| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-30页 |
| ·纤维素酶基因研究进展 | 第12-22页 |
| ·纤维素酶的研究概况 | 第12页 |
| ·纤维素酶的组成 | 第12-13页 |
| ·纤维素酶的分子结构 | 第13-16页 |
| ·真菌纤维素酶 | 第16-17页 |
| ·细菌纤维素酶 | 第17-18页 |
| ·协同作用 | 第18-21页 |
| ·纤维素酶的基因克隆 | 第21-22页 |
| ·纤维素酶活力的测定 | 第22-26页 |
| ·纤维素酶的测定方法简述 | 第23-25页 |
| ·测定原酶液中单一纤维素酶组分活力的方法简介 | 第25-26页 |
| ·质谱技术 | 第26-28页 |
| ·电喷雾电离质谱(ESI-MS) | 第26-27页 |
| ·基质辅助激光解吸电离质谱(MALDI-MS) | 第27页 |
| ·快原子轰击质谱(FAB-MS) | 第27页 |
| ·质谱在生命科学中的应用 | 第27-28页 |
| ·本课题研究的意义和目的 | 第28-29页 |
| ·研究的主要内容 | 第29-30页 |
| 第二章 试剂和仪器 | 第30-35页 |
| ·试剂 | 第30-33页 |
| ·主要仪器设备 | 第33-35页 |
| 第三章 丁香假单孢菌类似纤维素酶基因的克隆、测序及序列分析 | 第35-46页 |
| ·试验材料与方法 | 第35-39页 |
| ·试验材料 | 第35-36页 |
| ·试验方法 | 第36-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-45页 |
| ·PCR结果 | 第39-40页 |
| ·酶切鉴定结果 | 第40-41页 |
| ·测序结果 | 第41-42页 |
| ·丁香假单孢杆菌Putative cellulase基因序列比较 | 第42-44页 |
| ·丁香假单孢杆菌Putative cellulase蛋白序列的结构分析 | 第44-45页 |
| ·本章小结 | 第45-46页 |
| 第四章 丁香假单孢菌类似纤维素酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第46-55页 |
| ·试验材料 | 第46-47页 |
| ·质粒和菌株 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-50页 |
| ·putative cellulase 基因在大肠杆菌中的表达 | 第47-48页 |
| ·表达产物的验证 | 第48-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-54页 |
| ·原核重组表达质粒的构建图谱 | 第50页 |
| ·重组表达载体的酶切鉴定 | 第50-51页 |
| ·Putative cellulase 基因的表达 | 第51-52页 |
| ·Western Blotting 检测 | 第52-53页 |
| ·MALDI-TOF-MS 验证结果 | 第53-54页 |
| ·本章小结 | 第54-55页 |
| 第五章 丁香假单孢菌类似纤维素酶基因克隆表达产物的纤维素酶活力的测定 | 第55-61页 |
| ·实验方法 | 第55-57页 |
| ·葡萄糖(G)标准曲线的制作 | 第55-56页 |
| ·原核表达菌体的培养和收集 | 第56页 |
| ·菌体的超声破碎 | 第56页 |
| ·纤维素酶活力的测定 | 第56-57页 |
| ·滤纸酶活力的测定 | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57-60页 |
| ·葡萄糖标准曲线 | 第57页 |
| ·反应温度对酶活测定的影响 | 第57-58页 |
| ·pH值对酶活测定的影响 | 第58-59页 |
| ·反应时间对酶活测定的影响 | 第59-60页 |
| ·滤纸酶活力测定结果 | 第60页 |
| ·本章小结 | 第60-61页 |
| 第六章 结论及工作展望 | 第61-62页 |
| ·主要结论 | 第61页 |
| ·工作展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 在学期间发表论文 | 第70页 |
