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转AhBADH、PsCAT基因烟草和杨树的获得及其抗性分析

中文摘要第1-14页
英文摘要第14-16页
1 前言第16-51页
   ·植物的抗旱性第16-18页
   ·植物的抗氧化性第18-21页
     ·植物中的活性氧产生及清除第18-19页
     ·活性氧的酶促脱毒系统第19-20页
     ·活性氧的非酶促清除及相关分子第20-21页
   ·植物的耐盐性第21-26页
     ·植物在组织器官水平上的耐盐机制第22-23页
     ·植物在分子细胞水平的耐盐机制第23-26页
   ·植物对高温的抗性第26-27页
     ·高温对植物光合作用的影响第26页
     ·高温对植物生物膜的影响第26-27页
   ·植物的抗冷性第27-30页
     ·生物膜第27-28页
     ·细胞骨架第28-29页
     ·植物抗冷的分子机制第29-30页
   ·甜菜碱研究进展第30-32页
     ·甜菜碱对植物的保护作用第30页
     ·甜菜碱在植物中的合成途经第30-32页
   ·过氧化氢酶研究进展第32-38页
     ·CAT 结构、功能、细胞定位以及分类第32页
     ·影响 CAT 活性因素第32-34页
     ·CAT 在抗氧化中的作用第34-35页
     ·Cat 的克隆与序列分析第35-36页
     ·Cat 的表达调控第36-37页
     ·CAT 基因工程研究第37-38页
   ·获得多价转基因植物的策略第38-42页
     ·多基因和多个表达载体构建策略第39-41页
     ·基因转化策略第41-42页
   ·MAR 序列在提高外源基因转化中的应用第42-44页
     ·基因沉默现象第42-43页
     ·使用MAR 序列提高外源基因转化第43-44页
   ·杨树的研究进展第44-50页
     ·常规育种第44-45页
     ·三倍体毛白杨第45页
     ·杨树的组织培养第45-50页
   ·本研究的目的及意义第50-51页
2 材料与方法第51-72页
   ·实验材料第51-55页
     ·植物材料第51页
     ·农杆菌菌株和质粒第51-52页
     ·试剂第52-54页
     ·酶及生化试剂第54-55页
     ·仪器第55页
     ·PCR 引物第55页
   ·研究方法第55-72页
     ·BT-18 号三倍体毛白杨组培再生系统的建立第55-56页
     ·植物表达载体的构建第56-58页
     ·根癌农杆菌 LBA4404 感受态细胞的制备及转化第58-59页
     ·利用农杆菌介导分别转化烟草和杨树第59-60页
     ·杨树叶片分化和生根培养基第60页
     ·烟草和杨树再生植株的 PCR 检测第60-63页
     ·凝胶电泳中 DNA 片段的回收第63页
     ·Northern 杂交第63-66页
     ·转基因植物的 Western blot 检测第66-68页
     ·转化植株移栽第68页
     ·转基因烟草CAT 活性检测第68-69页
     ·转基因植株在逆境处理下生理指标的测定第69-72页
3 结果与分析第72-97页
   ·植物表达载体的构建第72-74页
     ·目的片段的获得第72页
     ·双价基因载体的构建第72页
     ·双价基因的 PCR 鉴定及测序分析第72-74页
     ·植物表达载体质粒转化农杆菌第74页
   ·转基因植株的获得第74-76页
   ·转基因植株的PCR 检测第76页
   ·转基因植株的Northern blot 检测第76-77页
   ·转基因植株的Western blot 检测第77-78页
   ·目的蛋白的叶绿体定位第78-79页
   ·正常情况下各种转基因植株的CAT 活性第79-80页
   ·转基因植株的抗旱性分析第80-84页
     ·转基因植株在2096PEG_(6000) 处理条件下的生长情况第80-81页
     ·PEG_(6000) 处理对不同转基因植株CAT 活性的影响第81页
     ·PEG_(6000) 处理对不同转基因植株质膜透性的影响第81-82页
     ·PEG_(6000) 处理对不同转基因植株叶绿素含量的影响第82页
     ·PEG_(6000) 处理对不同转基因植株渗透势的影响第82-83页
     ·PEG_(6000) 处理对不同转基因植株叶绿素a 荧光动力学的影响第83-84页
     ·PEG_(6000) 处理对不同转基因植株光合速率的影响第84页
   ·转基因植株的抗氧化能力分析第84-87页
     ·转基因植株在150μM 百草枯处理条件下的生长情况第84-85页
     ·百草枯处理对不同转基因植株质膜透性的影响第85页
     ·百草枯处理对不同转基因植株叶绿素a 荧光动力学的影响第85-86页
     ·百草枯处理对离体转基因植株叶片的影响第86-87页
   ·转基因植株的抗盐性分析第87-90页
     ·转基因植株在200mM NaCl 处理条件下的生长情况第87页
     ·200mM NaCl 处理对不同转基因植株CAT 活性的影响第87-88页
     ·200mM NaCl 处理对不同转基因植株质膜透性的影响第88页
     ·200mM NaCl 处理对不同转基因植株叶绿素含量的影响第88-89页
     ·200mM NaCl 处理对不同转基因烟草渗透势的影响第89页
     ·200mM NaCl 处理对不同转基因植株叶绿素a 荧光动力学的影响第89-90页
     ·NaCl 处理对不同转基因植株光合速率的影响第90页
   ·转基因植株的抗高温分析第90-93页
     ·转基因植株在高温处理下的生长情况第90-91页
     ·高温胁迫对不同转基因植株叶片质膜透性的影响第91-92页
     ·高温胁迫对不同转基因植株叶片叶绿素含量的影响第92页
     ·高温胁迫对不同转基因植株叶绿素a 荧光动力学的影响第92-93页
     ·高温胁迫对不同转基因植株叶片光合速率的影响第93页
   ·转基因植株的抗冷性分析第93-97页
     ·转基因植株在低温处理后的生长情况第93-94页
     ·低温处理不同转基因植株叶片质膜透性的影响第94页
     ·低温处理不同转基因植株叶绿素含量的影响第94-95页
     ·低温处理对不同转基因植株叶绿素 a 荧光动力学的影响第95页
     ·低温处理不同转基因植株光合速率的影响第95-97页
4 讨论第97-101页
   ·多价基因转化的可能性第97-98页
   ·同时转化AhBADH 和PsCAT 的可行性第98-99页
   ·转基因植株的抗逆性分析第99-101页
5 结论第101-102页
参考文献第102-113页
致谢第113页

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