| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 1 引言 | 第15-38页 |
| ·研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| ·猪轮状病毒感染及病原学研究进展 | 第16-24页 |
| ·猪轮状病毒感染历史及危害性 | 第16-17页 |
| ·轮状病毒免疫相关基因及其编码蛋白 | 第17-21页 |
| ·轮状病毒疫苗的研究进展 | 第21-24页 |
| ·乳酸菌用作口服疫苗传递载体的研究进展 | 第24-34页 |
| ·乳酸菌的益生作用 | 第25-27页 |
| ·乳酸菌对机体免疫作用的影响 | 第27-30页 |
| ·乳球菌表达系统研究进展 | 第30-32页 |
| ·乳酸杆菌表达系统研究进展 | 第32-34页 |
| ·LT 作为黏膜免疫佐剂的研究进展 | 第34-38页 |
| ·大肠杆菌不耐热肠毒素（LT）的黏膜免疫佐剂活性 | 第35-36页 |
| ·LT 作为黏膜免疫佐剂的应用 | 第36-38页 |
| 2 材料与方法 | 第38-59页 |
| ·试验材料 | 第38-41页 |
| ·质粒、菌种和毒株 | 第38页 |
| ·实验动物 | 第38页 |
| ·引物合成 | 第38-39页 |
| ·培养基的配制 | 第39页 |
| ·溶液的配制 | 第39-40页 |
| ·间接ELISA 检测抗体主要试剂 | 第40页 |
| ·蛋白质免疫印迹（Western-blot）主要试剂 | 第40页 |
| ·酶类及主要生化试剂 | 第40页 |
| ·主要实验仪器与设备 | 第40-41页 |
| ·试验方法 | 第41-59页 |
| ·表达VP4 与VP4-LTB 重组乳酸乳球菌的构建 | 第41-47页 |
| ·目的基因在乳酸乳球菌中的表达 | 第47-49页 |
| ·表达VP4 与VP4-LTB 重组干酪乳杆菌的构建 | 第49-55页 |
| ·目的基因在干酪乳杆菌中的表达 | 第55-56页 |
| ·口服重组乳酸菌免疫学指标的测定 | 第56-58页 |
| ·病毒中和活性检测 | 第58-59页 |
| 3 实验结果 | 第59-77页 |
| ·表达VP4 与VP4-LTB 重组乳酸乳球菌的构建 | 第59-62页 |
| ·目的基因的PCR 扩增结果 | 第59-60页 |
| ·表达载体pNZ8112 的鉴定结果 | 第60-61页 |
| ·重组乳酸乳球菌表达载体pNZ8112-VP4 的鉴定结果 | 第61页 |
| ·重组乳酸乳球菌表达载体pNZ8112-VP4-LTB 的鉴定结果 | 第61-62页 |
| ·目的基因VP4 与VP4-LTB 在乳酸乳球菌中的表达 | 第62-65页 |
| ·SDS-PAGE 鉴定结果 | 第62-63页 |
| ·Westen-blot 鉴定结果 | 第63-64页 |
| ·间接免疫荧光鉴定结果 | 第64-65页 |
| ·表达VP4 与VP4-LTB 重组干酪乳杆菌的构建 | 第65-68页 |
| ·目的基因的PCR 扩增结果 | 第65-67页 |
| ·表达载体pPG-1 的鉴定结果 | 第67页 |
| ·重组干酪乳杆菌表达载体pPG-1-VP4 的鉴定结果 | 第67-68页 |
| ·重组干酪乳杆菌表达载体pPG-1-VP4-LTB 的鉴定结果 | 第68页 |
| ·目的基因VP4 与VP4-LTB 在干酪乳杆菌中的表达 | 第68-71页 |
| ·SDS-PAGE 鉴定结果 | 第68-69页 |
| ·Westen-blot 鉴定结果 | 第69-70页 |
| ·间接免疫荧光鉴定结果 | 第70-71页 |
| ·重组菌口服免疫小鼠免疫学指标的测定 | 第71-75页 |
| ·免疫小鼠血清中特异性抗体IgG 测定 | 第71-72页 |
| ·小鼠粪便中特异性IgA 检测结果 | 第72-73页 |
| ·小鼠眼洗液中特异性sIgA 检测结果 | 第73页 |
| ·小鼠阴道洗液中特异性sIgA 检测结果 | 第73-74页 |
| ·乳汁中特异性sIgA 检测结果 | 第74-75页 |
| ·脾淋巴细胞增殖试验及细胞因子的检测 | 第75页 |
| ·脾淋巴细胞增殖试验结果 | 第75页 |
| ·细胞因子检测结果 | 第75页 |
| ·抗体中和效价检测结果 | 第75-77页 |
| 4 讨论 | 第77-86页 |
| ·乳酸乳球菌和干酪乳杆菌活菌载体表达猪轮状病毒免疫保护性基因作为口服疫苗的设计思路 | 第77-78页 |
| ·猪轮状病毒VP4 基因作为外源基因在重组乳酸菌中的表达及表达效果分析 | 第78-80页 |
| ·LTB 作为佐剂对口服免疫后黏膜免疫效果的影响 | 第80-81页 |
| ·口服重组乳酸菌免疫效果的评价 | 第81-86页 |
| ·口服免疫后黏膜免疫应答和系统免疫应答的效果分析 | 第81-82页 |
| ·乳酸乳球菌和干酪乳杆菌作为口服疫苗活菌载体的比较 | 第82-83页 |
| ·口服免疫重组乳酸菌后对细胞免疫的影响 | 第83-84页 |
| ·口服免疫重组乳酸菌后母源抗体的检测分析 | 第84-86页 |
| 5 结论 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-99页 |
| 附录 | 第99-103页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第103页 |
