| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 简写及缩略语 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 第一部分 文献综述 | 第17-46页 |
| 第一章 实验小鼠精液冷冻保存的研究进展 | 第17-32页 |
| 1 精子冷冻保存研究简史 | 第17-18页 |
| 2 C57BL/6J小鼠精子冷冻保存现状 | 第18页 |
| 3 精子冷冻保存原理 | 第18-19页 |
| 4 精子的冷冻损伤 | 第19页 |
| 5 小鼠精子冷冻保存方法 | 第19-23页 |
| ·冷冻保护剂的研究与应用 | 第19-21页 |
| ·常用的小鼠精子冷冻稀释液 | 第21-22页 |
| ·小鼠精子冷冻保存的基本程序 | 第22页 |
| ·冷冻保存小鼠精子的包装方法 | 第22页 |
| ·小鼠冷冻精子的解冻 | 第22-23页 |
| ·精液解后的处理 | 第23页 |
| 6 冷冻精液质量评定 | 第23-24页 |
| ·常规分析 | 第23-24页 |
| ·精子尾部低渗膨胀试验 | 第24页 |
| ·体外受精 | 第24页 |
| 7 影响精液冷冻保存效果的因素 | 第24-26页 |
| ·低温保护剂(CPM)的影响 | 第24-25页 |
| ·渗透压的影响 | 第25页 |
| ·冷冻和解冻温度的影响 | 第25-26页 |
| ·小鼠的个体差异 | 第26页 |
| ·其它因素 | 第26页 |
| 8 C57BL/6J品系小鼠及以其为遗传背景转基因小鼠精子冷冻 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-32页 |
| 第二章 小鼠单精注射的研究进展 | 第32-46页 |
| 1 小鼠ICSI的研究简史 | 第32-33页 |
| 2 显微操作系统 | 第33页 |
| 3 影响胞质内单精注射的因素 | 第33-40页 |
| ·技术因素 | 第33-37页 |
| ·非技术因素 | 第37-40页 |
| 4 小鼠ICSI的应用前景 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 第二部分 实验研究 | 第46-89页 |
| 第三章 C57BL/6J小鼠精子冷冻技术的研究 | 第46-74页 |
| 1 材料 | 第47-51页 |
| ·实验动物 | 第47页 |
| ·主要仪器设备 | 第47-48页 |
| ·主要试剂药品 | 第48页 |
| ·试剂配制 | 第48-51页 |
| 2 方法 | 第51-54页 |
| ·嘴吸式移卵针的拉制 | 第51页 |
| ·雌鼠的超数排卵 | 第51页 |
| ·精子冷冻 | 第51页 |
| ·培养液的预平衡 | 第51-52页 |
| ·冻精的解冻与体外受精 | 第52页 |
| ·胚胎培养和移植 | 第52-53页 |
| ·实验设计 | 第53-54页 |
| ·数据处理 | 第54页 |
| 3 结果 | 第54-63页 |
| ·C57BL/6J和Y3F小鼠冻精经不同方法解冻后的体外受精卵裂率 | 第54-55页 |
| ·获能时间对小鼠冻精体外受精卵裂率的影响 | 第55页 |
| ·冻精获能液中添加不同生物活性物质对体外受精卵裂率的影响 | 第55-58页 |
| ·不同受精液对C57BL/6J小鼠冷冻精子体外受精卵裂率的影响 | 第58页 |
| ·卵黄对C57BL/6J小鼠冻精体外受精卵裂率的影响 | 第58-59页 |
| ·甘油浓度对C57BL/6J小鼠冷冻精子体外受精卵裂率的影响 | 第59-60页 |
| ·甘油—卵黄配伍对C57BL/6J小鼠冻精体外受精卵裂率的影响 | 第60-61页 |
| ·乙酰胺对C57BL/6J小鼠冷冻精子体外受精卵裂率的影响 | 第61页 |
| ·混合添加乙酰胺和卵黄对C57BL/6J小鼠冻精体外受精卵裂率的影响 | 第61-62页 |
| ·C57BL/6J小鼠体外受精胚胎的培养与移植 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-69页 |
| ·解冻方法对C57BL/6J小鼠冻精体外受精结果的影响 | 第63页 |
| ·获能时间对C57BL/6J小鼠冷冻精子体外受精的影响 | 第63-64页 |
| ·获能液中添加生物活性物质对体外受精的影响 | 第64-65页 |
| ·受精液中添加FSH和E2对C57BL/6J小鼠冻精体外受精结果的影响 | 第65-66页 |
| ·不同浓度卵黄对C57BL/6J小鼠冷冻精子体外受精结果的影响 | 第66页 |
| ·不同浓度甘油对C57BL/6J小鼠冷冻精子体外受精结果的影响 | 第66-67页 |
| ·甘油—卵黄联合使用对C57BL/6J小鼠冻精体外受精结果的影响 | 第67页 |
| ·乙酰胺对C57BL/6J小鼠冷冻精子体外受精结果的影响 | 第67页 |
| ·小鼠体外受精胚胎的培养 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 第四章 C57BL/6J小鼠ICSI技术的研究 | 第74-89页 |
| 1 材料与方法 | 第75-80页 |
| ·实验动物 | 第75页 |
| ·主要仪器设备及耗材 | 第75页 |
| ·试剂配制 | 第75-76页 |
| ·显微操作针的拉制 | 第76页 |
| ·ICSI操作准备 | 第76-78页 |
| ·显微注射 | 第78页 |
| ·注射卵的体外培养和胚胎移植 | 第78页 |
| ·实验设计 | 第78-79页 |
| ·统计分析 | 第79-80页 |
| 2 结果 | 第80-83页 |
| ·采卵时间对ICSI结果的影响 | 第80页 |
| ·不同注射针直径对ICSI结果的影响 | 第80-81页 |
| ·高渗显微操作液对小鼠ICSI胚胎发育率的影响 | 第81页 |
| ·添加细胞松驰素(CB)对小鼠ICSI胚胎发育率的影响 | 第81-82页 |
| ·C57BL/6J小鼠新鲜精子、冷冻精子体外受精及冻精ICSI结果的比较 | 第82页 |
| ·胚胎移植 | 第82-83页 |
| 3 讨论 | 第83-87页 |
| 参考文献 | 第87-89页 |
| 全文结论 | 第89-91页 |
| 图版 | 第91-95页 |
| 附录 溶液配制 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
