| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-16页 |
| 第一章 哺乳动物雄性生殖系干细胞发生与生物学特性 | 第16-24页 |
| ·雄性GSCS在睾丸中的位置 | 第16页 |
| ·雄性生殖细胞系细胞的特化以及干细胞分裂的启动 | 第16-17页 |
| ·生殖干细胞和体细胞的关系 | 第17-18页 |
| ·雄性生殖细胞的分化 | 第18页 |
| ·哺乳动物雄性生殖干细胞的生物学特征 | 第18-24页 |
| ·哺乳动物mGSCs 的生物学特性 | 第19-21页 |
| ·mGSCs 微环境 | 第21页 |
| ·mGSCs 不确定的细胞周期 | 第21页 |
| ·mGSCs 的迁移能力 | 第21-22页 |
| ·mGSCs 特异的分子标记 | 第22-24页 |
| 第二章 哺乳动物雄性生殖系干细胞的分离纯化及检测鉴定 | 第24-29页 |
| ·MGSCS 分离 | 第24页 |
| ·MGSCS 纯化 | 第24-27页 |
| ·非连续 Percoll 密度梯度离心法 | 第25页 |
| ·单位重力沉降法 | 第25页 |
| ·流式细胞分选术 | 第25-26页 |
| ·免疫磁珠分离技术 | 第26页 |
| ·盘化法 | 第26-27页 |
| ·贴壁速度差法 | 第27页 |
| ·MGSCS 的鉴定 | 第27-29页 |
| ·形态学法 | 第27页 |
| ·表面标志法或荧光染色法 | 第27页 |
| ·综合排除法 | 第27-28页 |
| ·mGSCs 移植功能性检测法 | 第28-29页 |
| 第三章 雄性生殖干细胞的体外培养与分化 | 第29-35页 |
| ·培养基及血清 | 第29-30页 |
| ·基础培养液的确定 | 第29页 |
| ·血清 | 第29-30页 |
| ·添加成分的作用 | 第30-31页 |
| ·添加剂 | 第30页 |
| ·激素及维生素 | 第30-31页 |
| ·生长因子 | 第31-33页 |
| ·SCF | 第31页 |
| ·LIF | 第31-32页 |
| ·神经营养因子(GDNF) | 第32页 |
| ·表皮生长因子(EGF) | 第32-33页 |
| ·支持细胞的作用 | 第33页 |
| ·饲养层细胞的利用 | 第33页 |
| ·培养温度的确定 | 第33-34页 |
| ·影响分化的若干因素 | 第34-35页 |
| ·促分化因素 | 第34页 |
| ·抑分化因素 | 第34-35页 |
| 第四章 哺乳动物细胞永生化的研究进展 | 第35-40页 |
| ·关于细胞的衰老、危机、永生化 | 第35-36页 |
| ·衰老(senescence) | 第35页 |
| ·危机(crisis) | 第35页 |
| ·永生化(immortalization) | 第35-36页 |
| ·促使细胞永生化的方法 | 第36-37页 |
| ·SV40 | 第36页 |
| ·放射性因素 | 第36页 |
| ·癌基因、原癌基因 | 第36-37页 |
| ·端粒酶(telomerase) | 第37页 |
| ·永生化的分子学机制 | 第37-40页 |
| ·P53 | 第37-38页 |
| ·PRb | 第38-40页 |
| 第五章 雄性生殖系干细胞移植的研究进展 | 第40-46页 |
| ·MGSCS 同种间移植 | 第40页 |
| ·MGSCS 异种间移植 | 第40-41页 |
| ·MGSCS 移植的方法 | 第41-43页 |
| ·受体动物的选择 | 第41-42页 |
| ·供体细胞的获得与体外操作 | 第42页 |
| ·移植方法 | 第42-43页 |
| ·精原干细胞移植的应用前景 | 第43-46页 |
| ·应用精原干细胞研究精子的发生及机制 | 第43页 |
| ·保存生育能力 | 第43-44页 |
| ·治疗雄性不育 | 第44页 |
| ·转基因动物 | 第44-46页 |
| 第六章 新生牛MGSCS 分离纯化 | 第46-60页 |
| ·材料方法 | 第46-51页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·方法 | 第47-50页 |
| ·雄性生殖系干细的胞确定 | 第50-51页 |
| ·统计学分析 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-57页 |
| ·不同方式处理新生牛睾丸曲细精管细胞分离效果 | 第51-52页 |
| ·新生牛雄性生殖系干细胞纯化 | 第52-55页 |
| ·睾丸切片染色 | 第55-56页 |
| ·牛生殖系干细胞的培养特性 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| ·牛年龄对mGSCs 分离的影响 | 第57页 |
| ·关于牛mGSCs 的分离 | 第57页 |
| ·mGSCs 的分离纯化效果 | 第57-58页 |
| ·mGSCs 的鉴定 | 第58页 |
| ·牛精原干细胞的培养特性 | 第58页 |
| ·小结 | 第58-60页 |
| 第七章 不同培养条件对新生牛生殖系干细胞增殖的影响 | 第60-77页 |
| ·方法与材料 | 第60-65页 |
| ·材料 | 第60-62页 |
| ·方法 | 第62-65页 |
| ·结果 | 第65-74页 |
| ·不同血清浓度对牛新生牛mGSCs 体外培养的影响 | 第65-68页 |
| ·支持细胞密度对新生牛mGSCs 增殖的影响 | 第68-71页 |
| ·精原细胞密度对精原干细胞增殖的影响 | 第71-73页 |
| ·不同细胞因子对新生牛mGSCs 体外增殖的影响 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-76页 |
| ·关于血清对mGSCS的作用 | 第74页 |
| ·关于支持细胞 | 第74-75页 |
| ·关于几种生长因子 | 第75页 |
| ·关于mGSCs 的鉴定 | 第75-76页 |
| ·结论 | 第76-77页 |
| 第八章 新生牛MGSCS 永生化的研究 | 第77-97页 |
| ·材料与方法 | 第77-86页 |
| ·材料 | 第77-78页 |
| ·方法 | 第78-86页 |
| ·结果 | 第86-91页 |
| ·PCR 扩增结果 | 第86页 |
| ·重组质粒酶切鉴定结果 | 第86-87页 |
| ·序列分析结果 | 第87页 |
| ·pETE、pEMY 真核表达载体的构建结果 | 第87页 |
| ·mGSCs 基因转染和细胞培养 | 第87-89页 |
| ·转染mGSCs 的免疫组织化学鉴定结果 | 第89页 |
| ·转染mGSCs 的外源基因 RT-PCR 鉴定结果 | 第89-90页 |
| ·转染mGSCs 的Western blot 分析结果 | 第90页 |
| ·端粒酶活性检测结果 | 第90-91页 |
| ·讨论 | 第91-96页 |
| ·关于c-Myc 基因 | 第91-92页 |
| ·关于p-EMY 与p-ETE 载体的构建 | 第92-93页 |
| ·端粒酶、SV40 大T 抗原与细胞永生化 | 第93-94页 |
| ·关于mGSCs 特异性标志物 | 第94-96页 |
| ·结论 | 第96-97页 |
| 第九章 支持细胞共培养诱导新生牛MGSCS 分化精子样细胞 | 第97-106页 |
| ·材料与方法 | 第97-99页 |
| ·材料 | 第97-98页 |
| ·方法 | 第98-99页 |
| ·结果 | 第99-103页 |
| ·不同诱导方法结果 | 第99-100页 |
| ·诱导精子样细胞培养特性 | 第100-101页 |
| ·流式细胞仪分拣精子样细胞 | 第101-102页 |
| ·牛卵母细胞体外显微授精试验 | 第102-103页 |
| ·RT-PCR 分析 | 第103页 |
| ·讨论 | 第103-105页 |
| ·mGSCs 体外诱导精子样细胞的实现 | 第103-104页 |
| ·mGSCs 体外诱导精子样细胞流式细胞仪DNA 含量检测 | 第104页 |
| ·mGSCs 体外诱导精子样细胞体外受精检测 | 第104-105页 |
| ·结论 | 第105-106页 |
| 结论 | 第106-107页 |
| 创新点 | 第107-108页 |
| 进一步研究课题 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-120页 |
| 附 录 | 第120-122页 |
| 缩略词表 | 第122-124页 |
| 致 谢 | 第124-125页 |
| 作者简介 | 第125-126页 |
