| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 符号表(缩略语) | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-14页 |
| ·背景 | 第10-12页 |
| ·DNA 甲基化意义 | 第10页 |
| ·DNA 甲基化与肿瘤的关系 | 第10-11页 |
| ·NGAL 与疾病的关系 | 第11页 |
| ·NGALR 的发现与肿瘤的关系 | 第11页 |
| ·研究目的 | 第11-12页 |
| ·本项研究课题的基金来源及相关课题情况 | 第12页 |
| ·本项研究课题的研究意义 | 第12页 |
| ·研究目标与研究内容 | 第12-14页 |
| ·研究目标 | 第12页 |
| ·研究内容 | 第12-14页 |
| 第二章 材料方法 | 第14-32页 |
| ·试验材料 | 第14-15页 |
| ·食管癌细胞系 | 第14页 |
| ·培养基 | 第14页 |
| ·临床标本 | 第14页 |
| ·抗体 | 第14页 |
| ·反转录试剂 | 第14页 |
| ·质粒和菌株 | 第14页 |
| ·PCR 试剂、酶等 | 第14-15页 |
| ·试验方法 | 第15-32页 |
| ·细胞培养 | 第15页 |
| ·5-aza-dC 的处理 | 第15页 |
| ·抗体与免疫组化 | 第15-16页 |
| ·RNA 提取 | 第16页 |
| ·反转录PCR | 第16-18页 |
| ·感受态细胞制备 | 第18-19页 |
| ·pGLB-S2985 荧光素酶报告基因构建 | 第19-23页 |
| ·嵌套缺失突变载体的构建 | 第23-25页 |
| ·瞬时转染双荧光素酶报告基因质粒 | 第25-27页 |
| ·双荧光素酶报告基因检测 | 第27-28页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·甲基化的修饰 | 第29-30页 |
| ·亚硫酸氢盐修饰基因组测序法 | 第30页 |
| ·甲基化特异性PCR | 第30-31页 |
| ·统计学分析 | 第31-32页 |
| 第三章 结果 | 第32-38页 |
| ·NGALR 在食管癌中过表达 | 第32-34页 |
| ·NGALR 在食管癌细胞系中的表达水平不同 | 第34页 |
| ·NGALR 在NGALR 表达细胞系中启动子转录活性高于非表达细胞系 | 第34-35页 |
| ·NGALR 的启动子区存在CpG 岛 | 第35页 |
| ·NGALR 的CpG 岛在食管癌细胞系中的甲基化水平不同 | 第35页 |
| ·NGALR 启动子在食管癌中低甲基化 | 第35-37页 |
| ·5-aza-2’-deoxycytidine 处理后NGALR 重新表达 | 第37-38页 |
| 第四章 讨论 | 第38-41页 |
| ·NGALR 的过表达与食管癌发生的关系 | 第38页 |
| ·NGALR 的过表达与甲基化的关系 | 第38-39页 |
| ·NGALR 的过表达与甲基化检测在食管癌中的意义 | 第39-40页 |
| ·结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 附录A | 第46-47页 |
| 附录B | 第47-48页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第48-49页 |
| 个人简介 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
