| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-22页 |
| ·课题的提出 | 第10-11页 |
| ·干旱环境胁迫对植物的伤害 | 第11-12页 |
| ·植物的抗旱性研究 | 第12-15页 |
| ·植物适应干旱的方式 | 第12-13页 |
| ·植物适应干旱的生理生化机制 | 第13-15页 |
| ·植物在干旱胁迫下诱导表达的基因及蛋白 | 第15-17页 |
| ·植物干旱胁迫应答基因的表达调控 | 第17-18页 |
| ·AtRD28和AtCBF4基因的研究现状 | 第18-21页 |
| ·AtRD28基因的研究现状 | 第18-19页 |
| ·AtCBF4转录因子的研究现状 | 第19-21页 |
| ·本研究的目的和内容 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-31页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·菌株、质粒及主要载体 | 第22页 |
| ·基本培养基 | 第22-23页 |
| ·所用引物 | 第23页 |
| ·目的基因的克隆 | 第23-26页 |
| ·反转录 | 第24页 |
| ·目的基因的扩增 | 第24页 |
| ·PCR产物的回收和纯化 | 第24-25页 |
| ·TA克隆 | 第25-26页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第26-28页 |
| ·酶切反应 | 第26-27页 |
| ·连接反应 | 第27-28页 |
| ·重组质粒pBISA4-RD28和pBISA4-CBF4的方向鉴定 | 第28页 |
| ·转化农杆菌 | 第28页 |
| ·番茄的遗传转化 | 第28-29页 |
| ·转基因番茄植株的PCR检测 | 第29页 |
| ·转基因番茄植株的半定量RT-PCR分析 | 第29页 |
| ·转基因番茄植株抗旱性初步分析 | 第29-31页 |
| ·萌芽期抗旱性鉴定 | 第29-30页 |
| ·幼苗期抗旱性鉴定 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-40页 |
| ·目的基因的克隆 | 第31-32页 |
| ·拟南芥总RNA的质量检测 | 第31页 |
| ·AtRD28基因和AtCBF4基因片段的扩增 | 第31-32页 |
| ·AtRD28和AtCBF4基因扩增片段的鉴定 | 第32页 |
| ·目的基因正义(超量)表达载体的构建 | 第32-34页 |
| ·番茄的遗传转化 | 第34-35页 |
| ·转基因番茄植株的分子检测 | 第35-37页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第35-36页 |
| ·T1代转基因番茄植株的PCR检测 | 第36-37页 |
| ·部分转基因番茄植株的半定量PT-PCR检测 | 第37-38页 |
| ·转基因番茄抗旱性初步分析 | 第38-40页 |
| ·萌芽期抗旱性鉴定 | 第38-39页 |
| ·幼苗期的抗旱性鉴定 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| ·外源基因导入与植物的抗旱性研究及生物信息学的应用 | 第40页 |
| ·植物表达载体与启动子 | 第40-41页 |
| ·CBF/DREB转录因子的前景 | 第41-42页 |
| ·转基因插入失活现象 | 第42-43页 |
| 5 对后续工作的展望 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 附录 | 第51-57页 |
| 附录一:植物DNA的小量法提取程序 | 第51-52页 |
| 附录二:TriZOL一步法提取植物总RNA方法 | 第52-53页 |
| 附录三:质粒的小量提取方法 | 第53-54页 |
| 附录四:大肠杆菌热击感受态的制备 | 第54-55页 |
| 附录五:农杆菌感受态细胞的制备 | 第55-56页 |
| 附录六:AtRD28基因测序结果比对分析 | 第56-57页 |
| 附录七:AtCBF4基因测序结果比对分析 | 第57页 |