| 中文摘要 | 第1-13页 |
| 英文摘要 | 第13-16页 |
| 缩略语的中英文对照 | 第16-17页 |
| 引言 | 第17-19页 |
| 第一篇 文献综述 | 第19-57页 |
| 第一章 体细胞核移植技术概述 | 第19-38页 |
| 1 体细胞核移植技术研究进展 | 第19-22页 |
| ·小鼠 | 第19-20页 |
| ·牛 | 第20页 |
| ·猪 | 第20-22页 |
| 2 体细胞核移植方法的研究 | 第22-23页 |
| ·Dolly法 | 第22页 |
| ·Honolulu法 | 第22-23页 |
| ·连续核移植法 | 第23页 |
| ·电融合法 | 第23页 |
| 3 体细胞核移植机理的研究 | 第23-32页 |
| ·体细胞克隆胚胎的后成修饰 | 第23-25页 |
| ·DNA甲基化和组蛋白修饰 | 第23-24页 |
| ·DNA甲基化和组蛋白修饰间的联系机制 | 第24-25页 |
| ·后成性遗传 | 第25-26页 |
| ·体细胞克隆的核重编程 | 第26-32页 |
| ·克隆胚胎的早期重编程 | 第26-28页 |
| ·克隆胚胎的后期重编程 | 第28-29页 |
| ·克隆胚胎的基因表达 | 第29-32页 |
| 参考文献 | 第32-38页 |
| 第二章 组蛋白乙酰化研究 | 第38-49页 |
| 1 组蛋白乙酰化 | 第38-42页 |
| ·组蛋白乙酰基转移酶(HATs)和组蛋白去乙酰化酶(HDACs) | 第38-41页 |
| ·组蛋白乙酰基转移酶(histone acetyltransferases, HATs)及其复合体 | 第38-40页 |
| ·组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases, HDACs)及其复合体 | 第40-41页 |
| ·组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor, HDACi) | 第41-42页 |
| ·HDACi的种类 | 第41页 |
| ·HDACi的体外活性 | 第41-42页 |
| ·HDACi/TSA作用的分子机制 | 第42页 |
| 2 组蛋白乙酰化的功能 | 第42-47页 |
| ·组蛋白乙酰化与染色质重构及基因调控 | 第42-45页 |
| ·组蛋白乙酰化与染色质重构 | 第43页 |
| ·组蛋白乙酰化与核小体周围环境改变 | 第43-44页 |
| ·组蛋白乙酰化与其他蛋白质活动 | 第44-45页 |
| ·组蛋白乙酰化在体细胞克隆中的研究 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 第三章 本实验所涉及的相关技术 | 第49-57页 |
| 1 荧光定量PCR技术 | 第49-54页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的原理 | 第49-51页 |
| ·Ct值和阈值 | 第49页 |
| ·Ct值与起始模板的关系 | 第49-51页 |
| ·荧光标记 | 第51页 |
| ·实时荧光定量PCR的参照物 | 第51-52页 |
| ·SYBR荧光染料进行实时荧光定量PCR的方法 | 第52-54页 |
| ·实验要素 | 第52页 |
| ·标准曲线 | 第52页 |
| ·绝对定量(absolute quantification)和相对定量(relative quantification) | 第52-53页 |
| ·溶解曲线的绘制 | 第53页 |
| ·数据的处理 | 第53-54页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的应用及前景 | 第54页 |
| 2 组蛋白乙酰化的研究方案 | 第54-56页 |
| ·组蛋白乙酰化对核移植重组胚早期发育的影响 | 第55页 |
| ·组蛋白乙酰化对核移植重组胚早期基因表达模式的调节作用 | 第55页 |
| ·实验方案 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-57页 |
| 第二篇 试验研究 | 第57-100页 |
| 第四章 小鼠乳腺癌细胞为供体的核移植胚胎的发育 | 第57-69页 |
| 1 材料与方法 | 第58-62页 |
| ·动物与试剂 | 第58页 |
| ·实验动物 | 第58页 |
| ·试剂 | 第58页 |
| ·仪器设备 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-62页 |
| ·溶液的配制 | 第58-59页 |
| ·操作针的制备 | 第59页 |
| ·核移植的过程 | 第59-62页 |
| ·数据处理 | 第62页 |
| 2 结果 | 第62-63页 |
| ·小鼠乳腺癌细胞的培养 | 第62-63页 |
| ·以乳腺癌细胞为供体的小鼠核移植重构胚的制备 | 第63页 |
| 3 讨论 | 第63-67页 |
| ·核移植胚胎的成活率 | 第63-65页 |
| ·核移植胚胎的发育 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-69页 |
| 第五章 发育相关基因在小鼠核移植胚基因组重编程中的表达研究 | 第69-84页 |
| 1 材料与方法 | 第70-73页 |
| ·动物与试剂 | 第70页 |
| ·实验动物 | 第70页 |
| ·试剂 | 第70页 |
| ·仪器设备 | 第70页 |
| ·实验方法 | 第70-73页 |
| ·溶液的配制 | 第70-71页 |
| ·操作针的制备 | 第71页 |
| ·核移植的过程 | 第71页 |
| ·体外受精和胚胎的培养 | 第71页 |
| ·Globin mRNA的制备 | 第71页 |
| ·mRNA分离提纯 | 第71-72页 |
| ·实时定量RT-PCR | 第72页 |
| ·标准曲线的制作 | 第72页 |
| ·基因定量 | 第72页 |
| ·TSA、α-amanitin和aphidicolin处理 | 第72页 |
| ·数据处理 | 第72-73页 |
| 2 结果 | 第73-78页 |
| ·IVF胚胎的发育 | 第73页 |
| ·小鼠乳腺癌细胞和IVF胚胎中的基因表达 | 第73-76页 |
| ·MuERV-L在植入前胚胎中的瞬时表达的细胞周期调控 | 第76-78页 |
| ·小鼠乳腺癌细胞核核移植胚基因组中的基因表达 | 第78页 |
| 3 讨论 | 第78-81页 |
| 参考文献 | 第81-84页 |
| 第六章 组蛋白乙酰化在小鼠核移植胚基因组重编程中的作用 | 第84-100页 |
| 1 材料与方法 | 第85-87页 |
| ·动物与试剂 | 第85-86页 |
| ·实验动物 | 第85页 |
| ·试剂 | 第85-86页 |
| ·仪器设备 | 第86页 |
| ·实验方法 | 第86-87页 |
| ·溶液的配制 | 第86页 |
| ·操作针的制备 | 第86页 |
| ·核移植的过程 | 第86页 |
| ·体外受精和胚胎的培养 | 第86页 |
| ·Globin mRNA的制备 | 第86页 |
| ·mRNA分离提纯 | 第86页 |
| ·实时定量RT-PCR | 第86页 |
| ·标准曲线的制作 | 第86页 |
| ·基因定量 | 第86页 |
| ·TSA和aphidicolin处理 | 第86-87页 |
| ·数据处理 | 第87页 |
| ·实验设计 | 第87页 |
| 2 结果 | 第87-92页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR | 第87-89页 |
| ·组蛋白乙酰化对小鼠IVF胚胎早期基因表达模式的影响 | 第89-90页 |
| ·抑制卵细胞质对供体核的去乙酰化作用对基因表达模式的影响 | 第90-92页 |
| ·激活过程中的组蛋白乙酰化对基因表达模式的影响 | 第92页 |
| ·组蛋白乙酰化对IVF和核移植胚胎发育的影响 | 第92页 |
| 3 讨论 | 第92-97页 |
| 参考文献 | 第97-100页 |
| 全文结论 | 第100-102页 |
| 创新 | 第102-103页 |
| 附录 | 第103-109页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
