA样品中DNA的去除 | 第39页 |
·基于ACP的差异显示 | 第39-40页 |
·琼脂糖凝胶中核酸片段回收 | 第40-41页 |
·DNA片段的克隆 | 第41页 |
·质粒提取 | 第41-42页 |
·测序分析 | 第42-43页 |
·半定量RT-PCR分析 | 第43-44页 |
2 结果 | 第44-51页 |
·拟南芥受Cd~(2+)诱导表达基因的筛选 | 第44页 |
·cDNA克隆的鉴定 | 第44-47页 |
·半定量RT-PCR分析结果 | 第47-51页 |
3 讨论 | 第51-58页 |
第二章 AtHsp70、AtsHsp17.6-C1和AtsHsp17.6-C2基因在非生物胁迫下的表达及其抗逆功能探索 | 第58-76页 |
1 材料与方法 | 第59-65页 |
·植物材料与胁迫处理方法 | 第59-60页 |
·半定量RT-PCR分析 | 第60页 |
·植物表达载体的构建 | 第60-62页 |
·植物表达载体转化农杆菌 | 第62-63页 |
·转基因植株的获得 | 第63-65页 |
·转基因植物的胁迫抗性实验 | 第65页 |
2 结果 | 第65-73页 |
·Cd~(2+)诱导AtHsp70、AtsHsp17.6-C1和AtsHsp17.6-C2的表达 | 第65-68页 |
·其它重金属离子对AtHsp70、AtsHsp17.6-C1和AtsHsp17.6-C2的诱导表达 | 第68-69页 |
·其它非生物胁迫下AtHsp70、AtsHsp17B-C1和AtsHsp17.6-C2的表达谱 | 第69-71页 |
·转基因植物抗性分析 | 第71-73页 |
3 讨论 | 第73-76页 |
第三章 AtsHsp17.6-C2启动子的克隆及其植物诱导表达系统的建立 | 第76-91页 |
1 材料与方法 | 第77-82页 |
·植物表达载体构建 | 第77-79页 |
·农杆菌的转化 | 第79页 |
·转基因植株的获得 | 第79页 |
·转基因植株的鉴定 | 第79-80页 |
·GUS的组织化学染色 | 第80-81页 |
·GUS活性的定量测定 | 第81-82页 |
2 结果 | 第82-88页 |
·AtHsp17.6-C2::GUS构建策略 | 第82页 |
·拟南芥的转化 | 第82页 |
·转基因植株的鉴定 | 第82-84页 |
·多种胁迫因子对AtHsp17.6-C2启动子诱导激活效应 | 第84-85页 |
·AtsHsp17.6-C2启动子最适热诱导温度 | 第85-86页 |
·热激处理后启动子AtHsp17.6-C2驱动基因的表达模式 | 第86-87页 |
·植物诱导表达系统的最适热激诱导时间 | 第87页 |
·多次热激处理对AtHsp17.6-C2启动子驱动的基因的表达的影响 | 第87-88页 |
3 讨论 | 第88-91页 |
总结与展望 | 第91-94页 |
附录 | 第94-97页 |
参考文献 | 第97-118页 |
攻读学位期间已发表和待发表的论文 | 第118-119页 |
致谢 | 第119-120页 |