| 致谢 | 第1-5页 |
| 缩略语表 | 第5-7页 |
| 中文摘要 | 第7-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-40页 |
| 引言 | 第15-16页 |
| ·茶树离体植株再生研究进展 | 第16-20页 |
| ·微繁途径的植株再生 | 第16-17页 |
| ·器官发生途径的植株再生 | 第17-19页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第17-18页 |
| ·由愈伤组织诱导出芽 | 第18-19页 |
| ·体细胞胚发生途径的植株再生 | 第19-20页 |
| ·茶树遗传转化研究进展 | 第20-22页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第20-22页 |
| ·基因枪法 | 第22页 |
| ·咖啡因生物合成研究进展 | 第22-29页 |
| ·植物体内嘌呤生物碱的种类与分布 | 第22-23页 |
| ·植物体内咖啡因的生物合成途径 | 第23-25页 |
| ·咖啡因嘌呤环的起源 | 第23-24页 |
| ·咖啡因嘌呤环甲基化 | 第24-25页 |
| ·咖啡因合成途径相关酶基因的克隆 | 第25-27页 |
| ·SAM合成酶基因的克隆 | 第25页 |
| ·咖啡因合成酶基因的克隆 | 第25页 |
| ·可可碱合成酶基因的克隆 | 第25-26页 |
| ·甲基黄嘌呤核苷合成酶基因的克隆 | 第26-27页 |
| ·植物体内咖啡因代谢途径 | 第27页 |
| ·培育低咖啡因茶树品种的可能途径 | 第27-28页 |
| ·存在的问题与解决途径 | 第28-29页 |
| ·茶树遗传转化中存在的问题与对策 | 第28-29页 |
| ·茶树咖啡因生物合成途径研究中的问题 | 第29页 |
| ·利用RNAi培育低咖啡因茶树新策略 | 第29-33页 |
| ·RNAi的分子机理 | 第29-30页 |
| ·实现RNAi的途径 | 第30-32页 |
| ·基因枪法和农杆菌释放 | 第30-31页 |
| ·病毒释放 | 第31页 |
| ·转基因获得稳定的转化 | 第31-32页 |
| ·RNAi在作物品种改良中的应用 | 第32页 |
| ·RNAi的系统传递性(systemic spreading) | 第32-33页 |
| ·RNAi作用的系统传递性为培育低咖啡因茶树提供新途径 | 第33页 |
| ·UV-B对茶树基因表达影响的研究 | 第33-37页 |
| ·UV-B对植物次生代谢物的影响 | 第34页 |
| ·UV-B对茶叶儿茶素类代谢物的影响 | 第34-35页 |
| ·UV-B对查耳酮合成酶(CHS)基因表达的影响 | 第35页 |
| ·UV-B对茶叶香气相关基因表达的影响 | 第35-37页 |
| ·茶叶香气成分的组成 | 第35-36页 |
| ·茶叶香气形成的机理 | 第36-37页 |
| ·本研究的目的意义与主要研究内容 | 第37-40页 |
| ·目的意义 | 第37-38页 |
| ·主要研究的主要内容 | 第38-40页 |
| ·茶树高频发状根诱导体系的建立 | 第38页 |
| ·茶树发状根次生代谢产物研究 | 第38页 |
| ·茶树TCS基因RNAi表达载体构建 | 第38-39页 |
| ·UV-B对茶树香气成分与相关基因表达的影响 | 第39-40页 |
| 第二章 茶树发状根高频诱导体系的研究 | 第40-51页 |
| ·材料与方法 | 第41-44页 |
| ·试验材料及处理 | 第41-42页 |
| ·发根农杆菌菌株与质粒 | 第42页 |
| ·发状根诱导与培养 | 第42页 |
| ·基因组DNA提取与PCR检测 | 第42-43页 |
| ·发根农杆菌介导的Bt基因遗传转化 | 第43-44页 |
| ·GUS组织化学检测 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-51页 |
| ·茶树发状根的诱导 | 第44-46页 |
| ·发状根培养 | 第46-47页 |
| ·发状根的PCR验证 | 第47-48页 |
| ·GUS组织化学检测 | 第48-51页 |
| 第三章 茶树发状根化学成分研究 | 第51-57页 |
| ·材料与方法 | 第52-53页 |
| ·发状根与对照根的培养 | 第52页 |
| ·发状根与对照根中氨基酸含量测定 | 第52-53页 |
| ·发状根与对照根中儿茶素类含量分析 | 第53页 |
| ·结果分析 | 第53-57页 |
| ·茶树发状根生长适宜培养基的选择 | 第53-54页 |
| ·发状根和正常根中的主要氨基酸含量差异 | 第54-55页 |
| ·转化根和正常根中的儿茶素类含量差异 | 第55-57页 |
| 第四章 茶树咖啡因合成酶基因RNA干涉表达载体构建与遗传转化 | 第57-65页 |
| ·材料与方法 | 第58-60页 |
| ·质粒、菌种与试剂 | 第58页 |
| ·RT-PCR扩增TCS片段和PCR片段连入T-载体 | 第58-59页 |
| ·质粒提取、限制性内切酶酶切、连接与转化 | 第59页 |
| ·重组质粒的测序验证 | 第59页 |
| ·重组质粒和对照质粒pFGC5941导入发根农杆菌 | 第59页 |
| ·发根农杆菌介导茶树遗传转化 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-65页 |
| ·TCS基因片段的RT-PCR与T克隆 | 第60页 |
| ·茶树TCS基因RNAi干涉载体的构建 | 第60-62页 |
| ·干涉载体的测序验证与导入发根农杆菌 | 第62-63页 |
| ·发根农杆菌介导干涉载体导入茶树发状根 | 第63-65页 |
| 第五章 UV-B对茶树香气相关基因表达的影响 | 第65-71页 |
| ·材料和方法 | 第66-67页 |
| ·植物材料与UV-B处理条件 | 第66页 |
| ·挥发性成分的提取与GS-MS | 第66页 |
| ·半定量RT-PCR | 第66-67页 |
| ·PCR产物的克隆与序列分析验证 | 第67页 |
| ·结果分析 | 第67-71页 |
| ·紫外处理对茶树香气成分变化的影响 | 第67-68页 |
| ·引物筛选与cDNA序列验证 | 第68-69页 |
| ·UV-B对β-樱草糖苷酶和β-葡萄糖苷酶基因表达的影响 | 第69-71页 |
| 第六章 结论与研究展望 | 第71-74页 |
| ·结论 | 第71-72页 |
| ·发现共培养基是影响茶树发状根诱导的最主要因素 | 第71页 |
| ·发现LG_0培养基最适宜茶树发状根的生长与茶氨酸的积累 | 第71页 |
| ·提出一个利用RNAi系统传递性培育低咖啡因茶树的新途径 | 第71-72页 |
| ·构建了茶树TCS基因的RNAi表达载体 | 第72页 |
| ·发现UV-B处理能够提高β-樱草糖苷酶与β-葡萄糖苷酶基因的表达,促进茶叶香气成分的释放 | 第72页 |
| ·研究展望 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-87页 |
| Abstract | 第87-89页 |
