第一章 绪论 | 第1-37页 |
1 VLP在基础研究中的应用 | 第16-19页 |
·VLP在病毒形态发生学方面的研究 | 第16-17页 |
·VLP在病毒组装和复制过程中的研究 | 第17页 |
·VLP在囊膜病毒出芽过程中的研究 | 第17-19页 |
2 病毒样颗粒在预防医学和疫苗开发中的应用 | 第19-29页 |
·VLP在HIV的研究与应用 | 第20-23页 |
·VLP在HPV的研究与应用 | 第23-25页 |
·VLP在HCV的研究与应用 | 第25-27页 |
·VLP在HEV的研究与应用 | 第27-28页 |
·在其他病毒性疫苗研制中的作用 | 第28-29页 |
3 耦联VLP疫苗 | 第29-31页 |
4 VLP在分子载体中的研究应用 | 第31-32页 |
5 VLP在免疫测定中的应用 | 第32-34页 |
·在抗原检测中的应用 | 第32页 |
·在抗体检测中的应用 | 第32-34页 |
6 存在的问题与展望 | 第34-35页 |
7 本研究的目的与意义 | 第35-37页 |
第二章 新城疫病毒样颗粒在哺乳动物细胞内的出芽 | 第37-63页 |
·材料与方法 | 第39-48页 |
·质粒与菌株 | 第39页 |
·酶与标记物 | 第39页 |
·细胞培养用试剂 | 第39页 |
·仪器设备 | 第39-40页 |
·引物 | 第40页 |
·DH5α感受态细胞的制备 | 第40页 |
·M、NP、F和HN基因的克隆 | 第40-41页 |
·重组表达载体的构建 | 第41-42页 |
·重组质粒的纯化 | 第42-43页 |
·间接免疫荧光试验 | 第43-44页 |
·重组质粒共转染HeLa细胞 | 第44页 |
·重组质粒共转染Vero细胞 | 第44页 |
·抗NDV M和NP蛋白阳性血清的制备 | 第44-46页 |
·Western blot检测M、NP蛋白的表达 | 第46页 |
·Western blot检测M、NP、F和HN蛋白的共表达 | 第46-47页 |
·透射电镜样品的制备 | 第47-48页 |
·结果 | 第48-58页 |
·重组质粒的构建 | 第48-49页 |
·间接免疫荧光试验 | 第49页 |
·pCAGG-M与pCAGG-NP、pCAGG-F、pCAGG-HN组合共转染HeLa细胞 | 第49-52页 |
·pCAGG-M与pCAGG-NP、pCAGG-F、pCAGG-HN组合共转染Vero细胞 | 第52-53页 |
·原核表达NDV的M蛋白和NP蛋白 | 第53-54页 |
·western blot检测M和NP蛋白在HeLa细胞上的表达 | 第54-55页 |
·western blot检测M、NP、F和HN蛋白在HeLa细胞上的共表达 | 第55-56页 |
·透射电镜结果 | 第56-58页 |
·讨论 | 第58-63页 |
第三章 新城疫病毒样颗粒在昆虫细胞内的出芽 | 第63-94页 |
·材料和方法 | 第64-72页 |
·质粒与菌株 | 第64页 |
·酶与标记物 | 第64页 |
·扩增引物 | 第64页 |
·突变引物 | 第64-65页 |
·F和NP基因的点突变过程 | 第65-66页 |
·M和HN基因的扩增 | 第66页 |
·M、NP、F和HN全长基因的亚克隆 | 第66页 |
·pAcAB4-F、pAcAB4-F-NP-M和pAcAB4-F-NP-M-HN杆状病毒转移载体的构建 | 第66-67页 |
·pAcAB4-NP、pAcAB4-NP-M和pAcAB4-NP-M-HN杆状病毒转移载体的构建 | 第67页 |
·pAcAB4-M和pAcAB4-HN杆状病毒转移载体的构建 | 第67-68页 |
·转染用质粒的纯化 | 第68页 |
·Sf9昆虫细胞的复苏 | 第68页 |
·转染昆虫细胞 | 第68-69页 |
·重组杆状病毒的PCR鉴定 | 第69页 |
·蚀斑纯化重组杆状病毒 | 第69页 |
·间接免疫荧光试验 | 第69-70页 |
·M,NP,F和HN蛋白的共表达 | 第70页 |
·M,NP,F和HN蛋白的单独表达 | 第70页 |
·细胞超薄切片样品制作和观察 | 第70-71页 |
·透射电镜观察VLP结构 | 第71-72页 |
·结果 | 第72-91页 |
·F和NP基因的点突变 | 第72-76页 |
·M和HN基因的克隆 | 第76页 |
·杆状病毒转移载体的构建过程 | 第76-80页 |
·蚀斑纯化重组杆状病毒的PCR鉴定 | 第80-81页 |
·间接免疫荧光试验结果 | 第81-82页 |
·M,NP,F和HN蛋白在昆虫细胞内的共表达 | 第82页 |
·M,NP,F和HN蛋白在昆虫细胞内的单独表达 | 第82-84页 |
·细胞超薄切片 | 第84-89页 |
·负染电镜结果 | 第89-91页 |
·讨论 | 第91-94页 |
第四章 结论 | 第94-95页 |
参考文献 | 第95-109页 |
附录 | 第109-115页 |
致谢 | 第115-116页 |
简历 | 第116页 |