中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-7页 |
前言 | 第7-18页 |
1.安普霉素概述 | 第8页 |
2.链霉菌抗生素生物单组分的获得 | 第8-10页 |
3.结合转移 | 第10-11页 |
4.黑暗链霉菌中抗生素生物合成的研究进展 | 第11-17页 |
5.研究黑暗链霉菌H6中抗生素生物合成基因的立题方向 | 第17-18页 |
实验材料 | 第18-22页 |
1.菌种 | 第18页 |
2.质粒 | 第18页 |
3.试剂 | 第18-19页 |
4.缓冲液 | 第19页 |
5.培养基 | 第19-21页 |
6.仪器 | 第21-22页 |
实验方法 | 第22-27页 |
1.大肠杆菌质粒DNA小量提取 | 第22页 |
2.大肠杆菌质粒DNA大量提取 | 第22页 |
3.链霉菌质粒DNA的提取 | 第22页 |
4.链霉菌总DNA的提取 | 第22-23页 |
5.大肠杆菌DH-5α感受态细胞的制备 | 第23页 |
6.质粒DNA转化大肠杆菌 | 第23页 |
7.DNA酶切和连接 | 第23-24页 |
8.DNA电泳和片段回收 | 第24页 |
9.T_4 DNA聚合酶补平试验 | 第24页 |
10.PCR实验 | 第24-25页 |
11.接合转移实验 | 第25页 |
12.黑暗链霉菌发酵及检测操作的实验方法 | 第25-27页 |
·发酵流程 | 第25页 |
·抗生素组分检测 | 第25-27页 |
结果与讨论 | 第27-36页 |
第一部分 黑暗链霉菌妥布霉素生物合成基因tbmA的功能研究 | 第27-36页 |
1.tacA基因的功能研究 | 第27-34页 |
·阻断载体的构建 | 第27-32页 |
·接合转移实验 | 第32页 |
·单交换基因阻断菌株的获得 | 第32页 |
·基因阻断菌株体内游离质粒的考察 | 第32页 |
·基因整合分析 | 第32-33页 |
·阻断变株的发酵组分分析 | 第33-34页 |
2.讨论 | 第34-36页 |
参考文献 | 第36-38页 |
致谢 | 第38-39页 |