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具有天然生物活性的重组人HFRS抗体在转基因小鼠乳腺中的表达

缩略表第1-11页
技术路线图第11-12页
第一章 文献综述第12-40页
 引言第12-13页
   ·汉坦病毒及其相关疾病研究进展第13-24页
     ·汉坦病毒(HV)的基因组及编码产物第13-14页
     ·汉坦病毒感染后诱导的免疫应答第14页
     ·汉坦病毒(HV)的分型第14-15页
     ·汉坦病毒(HV)的传播途径第15-16页
     ·汉坦病毒(HV)在全球的流行近况第16-19页
     ·HFRS和HPS临床表现第19-21页
     ·我国对HFRS防治策略第21-23页
     ·对HFRS的常规治疗原则和经验第23页
     ·汉坦病毒单克隆抗体的研制和应用第23-24页
   ·转基因动物研究进展第24-36页
     ·转基因动物的制作方法第25-29页
     ·转基因动物作为生物反应器独具优势第29-33页
     ·转基因动物研究的应用第33-36页
   ·转基因动物生产抗体第36-40页
第二章 材料与方法第40-67页
 引言第40页
   ·实验材料第40-44页
   ·实验方法第44-67页
第三章 实验结果第67-82页
 引言第67页
   ·表达载体的构建第67-70页
     ·HFRS糖蛋白G2抗体基因轻链和重链乳腺表达载体构建策略第67-69页
     ·表达载体的获得及鉴定第69-70页
     ·轻链表达载体加新霉素标记基因第70页
   ·转基因小鼠模型建立及相关检测第70-76页
     ·双基因共显微注射法生产转基因小鼠第70-71页
     ·转基因小鼠PCR检测第71-72页
     ·转基因小鼠传代第72-73页
     ·转基因小鼠的Southern blotting检测第73-74页
     ·SDS-PAGE凝胶电泳检测转基因小鼠的乳中rHMAbs的表达第74页
     ·Western blot检测转基因小鼠的乳中rHMAbs的表达第74-75页
     ·ELISA确定rHMAbs的表达量第75-76页
   ·人重组抗体(rHMAbs)的活性检测第76-78页
     ·免疫荧光(IFA)法验证rHMAbs的结合特异性第76-77页
     ·微量荧光减少法体外中和实验检测rHMAbs中和病毒的能力第77-78页
   ·人重组抗体(rHMAbs)通过哺乳对后代小鼠保护的研究第78-82页
     ·检测rHMAbs在转基因小鼠后代乳鼠血清中的存在第78-79页
     ·分析rHMAbs在转基因小鼠后代乳鼠血清中的分子量变化第79-80页
     ·分析rHMAbs在转基因小鼠后代乳鼠血清中的活性第80-82页
第四章 分析与讨论第82-88页
 引言第82页
   ·关于表达载体第82-83页
     ·转基因表达载体的调控元件分析第82-83页
     ·转基因表达载体的构建过程中的经验总结第83页
   ·关于转基因小鼠第83-86页
     ·双基因共注射获得转基因小鼠第83-84页
     ·外源基因在转基因小鼠基因组中的整合效率第84页
     ·转基因小鼠传代第84-85页
     ·rHMAbs在转基因小鼠乳中表达第85-86页
   ·转基因鼠乳中人重组抗体(rHMAbs)的活性第86-87页
     ·rHMAbs的结合特异性第86页
     ·rHMAbs的中和活性第86-87页
     ·rHMAbs对后代乳鼠的保护第87页
   ·重组抗体分子量变化的分析第87-88页
第五章 结论第88-90页
参考文献第90-99页
致谢第99-100页
附录:载体构建过程中的重要测序结果第100-105页
个人简历第105页

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