中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
缩略词表及其英汉对照 | 第13-14页 |
第一部分 文献综述 | 第14-48页 |
第一章 大豆种子贮藏蛋白的研究进展 | 第14-25页 |
1 大豆种子贮藏蛋白组成 | 第14-16页 |
·11S大豆球蛋白 | 第14-15页 |
·7S β-伴大豆球蛋白 | 第15页 |
·2S大豆球蛋白 | 第15-16页 |
2 大豆种子贮藏蛋白的合成和积累 | 第16-17页 |
·大豆种子贮藏蛋白的合成及运输 | 第16-17页 |
·大豆种子贮藏蛋白的积累 | 第17页 |
3 大豆种子贮藏蛋白基因结构与表达调控 | 第17-25页 |
·大豆贮藏蛋白基因结构 | 第17-20页 |
·大豆种子贮藏蛋白基因的表达调控 | 第20-23页 |
·大豆种子贮藏蛋白基因工程研究 | 第23-25页 |
第二章 RNA干涉的研究进展 | 第25-32页 |
1 RNA干涉的历史和研究进展 | 第25页 |
2 RNAi的特征 | 第25-26页 |
3 RNAi的作用机制 | 第26-28页 |
4 RNAi的生物学意义 | 第28-29页 |
5 RNAi技术在植物生物学中的应用 | 第29-31页 |
·植物功能基因组的研究 | 第29页 |
·作物的品种改良 | 第29-30页 |
·其它的应用 | 第30-31页 |
6 RNAi技术存在问题及展望 | 第31-32页 |
第三章 大豆遗传转化的研究进展 | 第32-39页 |
1 大豆遗传转化中常用的转基因方法 | 第32-36页 |
·农杆菌介导法 | 第32-34页 |
·基因枪(微粒轰击)法 | 第34-35页 |
·农杆菌介导法和基因枪法的优点及缺点 | 第35-36页 |
2 报告基因的研究进展 | 第36-37页 |
·nos和ocs报告基因 | 第36页 |
·β-葡萄糖苷酸酶报告基因 | 第36页 |
·荧光素酶报告基因 | 第36-37页 |
·绿色荧光蛋白报告基因 | 第37页 |
3 大豆遗传转化的主要障碍及可能的解决途径 | 第37-39页 |
第四章 高等植物启动子研究进展 | 第39-47页 |
1 启动子的概念、结构及分类 | 第39-43页 |
·启动子的概念 | 第39页 |
·高等植物启动子的结构 | 第39-41页 |
·启动子分类及特点 | 第41-43页 |
2 启动子克隆的意义及其克隆方法 | 第43-45页 |
·启动子克隆的意义 | 第43页 |
·启动子克隆的方法 | 第43-45页 |
3 种子特异性启动子的研究 | 第45-46页 |
4 展望 | 第46-47页 |
本研究目的和意义 | 第47-48页 |
第二部分 研究内容 | 第48-103页 |
第五章 大豆β-伴大豆球蛋白α-亚基基因RNAi载体的构建 | 第48-61页 |
1 材料与方法 | 第49-51页 |
·材料 | 第49页 |
·方法 | 第49-51页 |
2 结果与分析 | 第51-59页 |
·大豆β-伴大豆球蛋白α亚基基因的克隆 | 第51-52页 |
·大豆β-伴大豆球蛋白α亚基基因序列比对分析 | 第52页 |
·α亚基基因表达载体的构建 | 第52-54页 |
·α亚基基因RNAi表达载体的构建 | 第54-58页 |
·表达载体导入根癌农杆菌 | 第58-59页 |
3 讨论 | 第59-61页 |
第六章 农杆菌介导大豆子叶节遗传转化 | 第61-77页 |
1 材料与方法 | 第61-65页 |
·材料 | 第61页 |
·方法 | 第61-65页 |
2 结果与分析 | 第65-73页 |
·不同大豆品种对卡那霉素的敏感性 | 第65-66页 |
·质粒pYXP7S α G的大豆遗传转化 | 第66-67页 |
·质粒pYXP7S α Ri的大豆遗传转化 | 第67-69页 |
·转基因植株PCR鉴定 | 第69页 |
·转基因植株Southern blot鉴定 | 第69-71页 |
·转基因植株表型观察 | 第71页 |
·RT-PCR半定量分析 | 第71页 |
·Northern blot鉴定 | 第71-73页 |
3 讨论 | 第73-77页 |
·大豆遗传转化分析 | 第73-75页 |
·转基因植株的检测 | 第75页 |
·RNAi抑制效率的分析 | 第75-77页 |
第七章 RNAi抑制大豆β-伴大豆球蛋白α-亚基的差异蛋白质组分析 | 第77-90页 |
1 材料与方法 | 第78-81页 |
·材料 | 第78页 |
·方法 | 第78-81页 |
2 结果与分析 | 第81-86页 |
·转基因大豆成熟种子的差异蛋白质组分析 | 第81-84页 |
·转基因大豆种子总氨基酸含量分析 | 第84-86页 |
3 讨论 | 第86-90页 |
·转基因大豆种子贮藏蛋白的变化 | 第87页 |
·参与11S与7S调控的相关蛋白的功能推测 | 第87-89页 |
·转基因大豆种子的氨基酸含量分析 | 第89-90页 |
第八章 大豆β-伴大豆球蛋白基因启动子的克隆及功能分析 | 第90-103页 |
1 材料与方法 | 第90-94页 |
·材料 | 第90-91页 |
·方法 | 第91-94页 |
2 结果与分析 | 第94-101页 |
·栽培大豆与野生大豆α亚基基因启动子片段的克隆 | 第94页 |
·α亚基基因启动子片段序列分析 | 第94-97页 |
·表达载体的构建 | 第97-99页 |
·农杆菌转化与转基因拟南芥的获得 | 第99-100页 |
·转基因拟南芥的Southern blot分析 | 第100页 |
·种子特异性表达的鉴定 | 第100-101页 |
3 讨论 | 第101-103页 |
全文结论 | 第103-104页 |
本研究创新之处 | 第104-105页 |
参考文献 | 第105-117页 |
附录 | 第117-123页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第123-124页 |
致谢 | 第124页 |