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PAMAM纳米转运体系在体内外基因转运及白血病基因治疗中的应用

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-18页
目录第18-21页
缩写词简表第21-22页
前言第22-26页
技术路线第26-27页
第一章 材料与方法第27-45页
   ·材料第27-30页
     ·细胞第27页
     ·菌株和质粒载体第27-28页
     ·试剂第28-30页
     ·引物设计第30页
     ·主要仪器第30页
   ·实验方法第30-45页
     ·质粒DNA的提取第30-32页
     ·PAMAM与DNA的结合试验第32页
     ·PAMAM对DNA的保护试验第32-33页
     ·原子力显微镜检测第33页
     ·Zeta电位检测第33-34页
     ·细胞活力测定(台盼蓝拒染法)第34页
     ·细胞毒性试验(MTT)第34页
     ·体外细胞吞噬实验第34-35页
     ·体外报道基因转染试验第35页
     ·PAMAM/DNA在体内的分布及表达实验第35-37页
     ·质粒DNA转染及荧光强度分析第37页
     ·红细胞聚集试验第37-38页
     ·血浆蛋白反应滤过试验第38页
     ·白血病动物模型的建立第38-39页
     ·外周血检测第39页
     ·骨髓涂片检测第39-40页
     ·过氧化物酶染色第40页
     ·瑞氏染色第40页
     ·观察小鼠存活状态和存活时间第40页
     ·苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色第40-41页
     ·组织免疫组化第41-42页
     ·组织RT-PCR第42-45页
第二章 PAMAM纳米转运体系的构建第45-53页
   ·PAMAM纳米颗粒的制备第45页
   ·PAMAM结合DNA的能力第45-48页
   ·PAMAM对结合的DNA的保护能力第48-49页
   ·PAMAM与DNA不同质量比结合时的Zeta电位测定第49-51页
   ·细胞生长曲线第51页
   ·PAMAM纳米转运体系的细胞毒性实验第51-53页
第三章 PAMAM的体外及体内基因转运效率评价及生物相容性分析第53-67页
   ·PAMAM的体外细胞吞噬实验第53-54页
   ·PAMAM介导的质粒DNA的体外转运实验第54-55页
   ·PAMAM/DNA复合物的体内细胞吞噬实验第55-60页
   ·PAMAM介导的质粒DNA体内转运试验第60-63页
   ·在含有血清的培养基中PAMAM对质粒DNA转移能力的影响第63-64页
   ·PAMAM基因复合物对红细胞聚集的影响第64-65页
   ·PAMAM基因复合物与血浆蛋白的相互作用第65-67页
第四章 PAMAM作为基因载体对K562异体移植SCID小鼠白血病动物模型的治疗研究第67-79页
   ·异体移植白血病动物模型的建立第67-68页
   ·不同处理组白血病异体移植SCID小鼠外周血白细胞数量的比较第68-69页
   ·p16和LRRC4基因治疗对白血病异体移植SCID小鼠骨髓中原始粒细胞比例的影响第69-70页
   ·p16和LRRC4基因共同治疗对白血病细胞肝、脾组织浸润的影响第70-74页
   ·p16和LRRC4基因治疗对白血病异体移植SCID小鼠生存率的影响第74-75页
   ·免疫组织化学分析p16和LRRC4在白血病异体移植SCID小鼠组织中的表达第75-78页
   ·K562细胞在白血病异体移植SCID小鼠中累及脏器的情况第78-79页
第五章 讨论第79-91页
   ·基因载体的选择第79-80页
   ·纳米颗粒的性质第80-81页
   ·纳米基因转运体的优势第81-83页
   ·PAMAM的应用第83-86页
   ·白血病的基因治疗第86-91页
结论第91-92页
参考文献第92-102页
无机纳米颗粒作为基因转运体在医学上的应用第102-111页
致谢第111-112页
个人简历第112-113页

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