初步分离和鉴定四种肿瘤细胞系的肿瘤干细胞
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 插图和附表清单 | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-26页 |
| ·肿瘤疾病的现状 | 第12页 |
| ·肿瘤特征及发病原因 | 第12-13页 |
| ·肿瘤干细胞的发现 | 第13-14页 |
| ·干细胞与肿瘤干细胞 | 第14页 |
| ·肿瘤干细胞的来源 | 第14-16页 |
| ·正常干细胞的突变 | 第15页 |
| ·祖细胞的突变 | 第15页 |
| ·体细胞的突变 | 第15页 |
| ·细胞融合 | 第15-16页 |
| ·端粒酶阴性细胞系中是否存在肿瘤干细胞 | 第16-19页 |
| ·端粒与端粒酶 | 第16页 |
| ·端粒延长的替代机制 | 第16-17页 |
| ·端粒酶检测技术 | 第17-19页 |
| ·肿瘤干细胞的分离方法 | 第19-20页 |
| ·肿瘤干细胞特性的研究 | 第20-21页 |
| ·CD133的研究 | 第20-21页 |
| ·CD44的研究 | 第21页 |
| ·肿瘤干细胞的分子调控机制 | 第21-24页 |
| ·IL-4通路 | 第21-22页 |
| ·Wnt通路 | 第22页 |
| ·Notch通路 | 第22页 |
| ·miRNA的研究 | 第22-24页 |
| ·利用肿瘤干细胞理论治疗癌症的思路 | 第24页 |
| ·肿瘤干细胞的研究意义 | 第24-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-47页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·研究对象 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·实验流程图 | 第27-28页 |
| ·细胞培养方法 | 第28-35页 |
| ·培养基及相关试剂的配制方法 | 第28-31页 |
| ·贴壁培养 | 第31页 |
| ·低粘附培养方法 | 第31页 |
| ·软琼脂培养方法及克隆率 | 第31-32页 |
| ·单克隆培养方法 | 第32页 |
| ·细胞的复苏,传代,冻存和运输 | 第32-34页 |
| ·细胞的计数与细胞活力的测定 | 第34-35页 |
| ·分子检测实验 | 第35-37页 |
| ·RNA酶污染的预防 | 第35-36页 |
| ·蛋白的提取及PCR | 第36-37页 |
| ·肿瘤干细胞的分选方法 | 第37-39页 |
| ·侧群分选 | 第37-38页 |
| ·免疫荧光染色 | 第38-39页 |
| ·移植瘤及其继代方法 | 第39-40页 |
| ·移植瘤实验 | 第39页 |
| ·细胞继代培养方法 | 第39-40页 |
| ·H&E染色 | 第40-41页 |
| ·成纤维细胞的去除 | 第41-47页 |
| ·酶消化法 | 第41-42页 |
| ·机械刮除法 | 第42-43页 |
| ·反复贴壁法 | 第43页 |
| ·克隆法 | 第43-47页 |
| 第三章 实验结果 | 第47-70页 |
| ·端粒酶活性检测 | 第47页 |
| ·细胞培养特性 | 第47-58页 |
| ·细胞培养特性 | 第47-49页 |
| ·低粘附细胞培养 | 第49-54页 |
| ·单克隆细胞培养 | 第54页 |
| ·软琼脂细胞培养 | 第54-58页 |
| ·表面抗原CD133分析 | 第58-59页 |
| ·SP分选 | 第59-61页 |
| ·细胞移植成瘤性分析 | 第61-69页 |
| ·移植瘤的组织病理学分析 | 第69-70页 |
| 第四章 讨论 | 第70-74页 |
| ·SP方法的优化 | 第70页 |
| ·端粒酶阴性细胞系中侧群细胞含量及其原因分析 | 第70-71页 |
| ·XWLC-05的侧群细胞性状分析 | 第71-72页 |
| ·肿瘤细胞的耐受性 | 第72页 |
| ·单克隆细胞株间侧群细胞含量差异的分析 | 第72页 |
| ·去除杂质细胞方法的分析 | 第72-73页 |
| ·侧群细胞的治疗策略 | 第73-74页 |
| 第五章 总结和展望 | 第74-75页 |
| ·总结 | 第74页 |
| ·展望 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第82页 |
