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草鱼成纤维细胞生长因子-8(FGF8)的cDNA克隆与序列分析

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第一章 文献综述第10-18页
   ·成纤维细胞生长因子(FGF)家族成员及其生物学功能第10-11页
     ·成纤维细胞生长因子家族成员第10-11页
     ·成纤维细胞生长因子的生物学功能第11页
   ·FGF8的发现及其蛋白质结构第11-12页
   ·FGF的作用机制第12-13页
   ·FGF8在脊椎动物胚胎发育中的作用第13-17页
     ·FGF8对脊椎动物神经系统发育的促进作用第13页
     ·FGF8对脊椎动物肢体发育的调控作用第13-14页
     ·FGF8在脊椎动物内脏器官发育过程中的调控作用第14-15页
     ·FGF8对脊椎动物咽喉系统发育的调控第15页
     ·FGF8对脊椎动物耳系统发育的调控第15-16页
     ·FGF8对脊椎动物不对称发育的影响第16-17页
   ·展望第17-18页
第二章 绪论第18-21页
   ·研究的目的和意义第18-19页
   ·研究的范围与内容第19-21页
第三章 材料与方法第21-34页
   ·实验动物、载体和菌种第21页
     ·实验动物第21页
     ·菌种及质粒第21页
   ·试剂和试剂盒第21-22页
     ·主要分子生物学试剂第21页
     ·试剂的配制第21-22页
     ·试剂盒第22页
   ·仪器与设备第22-23页
   ·引物设计第23页
   ·总 RNA的制备及 RNA完整性检测第23-24页
     ·总 RNA的制备第23-24页
     ·RNA的检测第24页
   ·3’RACE原理和程序第24-28页
     ·3’RACE原理第24-25页
     ·FGF8 cDNA 3'末端扩增的操作程序第25-26页
     ·草鱼 FGF8 cDNA中间片段扩增第26-27页
     ·草鱼 FGF8 cDNA 5’末端扩增第27页
     ·草鱼 FGF8 cDNA序列包含编码区片段的扩增第27-28页
   ·目的片段的克隆与测序第28-31页
     ·琼脂糖凝胶电泳第28页
     ·目的片段的回收第28-29页
     ·大肠杆菌 DH5 α感受态的制备第29页
     ·目的片段与pMD18-T载体的连接第29页
     ·质粒 DNA转化大肠杆菌第29-30页
     ·转化子的蓝白斑菌落筛选第30页
     ·转化子的菌液PCR扩增鉴定第30-31页
   ·数据分析第31-34页
     ·分析工具第31-32页
     ·分析方法第32-34页
第四章 结果与分析第34-49页
   ·设计基因特异性PCR引物第34页
   ·草鱼全脑总RNA的提取第34-35页
   ·草鱼全脑总cDNA的获得第35页
   ·草鱼成纤维细胞生长因子-8(FGF8)的克隆第35-37页
     ·草鱼 FGF8 cDNA 3'末端序列的扩增与克隆第35-36页
     ·草鱼 FGF8 cDNA中间片段序列的扩增与克隆第36-37页
     ·草鱼 FGF8 cDNA 5’末端序列的扩增与克隆第37页
     ·草鱼 FGF8 cDNA序列包含编码区片段的扩增第37页
   ·草鱼 FGF8的cDNA序列分析第37-40页
   ·草鱼 FGF8推导蛋白的一级结构分析第40-42页
     ·FGF8推导蛋白的基本参数第40-41页
     ·FGF8推导蛋白的氨基酸组份分析第41-42页
   ·FGF8推导氨基酸序列同源性及进化关系分析第42-46页
     ·FGF8推导氨基酸序列同源性分析第42-45页
     ·FGF8推导氨基酸序列的系统发育进化树分析第45-46页
   ·FGF8蛋白的二级结构预测及结构域分析第46-47页
   ·草鱼FGF8蛋白的三级结构预测及分析第47-49页
第五章 讨论第49-54页
   ·PCR特异性引物的设计第49页
   ·总 RNA的提取第49-50页
   ·PCR反应条件优化第50页
   ·草鱼 FGF8氨基酸序列的同源性分析第50-51页
   ·草鱼 FGF8蛋白的二级结构预测及疏水性分析第51页
   ·草鱼 FGF8蛋白的三级结构预测第51-52页
   ·草鱼 FGF8蛋白的信号肽功能及其作用机制第52-54页
第六章 结论第54-56页
参考文献第56-68页
致谢第68-69页
硕士学习期间发表的论文及参与的课题第69-70页
缩写词第70-71页

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