| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-20页 |
| ·植物病原细菌黄单胞菌属(Xanthomonas)的概述 | 第10-14页 |
| ·野油菜黄单胞菌野油菜致病变种简介 | 第10-11页 |
| ·野油菜黄单胞菌重要的致病因子以及致病相关基因 | 第11-14页 |
| ·Dsb蛋白家族研究进展 | 第14-18页 |
| ·DsbA／DsbB的研究进展 | 第15-17页 |
| ·DsbC,DsbG,DsbD,DsbE蛋白的研究进展 | 第17-18页 |
| ·本研究工作的目的及意义 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-41页 |
| ·供试菌株和质粒 | 第20-21页 |
| ·常用抗生素 | 第21页 |
| ·细菌培养基 | 第21-23页 |
| ·常用溶液与缓冲液 | 第23-25页 |
| ·菌株培养条件及保存 | 第25页 |
| ·DNA的提取 | 第25-27页 |
| ·快速碱裂解法少量提取质粒DNA | 第25-26页 |
| ·质粒DNA的大量提取 | 第26-27页 |
| ·Xcc总DNA的提取 | 第27页 |
| ·快速微量提取法 | 第27页 |
| ·蛋白酶／SDS法制备总DNA | 第27页 |
| ·总RNA的提取 | 第27-28页 |
| ·DNA的纯化和DNA的沉淀 | 第28-29页 |
| ·DNA的酶切、电泳及DNA片段浓度、大小测算 | 第29-30页 |
| ·DNA酶切 | 第29页 |
| ·DNA电泳—琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
| ·DNA片段浓度、大小测算 | 第29-30页 |
| ·DNA片段的回收 | 第30-31页 |
| ·低熔点琼脂糖凝胶法 | 第30页 |
| ·透析法回收DNA片段 | 第30-31页 |
| ·载体脱磷酸化处理 | 第31页 |
| ·DNA连接 | 第31-32页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第32-34页 |
| ·快速制备E.coli的感受态细胞-CaCl_2法 | 第32-33页 |
| ·转化反应 | 第33页 |
| ·质粒DNA的电脉冲转化 | 第33-34页 |
| ·PCR扩增DNA片段 | 第34-35页 |
| ·PCR引物的设计 | 第34页 |
| ·PCR反应 | 第34-35页 |
| ·反转录PCR | 第35页 |
| ·三亲本接合 | 第35-36页 |
| ·表型检测 | 第36-37页 |
| ·胞外多糖的检测 | 第36页 |
| ·胞外酶的检测 | 第36-37页 |
| ·细菌游动性的检测 | 第37页 |
| ·DTT敏感性检测 | 第37页 |
| ·周质空间巯基含量测定 | 第37页 |
| ·植株试验接种方法 | 第37-38页 |
| ·剪叶法 | 第37-38页 |
| ·从叶片中回收被接种的细菌 | 第38页 |
| ·过敏性反应 | 第38页 |
| ·细菌培养基生长曲线的测定 | 第38-39页 |
| ·DNA和蛋白质序列分析 | 第39-40页 |
| ·非极性整合突变体构建原理 | 第40-41页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第41-62页 |
| ·dsbA的生物学分析 | 第41-45页 |
| ·dsbA在Xcc8004基因组上的位置 | 第41页 |
| ·DsbAl的与铜绿假单胞菌DsbA比对结果 | 第41-42页 |
| ·对dsbA1基因进行详细的生物信息学分析 | 第42-43页 |
| ·DsbA2与铜绿假单胞菌DsbA比对结果 | 第43页 |
| ·对dsbA2基因进行详细的生物信息学分析 | 第43-45页 |
| ·DsbA1与DsbA2蛋白同源性比较 | 第45页 |
| ·dsbA突变体构建与功能研究 | 第45-50页 |
| ·dsbA2突变体验证 | 第45-46页 |
| ·dsbA1整合突变体的构建 | 第46-47页 |
| ·dsbA1整合突变体的验证 | 第47页 |
| ·dsbA1,dsbA2基因相关功能的鉴定 | 第47-50页 |
| ·dsbB基因生物学分析 | 第50-52页 |
| ·DsbB的与铜绿假单胞菌DsbB比对结果 | 第50页 |
| ·对dsbB基因进行详细的生物信息学分析 | 第50-52页 |
| ·dsbB突变体的验证与功能研究 | 第52-60页 |
| ·dsbB突变体的功能互补 | 第52-53页 |
| ·胞外酶活性检测 | 第53-54页 |
| ·氯仿熏蒸处理后胞外酶检测 | 第54-55页 |
| ·胞外多糖检测 | 第55页 |
| ·游动性检测 | 第55页 |
| ·过敏反应试验 | 第55-56页 |
| ·对DTT敏感性检测 | 第56页 |
| ·周质空间巯基含量的测定 | 第56-57页 |
| ·致病力检测 | 第57-58页 |
| ·dsbB突变体的生长曲线测定 | 第58-60页 |
| ·Xcc8004与077F07总RNA的提取 | 第60-62页 |
| ·XC2081、XC3076、XC3823的转录分析 | 第61-62页 |
| 第四章 结果讨论分析 | 第62-65页 |
| ·dsbA突变体分析 | 第62页 |
| ·dsbB突变体分析 | 第62-64页 |
| ·dsbA／dsbB系统在Xcc8004中的影响 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
