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柞蚕微孢子虫核糖体基因及家蚕、柞蚕微孢子虫蛋白质组以及侵染家蚕后中肠的比较蛋白质组学研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-19页
第1章 绪论第19-41页
   ·微孢子虫的研究概况第19-34页
     ·微孢子虫的形态结构第19-20页
     ·微孢子虫的生活史第20-22页
     ·微孢子虫发芽的机理第22-23页
     ·微孢子虫进入寄主细胞的方式第23-24页
     ·微孢子虫体外诱导发芽的影响因子第24-25页
     ·微孢子虫的分类学研究第25-27页
     ·微孢子虫的进化地位和两种假说第27-29页
     ·微孢子虫的蛋白质第29-31页
     ·微孢子虫的传染途径第31-32页
     ·诊断方法第32-33页
     ·微孢子虫在生物防治上的应用第33-34页
   ·蛋白质组学的研究概况第34-38页
     ·蛋白质组学的发展第34-37页
     ·蛋白质组学在微孢子虫研究上的应用第37-38页
   ·研究背景,意义和技术路线第38-41页
     ·研究背景和意义第38-39页
     ·主要研究内容和目标第39-40页
     ·技术路线第40-41页
第2章 柞蚕微孢子虫的核糖体基因及进化分析第41-67页
   ·实验材料第41-43页
     ·实验材料第41页
     ·仪器与试剂第41-43页
   ·实验方法第43-50页
     ·柞蚕微孢子的纯化第43页
     ·柞蚕微孢子的诱导发芽第43-44页
     ·柞蚕微孢子虫的基因组DNA的提取第44页
     ·PCR扩增第44-45页
     ·胶回收第45页
     ·连接第45-46页
     ·PCR产物的克隆第46-47页
     ·克隆鉴定第47-49页
     ·测序第49页
     ·系统进化分析第49-50页
   ·结果与分析第50-63页
     ·PCR引物设计结果第50页
     ·柞蚕微孢子的纯度和诱导发芽情况第50-51页
     ·PCR扩增产物第51页
     ·测序结果第51-53页
     ·柞蚕微孢子虫核糖体基因的排列顺序第53页
     ·柞蚕微孢子虫SSUrRNA基因及进化分析第53-60页
     ·柞蚕微孢子虫5SrRNA基因第60-61页
     ·柞蚕微孢子虫ITS序列及进化分析第61-63页
   ·讨论第63-65页
   ·本章小结第65-67页
第3章 家蚕微孢子早和柞吞微孢子虫的蛋白质组学的研究第67-91页
   ·实验材料第67-69页
     ·材料来源第67页
     ·仪器与试剂第67-69页
   ·实验方法第69-76页
     ·柞蚕微孢子虫的纯化第69-70页
     ·蛋白的提取和SDS-PAGE电泳第70页
     ·二维电泳蛋白的提取第70页
     ·二维电泳蛋白样品的浓度测定第70-71页
     ·二维电泳的第一向等电聚焦第71-72页
     ·二维电泳的第二向SDS-PAGE电泳第72-73页
     ·银染第73-74页
     ·SDS-PAGE胶蛋白点的胶内酶切第74-75页
     ·二维电泳胶蛋白点的胶内酶切第75页
     ·质谱鉴定第75-76页
     ·软件分析第76页
   ·结果与分析第76-88页
     ·SDS-PAGE电泳图谱第76-77页
     ·二维电泳图谱第77-78页
     ·家蚕微孢子虫的蛋白质鉴定结果第78-82页
     ·家蚕微孢子虫的蛋白质的功能分析第82-85页
     ·柞蚕微孢子虫的蛋白质鉴定结果第85-87页
     ·柞蚕微孢子虫的蛋白质的功能分析第87-88页
   ·讨论第88-89页
   ·本章小结第89-91页
第4章 家蚕、柞蚕微孢子虫侵染家蚕中肠的比较蛋白质组学研究第91-119页
   ·实验材料第91-92页
     ·材料来源第91-92页
     ·仪器与试剂第92页
   ·实验方法第92-93页
     ·微孢子的纯化第92页
     ·取材第92页
     ·家蚕中肠蛋白的提取第92-93页
     ·二维电泳蛋白样品的浓度测定第93页
     ·二维电泳的第一向等电聚焦第93页
     ·二维电泳的第二向SDS-PAGE电泳第93页
     ·银染第93页
     ·二维电泳胶蛋白点的胶内酶切第93页
     ·质谱鉴定第93页
     ·软件分析第93页
   ·结果与分析第93-117页
     ·接种家蚕、柞蚕微孢子虫24h后家蚕中肠蛋白的二维电泳图第93-95页
     ·接种家蚕、柞蚕微孢子虫24h后家蚕中肠差异蛋白的质谱鉴定结果第95-99页
     ·接种家蚕微孢子虫和柞蚕微孢子虫24h后家蚕中肠差异蛋白及功能分析第99-103页
     ·接种家蚕微孢子虫和柞蚕微孢子虫48h后家蚕中肠蛋白的二维电泳图第103-105页
     ·接种家蚕微孢子虫和柞蚕微孢子虫48h后家蚕中肠差异蛋白的质谱鉴定结果第105-108页
     ·接种家蚕微孢子虫和柞蚕微孢子虫48h后家蚕中肠差异蛋白分析第108-109页
     ·接种家蚕微孢子虫和柞蚕微孢子虫72h后家蚕中肠蛋白的二维电泳图第109-111页
     ·接种家蚕微孢子虫和柞蚕微孢子虫72h后家蚕中肠差异蛋白的质谱鉴定结果第111-114页
     ·接种家蚕微孢子虫和柞蚕微孢子虫72h后家蚕中肠差异蛋白分析第114-115页
     ·接种微孢子虫后家蚕中肠差异蛋白总结第115-117页
   ·讨论第117-118页
   ·本章小结第118-119页
第5章 结论与展望第119-125页
   ·结论第119-123页
     ·首次克隆测序了柞蚕微孢子虫的核糖体基因第119页
     ·柞蚕微孢子虫的核糖体基因排列顺序第119-120页
     ·家蚕微孢子虫和柞蚕微孢子虫的分子进化关系第120页
     ·首次将SSUrRNA基因和ITS区域联合起来判断微孢子虫的分类第120页
     ·构建了适合微孢子虫蛋白的双向电泳体系第120-121页
     ·家蚕微孢子虫的蛋白质组成及功能分析第121页
     ·柞蚕微孢子虫的蛋白质组成及功能分析第121页
     ·构建了适合家蚕中肠蛋白的双向电泳体系,获得清晰、稳定的接种微孢子虫后不同时期家蚕中肠蛋白的二维电泳图谱第121-122页
     ·接种家蚕、柞蚕微孢子虫和清水(对照)在不同时期家蚕中肠的差异蛋白第122-123页
     ·与微孢子虫感染相关的蛋白标志物第123页
     ·家蚕对抗微孢子虫感染的免疫蛋白第123页
   ·展望第123-125页
     ·扩展微孢子虫研究的种类第124页
     ·mRNA水平上的研究第124页
     ·利用家蚕微孢子虫的基因组数据进行更全面的蛋白质组学的研究第124页
     ·微孢子虫和寄主相互关系的研究第124页
     ·充分利用微孢子虫的核糖体基因第124-125页
参考文献第125-139页
论文主要创新点第139-141页
致谢第141-142页
博士期间发表的学术论文第142-143页
提交GenBank的新基因第143-147页
参加的研究课题第147页

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