| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-18页 |
| 目录 | 第18-21页 |
| 缩写词简表 | 第21-22页 |
| 前言 | 第22-26页 |
| 技术路线 | 第26-27页 |
| 第一章 材料与方法 | 第27-45页 |
| ·材料 | 第27-30页 |
| ·细胞 | 第27页 |
| ·菌株和质粒载体 | 第27-28页 |
| ·试剂 | 第28-30页 |
| ·引物设计 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-45页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第30-32页 |
| ·PAMAM与DNA的结合试验 | 第32页 |
| ·PAMAM对DNA的保护试验 | 第32-33页 |
| ·原子力显微镜检测 | 第33页 |
| ·Zeta电位检测 | 第33-34页 |
| ·细胞活力测定(台盼蓝拒染法) | 第34页 |
| ·细胞毒性试验(MTT) | 第34页 |
| ·体外细胞吞噬实验 | 第34-35页 |
| ·体外报道基因转染试验 | 第35页 |
| ·PAMAM/DNA在体内的分布及表达实验 | 第35-37页 |
| ·质粒DNA转染及荧光强度分析 | 第37页 |
| ·红细胞聚集试验 | 第37-38页 |
| ·血浆蛋白反应滤过试验 | 第38页 |
| ·白血病动物模型的建立 | 第38-39页 |
| ·外周血检测 | 第39页 |
| ·骨髓涂片检测 | 第39-40页 |
| ·过氧化物酶染色 | 第40页 |
| ·瑞氏染色 | 第40页 |
| ·观察小鼠存活状态和存活时间 | 第40页 |
| ·苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色 | 第40-41页 |
| ·组织免疫组化 | 第41-42页 |
| ·组织RT-PCR | 第42-45页 |
| 第二章 PAMAM纳米转运体系的构建 | 第45-53页 |
| ·PAMAM纳米颗粒的制备 | 第45页 |
| ·PAMAM结合DNA的能力 | 第45-48页 |
| ·PAMAM对结合的DNA的保护能力 | 第48-49页 |
| ·PAMAM与DNA不同质量比结合时的Zeta电位测定 | 第49-51页 |
| ·细胞生长曲线 | 第51页 |
| ·PAMAM纳米转运体系的细胞毒性实验 | 第51-53页 |
| 第三章 PAMAM的体外及体内基因转运效率评价及生物相容性分析 | 第53-67页 |
| ·PAMAM的体外细胞吞噬实验 | 第53-54页 |
| ·PAMAM介导的质粒DNA的体外转运实验 | 第54-55页 |
| ·PAMAM/DNA复合物的体内细胞吞噬实验 | 第55-60页 |
| ·PAMAM介导的质粒DNA体内转运试验 | 第60-63页 |
| ·在含有血清的培养基中PAMAM对质粒DNA转移能力的影响 | 第63-64页 |
| ·PAMAM基因复合物对红细胞聚集的影响 | 第64-65页 |
| ·PAMAM基因复合物与血浆蛋白的相互作用 | 第65-67页 |
| 第四章 PAMAM作为基因载体对K562异体移植SCID小鼠白血病动物模型的治疗研究 | 第67-79页 |
| ·异体移植白血病动物模型的建立 | 第67-68页 |
| ·不同处理组白血病异体移植SCID小鼠外周血白细胞数量的比较 | 第68-69页 |
| ·p16和LRRC4基因治疗对白血病异体移植SCID小鼠骨髓中原始粒细胞比例的影响 | 第69-70页 |
| ·p16和LRRC4基因共同治疗对白血病细胞肝、脾组织浸润的影响 | 第70-74页 |
| ·p16和LRRC4基因治疗对白血病异体移植SCID小鼠生存率的影响 | 第74-75页 |
| ·免疫组织化学分析p16和LRRC4在白血病异体移植SCID小鼠组织中的表达 | 第75-78页 |
| ·K562细胞在白血病异体移植SCID小鼠中累及脏器的情况 | 第78-79页 |
| 第五章 讨论 | 第79-91页 |
| ·基因载体的选择 | 第79-80页 |
| ·纳米颗粒的性质 | 第80-81页 |
| ·纳米基因转运体的优势 | 第81-83页 |
| ·PAMAM的应用 | 第83-86页 |
| ·白血病的基因治疗 | 第86-91页 |
| 结论 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-102页 |
| 无机纳米颗粒作为基因转运体在医学上的应用 | 第102-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 个人简历 | 第112-113页 |