| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1 鸭病毒性肝炎的流行与分布 | 第11-12页 |
| 2 DHV-1的分类地位 | 第12页 |
| 3 DHV-1的病原特性 | 第12-13页 |
| 4 DHV-1的纯化研究 | 第13-14页 |
| 5 DHV-1的诊断技术研究 | 第14-15页 |
| 6 DHV-1的基因组结构及其功能 | 第15-18页 |
| ·小RNA病毒的基因组结构及其功能 | 第15-17页 |
| ·DHV-1的基因组结构及其功能的初步分析 | 第17-18页 |
| 7 DHV-1的病毒蛋白及其功能 | 第18-19页 |
| 8 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 1型鸭肝炎病毒JX株基因组序列的测定与分析 | 第20-38页 |
| 1 材料与方法 | 第20-27页 |
| ·试验材料 | 第20-21页 |
| ·毒株 | 第20页 |
| ·质粒及菌株 | 第20页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·主要溶液及其配制 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-27页 |
| ·病毒的增殖 | 第22页 |
| ·引物的设计与合成 | 第22-23页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第23页 |
| ·RT-PCR扩增及检测 | 第23页 |
| ·RT-PCR产物的回收与纯化 | 第23-24页 |
| ·RT-PCR产物与pMD18-T载体的连接 | 第24页 |
| ·E.coli DH5α感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第24-25页 |
| ·连接产物的转化 | 第25页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第26页 |
| ·序列测定和DHV-1 JX株基因组序列的拼接 | 第26-27页 |
| ·DHV-1 JX株基因组序列分析 | 第27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-35页 |
| ·DHV-1 JX株基因组各片段的克隆与鉴定 | 第27-28页 |
| ·DHV-1 JX株基因组序列分段RT-PCR扩增结果 | 第27页 |
| ·目的片段的克隆及鉴定 | 第27-28页 |
| ·DHV-1 JX株的序列测定及分析 | 第28-35页 |
| ·序列测定结果及推导的氨基酸序列 | 第28-32页 |
| ·不同DHV毒株的同源性分析 | 第32页 |
| ·遗传进化分析 | 第32-34页 |
| ·DHV-1 JX株基因组结构的分析 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35-37页 |
| ·DHV-1 JX株与30株不同DHV毒株的同源性比较与分析 | 第35-36页 |
| ·DHV-1 JX株基因组特征的分析 | 第36-37页 |
| 4 结论 | 第37-38页 |
| 第三章 DHV-1 JX株结构蛋白VP0、VP1基因的原核表达 | 第38-57页 |
| 1 材料与方法 | 第38-47页 |
| ·试验材料 | 第38-40页 |
| ·毒株和血清 | 第38页 |
| ·质粒及菌株 | 第38页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第38-39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39-40页 |
| ·主要溶液及其配制 | 第40-41页 |
| ·抗生素类 | 第40页 |
| ·SDS-PAGE相关溶液 | 第40页 |
| ·Western-blot相关溶液 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41-47页 |
| ·VP0、VP1表达引物的设计与合成 | 第41页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第41页 |
| ·RT-PCR扩增及检测 | 第41页 |
| ·RT-PCR产物的回收与纯化 | 第41-42页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第42-43页 |
| ·重组阳性质粒的筛选与鉴定 | 第43-45页 |
| ·重组表达质粒在E.coli BL21(DE3)菌中的诱导表达及检测 | 第45页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第45-46页 |
| ·Western-blot分析 | 第46页 |
| ·重组蛋白的可溶性分析 | 第46-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-54页 |
| ·DHV-1 JX株VP0和VP1基因的扩增 | 第47页 |
| ·重组表达质粒的构建与鉴定 | 第47-51页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第47-48页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第48页 |
| ·重组质粒的序列测定与分析 | 第48-51页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE和Western-blot分析 | 第51-53页 |
| ·VP0蛋白的表达及SDS-PAGE分析 | 第51页 |
| ·VP1蛋白的表达及SDS-PAGE分析 | 第51-52页 |
| ·重组VP0蛋白和VP1蛋白的Western-blot分析 | 第52-53页 |
| ·重组VP0蛋白和VP1蛋白的可溶性分析 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-56页 |
| ·重组表达质粒pET-28a-VP0和pET-28a-VP1的构建 | 第54页 |
| ·重组表达质粒pET-28a-VP0和pET-28a-VP1的表达 | 第54-55页 |
| ·重组VP0蛋白和VP1蛋白的免疫活性分析 | 第55-56页 |
| 4 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 研究生期间发表论文情况 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
