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RGD-拖丝蛋白基因的构建及其在毕赤酵母中的分泌表达

摘要第1-3页
Abstract第3-4页
中文文摘第4-9页
第1章 绪论第9-29页
   ·课题背景第9页
   ·蜘蛛丝的研究进展第9-18页
     ·蜘蛛丝的来源第9-10页
     ·蜘蛛丝的组成与结构第10-13页
     ·蜘蛛丝的性能第13-14页
     ·蜘蛛丝的人工合成研究第14-17页
     ·蜘蛛丝的应用前景第17-18页
   ·巴斯德毕赤酵母表达系统第18-28页
     ·毕赤酵母的表达菌株第19-20页
     ·毕赤酵母的表达载体第20-21页
     ·外源基因的转化与整合第21-22页
     ·高拷贝转化菌株的筛选第22-23页
     ·外源蛋白的翻译后修饰第23-24页
     ·影响外源基因表达的因素及其优化策略第24-27页
     ·毕赤酵母表达重组蛛丝蛋白第27-28页
   ·研究的主要内容、目的与意义第28-29页
     ·主要内容第28页
     ·目的第28页
     ·意义第28-29页
第2章 材料与方法第29-43页
   ·材料第29-32页
     ·菌株与载体第29页
     ·工具酶及试剂盒第29页
     ·主要药品第29-30页
     ·主要仪器第30页
     ·培养基及常用溶液第30-32页
   ·方法第32-43页
     ·蛛丝蛋白基因单体的设计与寡核苷酸片断的合成第32-33页
     ·蛛丝蛋白基因单体的获得、鉴定与克隆第33-37页
     ·RGD-蛛丝蛋白基因单体的多聚化第37页
     ·RGD-蛛丝蛋白基因多聚体重组表达质粒的构建第37-38页
     ·含RGD-蛛丝蛋白基因的毕赤酵母重组菌的构建第38-40页
     ·毕赤酵母重组菌的分泌表达第40-43页
第3章 结果与分析第43-55页
   ·RGD-蛛丝蛋白基因单体的构建第43页
   ·RGD-蛛丝蛋白基因单体的克隆第43-45页
   ·RGD-蛛丝蛋白基因多聚体的构建第45-46页
   ·重组表达载体的构建第46-48页
   ·毕赤酵母重组菌的构建第48-53页
     ·重组表达载体的线性化第48-49页
     ·线性化重组表达载体的电击转化第49-50页
     ·多拷贝插入毕赤酵母重组菌的筛选第50-51页
     ·多拷贝插入毕赤酵母重组菌的PCR鉴定第51-53页
   ·表达产物的SDS-PAGE的检测第53-55页
第4章 讨论第55-59页
   ·蛛丝蛋白基因单体的设计第55-56页
   ·蛛丝蛋白基因单体的合成与克隆第56页
   ·蛛丝蛋白基因单体的多聚化与重组表达载体的构建第56-57页
   ·电击转化与整合第57页
   ·重组拖丝蛋白的分泌表达第57-59页
     ·拖丝蛋白多聚体基因的结构第57页
     ·整合位点的影响第57-58页
     ·多聚体基因拷贝数的影响第58页
     ·表达产物的检测第58-59页
结论第59-61页
附录第61-69页
参考文献第69-73页

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