| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-14页 |
| 第二章 大鼠IL-1β基因shRNA 重组腺病毒载体的构建与鉴定 | 第14-36页 |
| ·材料与方法 | 第14-28页 |
| ·实验材料 | 第14-17页 |
| ·实验方法 | 第17-28页 |
| ·IL-1β发卡siRNA 模板寡核苷酸的设计 | 第17-19页 |
| ·单链寡核苷酸片段的退火连接 | 第19-20页 |
| ·重组穿梭质粒pAdTrack-shRNA-IL-1β的构建 | 第20-26页 |
| ·重组腺病毒载体Ad-IL-1β-shRNA 的构建 | 第26-28页 |
| ·实验结果 | 第28-34页 |
| ·寡核苷酸片段的退火结果 | 第28页 |
| ·质粒pAdTrack 双酶切鉴定结果 | 第28-29页 |
| ·重组质粒pAdTrack-IL-1β-shRNA 的酶切鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组质粒pAdTrack-IL-1β-shRNA 的测序鉴定 | 第30-34页 |
| ·重组腺病毒载体Ad-IL-1β-shRNA 的酶切鉴定 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 重组腺病毒Ad-IL-1β-shRNA 的制备、鉴定 | 第36-48页 |
| ·材料与方法 | 第36-42页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-42页 |
| ·HEK293 细胞的培养 | 第37-38页 |
| ·Pac I 酶切重组腺病毒载体Ad-IL-1β-shRNA | 第38页 |
| ·重组腺病毒载体转染293 细胞 | 第38-39页 |
| ·重组腺病毒Ad-IL-1β-shRNA 的产生和扩增 | 第39-42页 |
| ·统计分析 | 第42页 |
| ·实验结果 | 第42-46页 |
| ·HEK293 细胞培养 | 第42页 |
| ·瞬时转染优化实验结果 | 第42-43页 |
| ·腺病毒的产生 | 第43-45页 |
| ·腺病毒滴度测定 | 第45页 |
| ·PCR 检测IL-1βmRNA 的表达 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 沉默大鼠IL-1β基因的实验研究 | 第48-54页 |
| ·材料与方法 | 第48-51页 |
| ·实验材料 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·注射方法 | 第49页 |
| ·体重测量与糖水实验 | 第49-50页 |
| ·总RNA 的提取 | 第50页 |
| ·反转录合成cDNA 模板 | 第50页 |
| ·PCR 反应体系的建立 | 第50-51页 |
| ·统计分析 | 第51页 |
| ·实验结果 | 第51-52页 |
| ·大鼠体重测量与糖水实验结果 | 第51-52页 |
| ·大鼠组织中mRNA 水平的变化 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 全文总结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 攻硕期间取得的研究成果 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
