| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| ·MAPK信号传递级联系统在真核生物界的防卫机制 | 第12页 |
| ·植物中MAPKs与抗逆性的研究介绍 | 第12-14页 |
| ·植物抗性相关的信号传导途径 | 第12-13页 |
| ·MAPK传递链在植物逆境反应中的作用 | 第13-14页 |
| ·传递链在植物激素调控中的作用 | 第14页 |
| ·化学诱导剂与MAPK传递链 | 第14页 |
| ·植物MAPKK激酶信号研究进展 | 第14-15页 |
| ·荧光定量PCR研究技术 | 第15-16页 |
| ·转基因功能的验证相关的技术 | 第16-21页 |
| ·农杆菌介导转化技术 | 第16-17页 |
| ·农杆菌介导转化机理 | 第16页 |
| ·农杆菌介导转化的特点 | 第16-17页 |
| ·农杆菌介导转化方法的适用范围及局限性 | 第17页 |
| ·RNA干涉技术 | 第17-21页 |
| ·RNA干涉技术原理 | 第17-19页 |
| ·RNA干涉的功能和意义 | 第19页 |
| ·RNA干涉技术的特点和方法 | 第19-20页 |
| ·RNA干涉技术在植物中的应用 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-38页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·材料种植 | 第23页 |
| ·细菌培养基 | 第23页 |
| ·感受态细胞制备、蓝白斑筛选溶液 | 第23页 |
| ·常用缓冲液 | 第23页 |
| ·抗生素母液 | 第23页 |
| ·用于转化的培养基 | 第23-24页 |
| ·菌株 | 第24页 |
| ·载体 | 第24页 |
| ·酶和其他试剂 | 第24页 |
| ·常用实验仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-38页 |
| ·日本晴不同处理的RNA的提取 | 第24-25页 |
| ·荧光定量PCR | 第25-28页 |
| ·RNA浓度的测定 | 第25页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第25-26页 |
| ·荧光定量PCR | 第26-28页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第28-32页 |
| ·超表达载体的构建 | 第28-30页 |
| ·抑制表达载体的构建 | 第30-32页 |
| ·表达载体导入根癌农杆菌 | 第32-33页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第32页 |
| ·冻融法导入根癌农杆菌EHA105菌株 | 第32-33页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第33-35页 |
| ·农杆菌的培养 | 第33页 |
| ·共培养 | 第33页 |
| ·诱导丛生芽 | 第33页 |
| ·诱导生根 | 第33-34页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第34-35页 |
| ·农杆菌介导的水稻转化 | 第35-36页 |
| ·外植体的消毒及愈伤组织诱导 | 第35页 |
| ·愈伤组织继代培养 | 第35页 |
| ·愈伤组织预培养 | 第35页 |
| ·农杆菌的培养 | 第35页 |
| ·农杆菌转化与共培养 | 第35-36页 |
| ·抗性愈伤组织筛选 | 第36页 |
| ·愈伤组织预分化培养 | 第36页 |
| ·愈伤组织分化与植株再生 | 第36页 |
| ·诱导生根及移栽 | 第36页 |
| ·转基因材料的PCR检测 | 第36页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥转化 | 第36-38页 |
| ·拟南芥转化(FLORAL DIP) | 第36-37页 |
| ·潜在转化株系的筛选 | 第37页 |
| ·转基因材料的PCR检测 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-65页 |
| ·OsMKKs基因的序列的寻找及分析 | 第38-40页 |
| ·OsMKKs基因序列的寻找 | 第38页 |
| ·OsMKKs染色体定位 | 第38页 |
| ·OsMKKs同源性分析 | 第38-40页 |
| ·水稻MAPKK基因家族的表达模式分析 | 第40-56页 |
| ·OsMKKs特异序列的引物设计与验证 | 第40页 |
| ·OsMKKs在不同器官下表达分析 | 第40-42页 |
| ·OsMKKs在不同逆境下的表达分析 | 第42-56页 |
| ·OsMKK1表达分析 | 第42-44页 |
| ·OsMKK3表达分析 | 第44-46页 |
| ·OsMKK4表达分析 | 第46-47页 |
| ·OsMKK5表达分析 | 第47-49页 |
| ·OsMKK6表达分析 | 第49-52页 |
| ·OsMKK8,9表达分析 | 第52页 |
| ·OsMKK10-1表达分析 | 第52-53页 |
| ·OsMKK10-2表达分析 | 第53-56页 |
| ·OsMKK3的克隆及转基因分析 | 第56-65页 |
| ·OsMKK3的克隆 | 第56页 |
| ·载体构建 | 第56-61页 |
| ·中间载体构建 | 第56-57页 |
| ·超表达载体构建 | 第57-58页 |
| ·抑制表达载体构建 | 第58-61页 |
| ·转基因植株的获得 | 第61-65页 |
| ·烟草转化工作 | 第61-62页 |
| ·水稻转化工作 | 第62-63页 |
| ·拟南芥转化工作 | 第63-65页 |
| 4 讨论 | 第65-69页 |
| ·OsMKKs组织特异性表达与相关的讨论 | 第65页 |
| ·OsMKKs不同逆境表达模式分析与相关功能的讨论 | 第65-67页 |
| ·关于表达载体构建 | 第67-68页 |
| ·在转基因中遇到的问题 | 第68页 |
| ·希望以后开展的工作 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 附录 | 第77-82页 |
| 致谢 | 第82页 |