| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 缩略词一览表 | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第8-20页 |
| 一 植物缺铁胁迫机理 | 第8-9页 |
| 二 缺铁胁迫对高等植物叶绿体的影响 | 第9-10页 |
| 三 基因的细胞定位方法 | 第10-17页 |
| 1 利用生物信息学进行蛋白质的初步定位 | 第10-11页 |
| 2 利用报告基因进行细胞定位 | 第11-13页 |
| 3 利用表位附加标签进行细胞定位的研究 | 第13-14页 |
| 4 应用于细胞定位的转化受体材料的选择 | 第14-15页 |
| 5 免疫组织化学技术 | 第15-17页 |
| 四 本实验研究背景、技术路线 | 第17-20页 |
| 第二章 实验材料和试剂 | 第20-21页 |
| 第三章 实验方法与技术 | 第21-34页 |
| 一 植物表达载体(Fdr3／Fdr4)农杆菌转化 | 第21-22页 |
| 1 农杆菌EHA105感受态细胞的制备 | 第21页 |
| 2 冻融法转化农杆菌EHA105 | 第21页 |
| 3 阳性克隆的筛选 | 第21-22页 |
| 二 叶盘法转化烟草 | 第22-24页 |
| 1 农杆菌培养 | 第22-23页 |
| 2 侵染 | 第23页 |
| 3 共培养 | 第23页 |
| 4 选择培养 | 第23页 |
| 5 生根培养 | 第23页 |
| 6 移栽 | 第23-24页 |
| 三 T_0代转基因烟草的PCR-Southern鉴定 | 第24页 |
| 1 T_0代转基因烟草总DNA的提取 | 第24页 |
| 2 T_0代转基因烟草的PCR-Southern鉴定 | 第24页 |
| 四 T_0代转基因烟草的斑点杂交及Southern blotting鉴定 | 第24-27页 |
| 1 T_0代转基因烟草总DNA的大量提取 | 第24页 |
| 2 T_0代转基因烟草的斑点杂交 | 第24-27页 |
| 3 T_0代转基因烟草的Southern blotting | 第27页 |
| 五 T_0代转基因植株的RT-PCR检测 | 第27-29页 |
| 1 T_0代转基因烟草总RNA的提取 | 第27-28页 |
| 2 RT-PCR检测 | 第28-29页 |
| 六 T_0代转基因烟草叶片的亚显微结构的透射电镜观察 | 第29-30页 |
| 1 超薄切片的制备 | 第29-30页 |
| 2 超薄切片的染色 | 第30页 |
| 3 透射电镜观察 | 第30页 |
| 七 T_1代转基因烟草Fdr3种子的抗Kan阳性苗的筛选 | 第30-31页 |
| 八 T_1代转基因烟草Fdr3在不同铁营养条件下生长的形态学观察及相关生理指标的测定 | 第31-32页 |
| 1 不同铁营养条件下培养T_1代转基因烟草Fdr3并进行形态学观察 | 第31页 |
| 2 植物组织内叶绿素的定量测定 | 第31-32页 |
| 3 pH值测定 | 第32页 |
| 九 FDR3和FDR4的细胞定位 | 第32-34页 |
| 1 石蜡切片的制备 | 第32-33页 |
| 2 荧光免疫化学过程 | 第33页 |
| 3 激光共聚焦显微镜观察 | 第33-34页 |
| 第四章 结果分析和讨论 | 第34-62页 |
| 一 农杆菌Fdr3／Fdr4的转化及PCR鉴定 | 第34页 |
| 二 叶盘法转化烟草 | 第34-37页 |
| 1 诱导生芽 | 第34-36页 |
| 2 诱导生根 | 第36页 |
| 3 移栽 | 第36-37页 |
| 三 T_0代转基因烟草的分子生物学鉴定 | 第37-40页 |
| 1 T_0代转基因烟草的PCR-Southern鉴定 | 第37-38页 |
| 2 T_0代转基因烟草Fdr3的斑点杂交及Southern blotting鉴定 | 第38-39页 |
| 3 T_0代转基因烟草的RT-PCR鉴定 | 第39-40页 |
| 四 T_0代转基因烟草及野生型烟草叶片的亚显微结构的透射电镜观察 | 第40-41页 |
| 五 T_1代转基因烟草种子Fdr3的抗Kan阳性苗的筛选及PCR-Southern鉴定 | 第41-42页 |
| 六 T_1代转基因烟草Fdr3在不同铁营养条件下生长的形态学观察及相关生理指标的测定 | 第42-48页 |
| 1 T_1代转基因烟草Fdr3的不同铁营养培养及其形态学观察 | 第42-45页 |
| 2 植物组织内叶绿素的定量测定 | 第45-46页 |
| 3 pH值测定 | 第46-48页 |
| 七 FDR3和FDR4蛋白的细胞定位 | 第48-62页 |
| 第五章 小结与展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 附录 | 第70-77页 |
| 硕士期间发表及接收的论文 | 第77页 |
