| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 插图和附表清单 | 第9-10页 |
| 主要符号表 | 第10-12页 |
| 文献综述 | 第12-19页 |
| 引言 | 第19-20页 |
| 1.材料与方法 | 第20-36页 |
| ·实验鸡胚 | 第20页 |
| ·质粒和菌种 | 第20页 |
| ·病毒和细胞 | 第20页 |
| ·酶类及相关试剂 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·常用溶液配制 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·IBDV部分VP2基因的克隆及序列比较 | 第23-30页 |
| ·引物设计 | 第23页 |
| ·病毒的增值 | 第23-24页 |
| ·病毒RNA的抽提 | 第24页 |
| ·反转录合成cDNA第一链 | 第24-25页 |
| ·片段P12的PCR扩增及其初步鉴定 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR产物的回收与纯化 | 第26页 |
| ·RT-PCR产物的单酶切鉴定 | 第26页 |
| ·PET-32a-P12重组质粒的构建与鉴定 | 第26-30页 |
| ·RT-PCR产物的序列测定与序列分析 | 第30页 |
| ·IBDV部分VP2基因的克隆与原核表达及其鉴定 | 第30-36页 |
| ·表达片段的PCR扩增 | 第30页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第30-31页 |
| ·pGEX-4T-1-P_(13)原核表达重组质粒的构建与鉴定 | 第31-34页 |
| ·pGEX-4T-1-P_(13)的原核表达 | 第34-36页 |
| 2.结果与分析 | 第36-45页 |
| ·IBDV部分VP2基因的克隆及序列比较 | 第36-42页 |
| ·病毒的增殖 | 第36页 |
| ·病毒总RNA的提取 | 第36页 |
| ·RT-PCR扩增目的基因P_(12) | 第36-37页 |
| ·P12基因的单酶切鉴定 | 第37页 |
| ·菌液PCR鉴定阳性克隆 | 第37-38页 |
| ·重组质粒PET-32a-P_(12)的双酶切鉴定 | 第38页 |
| ·P12基因的序列测定结果 | 第38-41页 |
| ·P12基因核苷酸序列的同源性比较 | 第41-42页 |
| ·IBDV部分VP2基因的原核表达 | 第42页 |
| ·原核表达片段P_(13)基因的扩增 | 第42页 |
| ·重组质粒PGEX-4T-1-P_(13)的双酶切鉴定 | 第42页 |
| ·重组质粒pGEX-4T-1-P_(13)的原核表达 | 第42-45页 |
| ·pGEX-4T-1-P_(13)原核表达蛋白的鉴定 | 第42-43页 |
| ·pGEX-4T-1-P_(13)原核表达诱导时间的优化 | 第43页 |
| ·pGEX-4T-1-P_(13)原核表达诱导浓度的优化 | 第43-45页 |
| 3.讨论 | 第45-53页 |
| ·IBDV的增殖及其RNA的提取 | 第45-46页 |
| ·传染性法氏囊病毒P_(12)片段的克隆 | 第46-50页 |
| ·引物的设计 | 第46-47页 |
| ·RT-PCR的扩增 | 第47-48页 |
| ·PCR条件的优化 | 第48-49页 |
| ·克隆载体的选择 | 第49-50页 |
| ·表达系统的选择 | 第50-51页 |
| ·表达载体及宿主菌的选择 | 第51-53页 |
| 4.结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 附录 | 第58-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
