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Dof家族中与氮胁迫相关基因的鉴定及其转基因水稻培育

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
缩略词表第9-10页
1 文献综述第10-19页
   ·氮素研究概述第10-15页
     ·氮的生理功能第10页
     ·氮素的吸收和转运第10-11页
     ·氮素同化第11-13页
       ·硝酸还原阶段第11-12页
       ·氨同化阶段第12-13页
     ·碳氮代谢的的相互作用第13-14页
     ·植物体内光合碳代谢和氮代谢之间的协调第14页
     ·氮素同化的基因工程策略第14-15页
   ·DOF(DNA BINDING WITH ONE FINGER)转录因子家族第15-17页
     ·Dof蛋白的结构第16-17页
     ·与Dof蛋白结合的DNA序列特异性第17页
   ·研究目的与意义第17-19页
2.材料与方法第19-42页
   ·试验材料第19-20页
     ·受体植物材料第19页
     ·菌株、质粒及外源片段第19-20页
   ·试验方法第20-30页
     ·候选基因的选定和分离第20-22页
       ·候选基因OsDof-6的选定第20页
       ·候选基因OsDof-13的选定第20-22页
       ·候选基因At2g37590的选定和克隆第22页
     ·亚细胞定位第22-24页
       ·亚细胞定位载体的构建第22-23页
       ·粒子轰击和GFP观察第23-24页
     ·酵母单杂交第24-26页
       ·酵母单杂交载体的构建第25-26页
       ·共转化酵母细胞第26页
     ·植物超表达载体的构建第26-27页
     ·农杆菌介导的水稻的遗传转化第27页
     ·T_0代转基因植株的阳性检测第27-28页
     ·T_0代转基因植株的拷贝数检测第28-30页
     ·T_1代单株干重和氮含量分析第30页
   ·结果与分析第30-42页
     ·OsDof-6的序列分析第30页
     ·OsDof-13的低氮诱导表达分析和序列分析第30-32页
     ·At2g37590的序列分析第32-33页
     ·OsDof-6和OsDof-13以及At2g37590的亚细胞定位第33-35页
       ·亚细胞定位载体的鉴定第33-34页
       ·GFP的观察第34-35页
     ·OsDof-6和OsDof-13以及At2g37590与PEPC和IDH启动子的互作第35-37页
       ·酵母单杂交载体的鉴定第35页
       ·共转化酵母细胞第35-37页
     ·植物超表达载体的鉴定第37页
     ·农杆菌介导水稻的遗传转化第37页
     ·T_0代转基因植株的阳性检测第37-39页
     ·OsDof-13T_0代转基因植株的拷贝数检测第39页
     ·At2g37590T_0代转基因植株的Northern blotting检测第39-40页
     ·At2g37590T_1代单株干重和氮含量分析第40-41页
     ·结果分析第41-42页
3.讨论第42-46页
   ·T_0代AT2G37590的表达量与T_1代单株干重的关系的探讨第42页
   ·A-酮戊二酸可能是碳氮平衡的信号分子第42页
   ·试验中的个人体会第42-44页
     ·关于组培工作第43页
     ·水培试验中的注意事项第43页
     ·关于植株氮含量的测定第43-44页
   ·功能验证试验中低氮值的设定第44页
   ·关于AT2G37590后继功能验证试验的设想第44-45页
   ·植物营养研究的基因工程策略第45-46页
参考文献第46-52页
附录第52-69页
致谢第69页

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