| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 1. 引言 | 第8-15页 |
| ·VIGS的发现 | 第8-9页 |
| ·RNA介导的病毒抗性(RMD)的发现 | 第8-9页 |
| ·VIGS的提出 | 第9页 |
| ·VIGS技术的原理和机制 | 第9-10页 |
| ·VIGS是转录后基因沉默 | 第9页 |
| ·VIGS的本质是植物体对病毒侵染的防御机制 | 第9-10页 |
| ·VIGS技术应用于植物功能基因组学研究的原理 | 第10页 |
| ·VIGS技术的发展和应用 | 第10-12页 |
| ·VIGS技术的发展 | 第10页 |
| ·根部吸收法的原理 | 第10页 |
| ·VIGS技术成功应用于基因功能研究的植物种类 | 第10-11页 |
| ·VIGS载体的发展 | 第11-12页 |
| ·VIGS技术在植物功能基因组学研究中的应用前景 | 第12-13页 |
| ·VIGS需考虑的两个因素 | 第13页 |
| ·VIGS载体的插入片段 | 第13页 |
| ·影响VIGS的环境因素 | 第13页 |
| ·PDS基因在基因沉默系统中的作用 | 第13-14页 |
| ·立题依据 | 第14-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-21页 |
| ·材料 | 第15-16页 |
| ·植物材料 | 第15页 |
| ·质粒和菌种 | 第15页 |
| ·化学药品及试剂盒 | 第15页 |
| ·培养基 | 第15页 |
| ·PCR引物 | 第15-16页 |
| ·实验方法 | 第16-21页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第16-17页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第17-18页 |
| ·侵染材料烟草幼苗的培养 | 第18页 |
| ·农杆菌侵染烟草 | 第18-19页 |
| ·根部吸收法 | 第19页 |
| ·植物基因组DNA的分离 | 第19页 |
| ·总RNA的分离 | 第19-20页 |
| ·转化植株RT-PCR的检测 | 第20-21页 |
| 3 结果 | 第21-27页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第21-23页 |
| ·TA克隆 | 第21-22页 |
| ·病毒瞬时表达载体TRV2 | 第22页 |
| ·病毒瞬时表达载体pTRV2-pds的构建及鉴定 | 第22-23页 |
| ·PDS基因沉默植株的表型分析 | 第23页 |
| ·农杆菌介导的转录后基因沉默瞬时表达体系的优化 | 第23-24页 |
| ·农杆菌的浓度(OD值)与诱导基因沉默的效率 | 第23页 |
| ·植物的苗龄与诱导基因沉默的效率 | 第23-24页 |
| ·根部吸收法与注射法的比较 | 第24页 |
| ·半定量RT-PCR水平分析 | 第24-27页 |
| 4 讨论 | 第27-29页 |
| 一、基因沉默的启动、传导和维持阶段 | 第27页 |
| 二、植株的苗龄与农杆菌的浓度是诱导基因沉默瞬时表达体系的二个关键 的影响因素 | 第27-29页 |
| 5 结论 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-33页 |
| 致谢 | 第33页 |