| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 综述 | 第10-33页 |
| 一、植物耐盐性的研究进展 | 第10-25页 |
| 1 盐胁迫对植物的伤害 | 第10-13页 |
| ·原初胁迫 | 第10-12页 |
| ·次生胁迫 | 第12-13页 |
| 2 植物的耐盐机理 | 第13-17页 |
| ·植物的避盐机理 | 第13页 |
| ·植物对盐害的缓解机理 | 第13-14页 |
| ·植物的耐盐生理 | 第14-17页 |
| 3. 盐胁迫信号传递途径 | 第17-20页 |
| 4 植物耐盐相关基因的克隆进展 | 第20-25页 |
| ·渗透调节有关基因 | 第21-23页 |
| ·保护酶基因 | 第23页 |
| ·转录因子和信号传递基因 | 第23-24页 |
| ·离子转运相关基因 | 第24页 |
| ·ABA所诱导的逆境相关基因 | 第24-25页 |
| 二、拟南芥及其在分子生物学中的应用 | 第25-26页 |
| ·拟南芥简介 | 第25页 |
| ·拟南芥在分子生物学研究中的应用 | 第25-26页 |
| 三、植物谷氨酰胺合成酶研究进展 | 第26-32页 |
| 1 GS同工酶的种类及在细胞中的定位 | 第27-28页 |
| 2 GS同工酶的性质 | 第28-29页 |
| ·最适pH值 | 第28页 |
| ·稳定性和最适温度 | 第28页 |
| ·抑制剂对 GS的影响 | 第28-29页 |
| 3 GS的分子生物学方面的研究进展 | 第29-31页 |
| ·GS的基因及其编码的几种多肽 | 第29页 |
| ·GS基因的结构 | 第29-30页 |
| ·GS2前体及其成熟酶的形式 | 第30页 |
| ·GS基因表达的调控 | 第30-31页 |
| 4 GS和植物抗盐性的关系 | 第31-32页 |
| ·GS和抗盐有关的证据 | 第31页 |
| ·GS在脯氨酸合成中的作用 | 第31-32页 |
| 四 本论文的研究目的及立题依据 | 第32-33页 |
| 研究报告 | 第33-51页 |
| 第一章 表达载体的构建 | 第33-41页 |
| 1 材料与方法 | 第33-41页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·小麦谷氨酰胺合成酶的前体基因(gS2)ORF区的克隆 | 第33-37页 |
| ·碱裂解法提取质粒 | 第33-34页 |
| ·设计PCR引物 | 第34页 |
| ·目的片段的扩增、回收及连接 | 第34-35页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
| ·连接产物的转化 | 第36页 |
| ·快提质粒，鉴定重组子 | 第36页 |
| ·阳性克隆的酶切鉴定 | 第36-37页 |
| ·测序鉴定 | 第37页 |
| ·双元表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·由中间载体pMD18-gS2获得目的片段 | 第37页 |
| ·双元表达载体pCAMBIA1300-gS2(简称p1300-gS2)的构建 | 第37-38页 |
| ·双元表达载体pCAMBIA1300-gS2转化农杆菌 | 第38页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第38页 |
| ·农杆菌转化 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-41页 |
| ·克隆小麦谷氨酰胺合成酶的前体基因(GS2) ORF区的鉴定 | 第38-40页 |
| ·双元表达载体构建 | 第40-41页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第40-41页 |
| 第二章 小麦谷氨酰胺合成酶的前体基因(GS2)的功能研究 | 第41-51页 |
| ·根癌农杆菌GV3101转化拟南芥 | 第41-51页 |
| ·拟南芥的种植 | 第41-42页 |
| ·转化拟南芥 | 第42页 |
| ·种子的收获 | 第42-43页 |
| ·阳性植株筛选与移栽 | 第43-44页 |
| ·T1转基因拟南芥的单株收获 | 第44页 |
| ·T2转基因植株分离比统计 | 第44页 |
| ·T2阳性转基因植株的DNA鉴定 | 第44-46页 |
| ·T2阳性转基因植株的RT-PCR鉴定 | 第46-48页 |
| ·小麦谷氨酰胺合成酶的前体基因(gS2)对拟南芥根生长的影响 | 第48-51页 |
| 讨论 | 第51-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 附录 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
