| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-18页 |
| 综述部分 | 第18-66页 |
| 第一章 猪圆环病毒2型(PCV2)流行病学与致病机理研究进展 | 第18-40页 |
| 1 病原学研究进展 | 第18-27页 |
| ·PCV2理化特性 | 第18-19页 |
| ·基因结构及编码蛋白 | 第19-21页 |
| ·感染与复制 | 第21-27页 |
| 2 流行病学 | 第27-28页 |
| ·PCV2感染和PMWS的时空分布 | 第27页 |
| ·宿主的易感性 | 第27-28页 |
| ·传播途径 | 第28页 |
| 3 基因进化分析与分型 | 第28-30页 |
| ·基因分型 | 第28-29页 |
| ·基因型与毒力的关系 | 第29-30页 |
| 4 PCVD的发生机制 | 第30-33页 |
| ·PCV2感染的动力学 | 第30页 |
| ·PMWS发生的影响因素 | 第30-32页 |
| ·PCV2引起的免疫抑制 | 第32-33页 |
| 5 PCV2感染引起的早期免疫应答 | 第33-35页 |
| ·在体外,PCV2对树突状细胞的影响 | 第33页 |
| ·在体外,PCV2感染对单核细胞和巨噬细胞的影响 | 第33-34页 |
| ·在体外,PCV2感染对PBMC的影响 | 第34页 |
| ·PCV2 DNA的免疫调控作用 | 第34-35页 |
| ·PCV2降低免疫能力的机制 | 第35页 |
| 6 体液免疫应答 | 第35-36页 |
| ·在实验条件下,PCV2抗体应答 | 第35-36页 |
| ·自然条件下PCV2抗体应答 | 第36页 |
| 7 细胞介导的免疫应答 | 第36-38页 |
| ·亚临床感染猪 | 第36-37页 |
| ·PMWS发病猪 | 第37页 |
| ·PCV2调控细胞因子类型 | 第37-38页 |
| 8 总结 | 第38-40页 |
| 第二章 猪圆环病毒病诊断与免疫防控研究进展 | 第40-53页 |
| 1 猪圆环病毒病的诊断 | 第40-43页 |
| ·个体诊断 | 第40页 |
| ·群体诊断 | 第40页 |
| ·诊断方法 | 第40-43页 |
| 2 防控 | 第43-45页 |
| ·饲养管理 | 第43-44页 |
| ·控制混合感染 | 第44页 |
| ·育种和精液质量 | 第44页 |
| ·营养 | 第44页 |
| ·血清治疗和免疫 | 第44-45页 |
| 3 疫苗研究进展 | 第45-48页 |
| ·弱毒疫苗 | 第45-46页 |
| ·核酸疫苗 | 第46-47页 |
| ·活载体疫苗 | 第47页 |
| ·灭活疫苗 | 第47页 |
| ·亚单位疫苗 | 第47-48页 |
| 4 PCV2免疫和疫苗诱导的免疫 | 第48-50页 |
| ·疫苗的研制 | 第48-49页 |
| ·猪场免疫试验和免疫效果 | 第49-50页 |
| 5 病毒样颗粒(VLPs)疫苗 | 第50-53页 |
| ·VLPs疫苗的研究 | 第50-51页 |
| ·VLPs作为异源B/T细胞表位载体 | 第51-53页 |
| 参考文献(References) | 第53-66页 |
| 研究部分 | 第66-156页 |
| 第三章 中国东部猪圆环病毒2型分离株分子流行病学调查 | 第66-78页 |
| 1 材料与方法 | 第67-70页 |
| ·试剂 | 第67页 |
| ·病料 | 第67页 |
| ·病毒分离鉴定 | 第67-68页 |
| ·基因扩增与克隆 | 第68-69页 |
| ·基因序列的遗传进化分析 | 第69-70页 |
| ·ORF2编码氨基酸序列的比对分析 | 第70页 |
| 2 结果 | 第70-74页 |
| ·基于ORF2基因的进化分析 | 第70-71页 |
| ·ORF2编码氨基酸的序列分析 | 第71-74页 |
| 3 讨论 | 第74-76页 |
| 参考文献(References) | 第76-78页 |
| 第四章 猪圆环病毒2型Cap蛋白截断表达及其抗原特性研究 | 第78-92页 |
| 1 材料与方法 | 第79-83页 |
| ·毒株、质粒和试剂 | 第79页 |
| ·Cap蛋白基因分段克隆引物设计 | 第79-80页 |
| ·基因扩增与重组表达载体的构建 | 第80-81页 |
| ·目的蛋白的表达 | 第81页 |
| ·目的蛋白的大量表达纯化复性 | 第81-82页 |
| ·重组蛋白的Western blot鉴定 | 第82页 |
| ·重组蛋白ELISA抗原反应性测定 | 第82-83页 |
| ·不同蛋白片段在小鼠的免疫效果比较 | 第83页 |
| ·统计学分析 | 第83页 |
| 2 结果 | 第83-87页 |
| ·Cap-A/B/C/D/E基因片段的扩增 | 第83-84页 |
| ·重组质粒pET-32a-Cap-A/B/C/D/E的构建与鉴定 | 第84页 |
| ·重组蛋白的表达,纯化和抗原性鉴定 | 第84-85页 |
| ·ELISA试验检测重组蛋白抗原性 | 第85-87页 |
| ·不同重组蛋白小鼠免疫原性测定结果 | 第87页 |
| 3 讨论 | 第87-89页 |
| 参考文献(References) | 第89-92页 |
| 第五章 猪圆环病毒2型Cap蛋白原核表达重组亚单位疫苗免疫保护效力研究 | 第92-110页 |
| 1 材料与方法 | 第93-97页 |
| ·主要试剂和材料 | 第93页 |
| ·Cap重组蛋白表达与纯化 | 第93页 |
| ·疫苗制备 | 第93-94页 |
| ·小鼠免疫试验 | 第94页 |
| ·仔猪免疫保护试验 | 第94-95页 |
| ·PCV2 ELISA抗体检测 | 第95页 |
| ·PCV2病毒血症检测 | 第95-96页 |
| ·病理学观察 | 第96页 |
| ·免疫组化 | 第96-97页 |
| ·统计学分析 | 第97页 |
| 2 结果 | 第97-103页 |
| ·小鼠免疫试验 | 第97-98页 |
| ·PCV2 ELISA抗体检测 | 第98-99页 |
| ·攻毒保护试验结果 | 第99-103页 |
| 3 讨论 | 第103-106页 |
| 参考文献(References) | 第106-110页 |
| 第六章 表达猪圆环病毒2型Cap-生长抑素融合蛋白重组杆状病毒的构建与鉴定 | 第110-126页 |
| 1 材料和方法 | 第111-116页 |
| ·主要试剂与材料 | 第111页 |
| ·ORF2、ORF2-SS基因的扩增 | 第111页 |
| ·PCV2 DNA提取 | 第111-112页 |
| ·ORF2和ORF2-SS基因的扩增 | 第112页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第112-113页 |
| ·重组Bacmid(rBac-Cap和rBac-Cap-SS)质粒的构建 | 第113-114页 |
| ·重组杆状病毒的获得与鉴定 | 第114-115页 |
| ·重组蛋白在Sf9细胞中的表达与Western blot鉴定 | 第115页 |
| ·IFA | 第115-116页 |
| ·空斑试验测定重组病毒滴度 | 第116页 |
| ·病毒样颗粒的形成 | 第116页 |
| 2 结果 | 第116-120页 |
| ·重组转移载体质粒的构建与鉴定 | 第116-117页 |
| ·重组Bacmid的PCR鉴定 | 第117-118页 |
| ·重组病毒的获得 | 第118页 |
| ·重组蛋白的Western blot鉴定 | 第118-119页 |
| ·IFA鉴定Cap蛋白表达 | 第119页 |
| ·重组病毒增殖、滴度测定与稳定性 | 第119-120页 |
| ·电镜观察VLPs的形成 | 第120页 |
| 3 讨论 | 第120-123页 |
| 参考文献(References) | 第123-126页 |
| 第七章 杆状病毒系统表达的PCV2 Cap-生长抑素融合重组蛋白亚单位疫苗免疫特性研究 | 第126-142页 |
| 1 材料与方法 | 第127-129页 |
| ·主要试剂与材料 | 第127页 |
| ·疫苗制备 | 第127页 |
| ·小鼠免疫试验 | 第127页 |
| ·猪体攻毒保护实验 | 第127-128页 |
| ·PCV2特异抗体检测 | 第128-129页 |
| ·猪血清SS水平检测 | 第129页 |
| ·病毒血症检测 | 第129页 |
| ·病理学观察 | 第129页 |
| ·免疫组化检测 | 第129页 |
| ·统计学分析 | 第129页 |
| 2 结果 | 第129-137页 |
| ·小鼠免疫试验结果 | 第129-131页 |
| ·猪体免疫试验结果 | 第131-133页 |
| ·免疫猪攻毒保护试验结果 | 第133-137页 |
| 3 讨论 | 第137-139页 |
| 参考文献(References) | 第139-142页 |
| 第八章 大肠杆菌系统表达PCV2 Cap-生长抑素融合蛋白重组体构建与免疫特性研究 | 第142-156页 |
| 1 材料与方法 | 第143-146页 |
| ·主要试剂和材料 | 第143页 |
| ·Cap-SS基因扩增与重组表达载体的构建 | 第143页 |
| ·目的蛋白的表达 | 第143-144页 |
| ·重组蛋白的SDS-PAGE和Western blot鉴定 | 第144页 |
| ·猪体攻毒保护实验 | 第144页 |
| ·检测指标 | 第144-145页 |
| ·PCV2特异抗体检测 | 第145页 |
| ·猪血清SS水平检测 | 第145页 |
| ·病毒血症检测 | 第145-146页 |
| ·病理学观察 | 第146页 |
| ·免疫组化检测 | 第146页 |
| ·统计学分析 | 第146页 |
| 2 结果 | 第146-153页 |
| ·Cap-SS重组体构建 | 第146-147页 |
| ·猪体免疫试验结果 | 第147-149页 |
| ·猪体保护试验结果 | 第149-153页 |
| 3 讨论 | 第153-154页 |
| 参考文献(References) | 第154-156页 |
| 全文总结 | 第156-158页 |
| 致谢 | 第158-160页 |
| 发表论文 | 第160页 |
