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晚期糖基化终产物修饰蛋白质诱导人胚胎肝细胞产生C反应蛋白及其作用机制研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-17页
前言第17-19页
第一部分 人胚胎肝细胞的分离、纯化、鉴定和培养体系的建立第19-45页
 第一章 引言第19页
 第二章 材料和方法第19-27页
     ·主要试剂及仪器第19-20页
     ·主要试剂配制第20-25页
     ·人原代胚胎肝细胞的分离第25页
     ·人原代胚胎肝细胞的纯化第25-26页
     ·人原代胚胎肝细胞的培养第26页
     ·人原代胚胎肝细胞的鉴定第26-27页
 第三章 结果第27-37页
     ·人原代胚胎肝细胞的分离第27页
     ·人原代胚胎肝细胞的纯化第27-29页
     ·人原代胚胎肝细胞的培养第29-30页
     ·人原代胚胎肝细胞的鉴定第30-37页
 第四章 讨论第37-41页
 第五章 结论第41页
 第六章 参考文献第41-45页
第二部分 AGEs修饰蛋白对人胚胎肝细胞合成CRP的影响及作用机制第45-90页
 第一章 材料和方法第45-59页
     ·主要试剂及仪器第45-46页
       ·主要试剂配制第46-47页
     ·无内毒素AGEs修饰蛋白的制备和鉴定第47-48页
     ·人胚胎肝细胞的分离、纯化和培养第48页
     ·ELISA法检测不同处理因素的人胚胎肝细胞培养上清中CRP浓度第48-54页
       ·ELISA法检测AGEs-HSA作用的人胚胎肝细胞培养上清中CRP浓度第48-49页
       ·ELISA法检测单核细胞条件上清作用的人胚胎肝细胞上清中CRP浓度第49-51页
       ·细胞因子中和性抗体及其可溶性受体对单核细胞条件上清诱导人胚胎肝细胞产生CRP的影响第51-53页
       ·单核细胞条件上清与外源性细胞因子对人胚胎肝细胞CRP诱导作用的比较第53-54页
     ·实时荧光定量RT-PCR-SYBR~(?) Green Ⅰ嵌合荧光法检测单核细胞条件上清诱导的人胚胎肝细胞内CRP mRNA表达水平第54-58页
       ·人胚胎肝细胞的培养第54页
       ·人胚胎肝细胞的处理第54页
       ·人胚胎肝细胞总RNA的提取第54-55页
       ·应用实时荧光定量RT-PCR—SYBR~(?) Green Ⅰ嵌合荧光法检测单核细胞条件上清诱导的人胚胎肝细胞内CRP mRNA水平第55-58页
     ·统计学处理第58-59页
 第二章 结果第59-77页
     ·无内毒素AGEs修饰蛋白的鉴定第59页
     ·ELISA法检测AGEs-HSA对人胚胎肝细胞产生CRP的直接诱导作用第59-60页
     ·ELISA法检测单核细胞条件上清对人胚胎肝细胞CRP的诱导作用第60-68页
       ·单核细胞条件上清对人胚胎肝细胞CRP诱导作用的时间效应第60-62页
       ·单核细胞条件上清对人胚胎肝细胞CRP诱导作用的剂量效应第62-64页
       ·细胞因子中和性抗体及其可溶性受体对单核细胞条件上清诱导人胚胎肝细胞产生CRP的抑制作用第64-68页
     ·单核细胞条件上清与外源性细胞因子对人胚胎肝细胞CRP诱导作用的比较第68-73页
       ·ELISA法检测AGEs-HSA处理的单核细胞上清中IL-6、IL-1β和TNF-α的浓度第68-71页
       ·单核细胞条件上清与外源性细胞因子对人胚胎肝细胞CRP诱导作用的比较第71-73页
     ·单核细胞条件上清对人胚胎肝细胞CRP mRNA表达水平的影响第73-77页
       ·构建相对定量标准曲线第73-74页
       ·实验数据的标准化第74-75页
       ·单核细胞条件上清对人胚胎肝细胞CRP mRNA诱导作用第75-77页
 第三章 分析和讨论第77-82页
 第四章 结论第82-83页
 第五章 参考文献第83-90页
缩略词表第90-91页
致谢第91-92页
学位论文原创声明第92页
学位论文版权使用授权书第92页

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