中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
一、前言 | 第9-25页 |
二、材料和方法 | 第25-40页 |
1. 材料 | 第25-28页 |
·主要仪器设备 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·配制试剂 | 第25-27页 |
·PCR 相关试剂和引物 | 第27-28页 |
2. 实验方法 | 第28-40页 |
·核酸信标配基的构建 | 第28-32页 |
·配基双链制备——PAGE 切胶回收法 | 第28-29页 |
·配基互补单链制备——不对称PCR | 第29-30页 |
·长链双链的制备——重叠延伸 | 第30-31页 |
·长链单链的制备——不对称PCR | 第31-32页 |
·核酸信标配基的构建 | 第32页 |
·核酸信标配基活性的测定 | 第32-34页 |
·核酸信标配基配基功能测定——凝胶阻滞 | 第32-33页 |
·核酸信标配基信标功能测定——实时定量免疫-PCR 法 | 第33-34页 |
·核酸信标配基活性条件的优化 | 第34-36页 |
·核酸信标配基活性的常规条件 | 第34页 |
·洗涤条件的优化 | 第34-35页 |
·结合产物处理条件优化 | 第35-36页 |
·检测方法的建立 | 第36-40页 |
·免疫-PCR 法 | 第38-39页 |
·核酸信标配基-PCR 法 | 第39-40页 |
三、实验结果及分析 | 第40-52页 |
1. 核酸配基的结构 | 第40页 |
2. 核酸信标配基的构建 | 第40-44页 |
·配基双链制备 | 第40-41页 |
·配基互补单链制备 | 第41-42页 |
·长链双链的制备 | 第42页 |
·长链单链制备 | 第42-43页 |
·核酸信标配基的构建 | 第43-44页 |
3. 核酸信标配基活性的测定 | 第44-46页 |
·核酸信标配基配基功能测定 | 第44-45页 |
·核酸信标配基信标功能测定 | 第45-46页 |
4. 配基活性条件的优化 | 第46-50页 |
·核酸信标配基活性的常规条件 | 第46-47页 |
·洗涤条件的优化 | 第47-49页 |
·结合产物条件处理优化 | 第49-50页 |
5. 检测方法的建立 | 第50-52页 |
·免疫-PCR 检测方法 | 第50-51页 |
·核酸信标配基-PCR 检测方法 | 第51-52页 |
四、讨论 | 第52-55页 |
五、结论 | 第55-56页 |
六、参考文献 | 第56-60页 |
七、攻读硕士学位期间研究成果 | 第60-61页 |
附录:缩略词英文对照表 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |