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应用RNAi研究大豆β-伴大豆球蛋白基因的表达与调控

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-13页
缩略词表及其英汉对照第13-14页
第一部分 文献综述第14-48页
 第一章 大豆种子贮藏蛋白的研究进展第14-25页
  1 大豆种子贮藏蛋白组成第14-16页
   ·11S大豆球蛋白第14-15页
   ·7S β-伴大豆球蛋白第15页
   ·2S大豆球蛋白第15-16页
  2 大豆种子贮藏蛋白的合成和积累第16-17页
   ·大豆种子贮藏蛋白的合成及运输第16-17页
   ·大豆种子贮藏蛋白的积累第17页
  3 大豆种子贮藏蛋白基因结构与表达调控第17-25页
   ·大豆贮藏蛋白基因结构第17-20页
   ·大豆种子贮藏蛋白基因的表达调控第20-23页
   ·大豆种子贮藏蛋白基因工程研究第23-25页
 第二章 RNA干涉的研究进展第25-32页
  1 RNA干涉的历史和研究进展第25页
  2 RNAi的特征第25-26页
  3 RNAi的作用机制第26-28页
  4 RNAi的生物学意义第28-29页
  5 RNAi技术在植物生物学中的应用第29-31页
   ·植物功能基因组的研究第29页
   ·作物的品种改良第29-30页
   ·其它的应用第30-31页
  6 RNAi技术存在问题及展望第31-32页
 第三章 大豆遗传转化的研究进展第32-39页
  1 大豆遗传转化中常用的转基因方法第32-36页
   ·农杆菌介导法第32-34页
   ·基因枪(微粒轰击)法第34-35页
   ·农杆菌介导法和基因枪法的优点及缺点第35-36页
  2 报告基因的研究进展第36-37页
   ·nos和ocs报告基因第36页
   ·β-葡萄糖苷酸酶报告基因第36页
   ·荧光素酶报告基因第36-37页
   ·绿色荧光蛋白报告基因第37页
  3 大豆遗传转化的主要障碍及可能的解决途径第37-39页
 第四章 高等植物启动子研究进展第39-47页
  1 启动子的概念、结构及分类第39-43页
   ·启动子的概念第39页
   ·高等植物启动子的结构第39-41页
   ·启动子分类及特点第41-43页
  2 启动子克隆的意义及其克隆方法第43-45页
   ·启动子克隆的意义第43页
   ·启动子克隆的方法第43-45页
  3 种子特异性启动子的研究第45-46页
  4 展望第46-47页
 本研究目的和意义第47-48页
第二部分 研究内容第48-103页
 第五章 大豆β-伴大豆球蛋白α-亚基基因RNAi载体的构建第48-61页
  1 材料与方法第49-51页
   ·材料第49页
   ·方法第49-51页
  2 结果与分析第51-59页
   ·大豆β-伴大豆球蛋白α亚基基因的克隆第51-52页
   ·大豆β-伴大豆球蛋白α亚基基因序列比对分析第52页
   ·α亚基基因表达载体的构建第52-54页
   ·α亚基基因RNAi表达载体的构建第54-58页
   ·表达载体导入根癌农杆菌第58-59页
  3 讨论第59-61页
 第六章 农杆菌介导大豆子叶节遗传转化第61-77页
  1 材料与方法第61-65页
   ·材料第61页
   ·方法第61-65页
  2 结果与分析第65-73页
   ·不同大豆品种对卡那霉素的敏感性第65-66页
   ·质粒pYXP7S α G的大豆遗传转化第66-67页
   ·质粒pYXP7S α Ri的大豆遗传转化第67-69页
   ·转基因植株PCR鉴定第69页
   ·转基因植株Southern blot鉴定第69-71页
   ·转基因植株表型观察第71页
   ·RT-PCR半定量分析第71页
   ·Northern blot鉴定第71-73页
  3 讨论第73-77页
   ·大豆遗传转化分析第73-75页
   ·转基因植株的检测第75页
   ·RNAi抑制效率的分析第75-77页
 第七章 RNAi抑制大豆β-伴大豆球蛋白α-亚基的差异蛋白质组分析第77-90页
  1 材料与方法第78-81页
   ·材料第78页
   ·方法第78-81页
  2 结果与分析第81-86页
   ·转基因大豆成熟种子的差异蛋白质组分析第81-84页
   ·转基因大豆种子总氨基酸含量分析第84-86页
  3 讨论第86-90页
   ·转基因大豆种子贮藏蛋白的变化第87页
   ·参与11S与7S调控的相关蛋白的功能推测第87-89页
   ·转基因大豆种子的氨基酸含量分析第89-90页
 第八章 大豆β-伴大豆球蛋白基因启动子的克隆及功能分析第90-103页
  1 材料与方法第90-94页
   ·材料第90-91页
   ·方法第91-94页
  2 结果与分析第94-101页
   ·栽培大豆与野生大豆α亚基基因启动子片段的克隆第94页
   ·α亚基基因启动子片段序列分析第94-97页
   ·表达载体的构建第97-99页
   ·农杆菌转化与转基因拟南芥的获得第99-100页
   ·转基因拟南芥的Southern blot分析第100页
   ·种子特异性表达的鉴定第100-101页
  3 讨论第101-103页
全文结论第103-104页
本研究创新之处第104-105页
参考文献第105-117页
附录第117-123页
攻读博士学位期间发表的论文第123-124页
致谢第124页

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