| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| ·成纤维细胞生长因子(FGF)家族成员及其生物学功能 | 第10-11页 |
| ·成纤维细胞生长因子家族成员 | 第10-11页 |
| ·成纤维细胞生长因子的生物学功能 | 第11页 |
| ·FGF8的发现及其蛋白质结构 | 第11-12页 |
| ·FGF的作用机制 | 第12-13页 |
| ·FGF8在脊椎动物胚胎发育中的作用 | 第13-17页 |
| ·FGF8对脊椎动物神经系统发育的促进作用 | 第13页 |
| ·FGF8对脊椎动物肢体发育的调控作用 | 第13-14页 |
| ·FGF8在脊椎动物内脏器官发育过程中的调控作用 | 第14-15页 |
| ·FGF8对脊椎动物咽喉系统发育的调控 | 第15页 |
| ·FGF8对脊椎动物耳系统发育的调控 | 第15-16页 |
| ·FGF8对脊椎动物不对称发育的影响 | 第16-17页 |
| ·展望 | 第17-18页 |
| 第二章 绪论 | 第18-21页 |
| ·研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| ·研究的范围与内容 | 第19-21页 |
| 第三章 材料与方法 | 第21-34页 |
| ·实验动物、载体和菌种 | 第21页 |
| ·实验动物 | 第21页 |
| ·菌种及质粒 | 第21页 |
| ·试剂和试剂盒 | 第21-22页 |
| ·主要分子生物学试剂 | 第21页 |
| ·试剂的配制 | 第21-22页 |
| ·试剂盒 | 第22页 |
| ·仪器与设备 | 第22-23页 |
| ·引物设计 | 第23页 |
| ·总 RNA的制备及 RNA完整性检测 | 第23-24页 |
| ·总 RNA的制备 | 第23-24页 |
| ·RNA的检测 | 第24页 |
| ·3’RACE原理和程序 | 第24-28页 |
| ·3’RACE原理 | 第24-25页 |
| ·FGF8 cDNA 3'末端扩增的操作程序 | 第25-26页 |
| ·草鱼 FGF8 cDNA中间片段扩增 | 第26-27页 |
| ·草鱼 FGF8 cDNA 5’末端扩增 | 第27页 |
| ·草鱼 FGF8 cDNA序列包含编码区片段的扩增 | 第27-28页 |
| ·目的片段的克隆与测序 | 第28-31页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第28页 |
| ·目的片段的回收 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌 DH5 α感受态的制备 | 第29页 |
| ·目的片段与pMD18-T载体的连接 | 第29页 |
| ·质粒 DNA转化大肠杆菌 | 第29-30页 |
| ·转化子的蓝白斑菌落筛选 | 第30页 |
| ·转化子的菌液PCR扩增鉴定 | 第30-31页 |
| ·数据分析 | 第31-34页 |
| ·分析工具 | 第31-32页 |
| ·分析方法 | 第32-34页 |
| 第四章 结果与分析 | 第34-49页 |
| ·设计基因特异性PCR引物 | 第34页 |
| ·草鱼全脑总RNA的提取 | 第34-35页 |
| ·草鱼全脑总cDNA的获得 | 第35页 |
| ·草鱼成纤维细胞生长因子-8(FGF8)的克隆 | 第35-37页 |
| ·草鱼 FGF8 cDNA 3'末端序列的扩增与克隆 | 第35-36页 |
| ·草鱼 FGF8 cDNA中间片段序列的扩增与克隆 | 第36-37页 |
| ·草鱼 FGF8 cDNA 5’末端序列的扩增与克隆 | 第37页 |
| ·草鱼 FGF8 cDNA序列包含编码区片段的扩增 | 第37页 |
| ·草鱼 FGF8的cDNA序列分析 | 第37-40页 |
| ·草鱼 FGF8推导蛋白的一级结构分析 | 第40-42页 |
| ·FGF8推导蛋白的基本参数 | 第40-41页 |
| ·FGF8推导蛋白的氨基酸组份分析 | 第41-42页 |
| ·FGF8推导氨基酸序列同源性及进化关系分析 | 第42-46页 |
| ·FGF8推导氨基酸序列同源性分析 | 第42-45页 |
| ·FGF8推导氨基酸序列的系统发育进化树分析 | 第45-46页 |
| ·FGF8蛋白的二级结构预测及结构域分析 | 第46-47页 |
| ·草鱼FGF8蛋白的三级结构预测及分析 | 第47-49页 |
| 第五章 讨论 | 第49-54页 |
| ·PCR特异性引物的设计 | 第49页 |
| ·总 RNA的提取 | 第49-50页 |
| ·PCR反应条件优化 | 第50页 |
| ·草鱼 FGF8氨基酸序列的同源性分析 | 第50-51页 |
| ·草鱼 FGF8蛋白的二级结构预测及疏水性分析 | 第51页 |
| ·草鱼 FGF8蛋白的三级结构预测 | 第51-52页 |
| ·草鱼 FGF8蛋白的信号肽功能及其作用机制 | 第52-54页 |
| 第六章 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 硕士学习期间发表的论文及参与的课题 | 第69-70页 |
| 缩写词 | 第70-71页 |