| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-27页 |
| 1 拟南芥开花的分子机理 | 第12-16页 |
| ·受光周期影响的途径 | 第12-13页 |
| ·春化途径 | 第13-14页 |
| ·GA途径 | 第14页 |
| ·自主调控开花途径 | 第14-16页 |
| 2 水稻抽穗期基因研究现状 | 第16-20页 |
| ·水稻抽穗期的光温生态特性 | 第16-17页 |
| ·感光性 | 第16页 |
| ·感温性 | 第16页 |
| ·基本营养生长性 | 第16-17页 |
| ·抽穗期的遗传控制 | 第17页 |
| ·水稻抽穗期相关基因的克隆和功能研究 | 第17-20页 |
| ·Hd1 | 第18页 |
| ·Hd6 | 第18页 |
| ·Hd3a | 第18-19页 |
| ·Ehd1 | 第19页 |
| ·Ghd7 | 第19页 |
| ·Se5 | 第19-20页 |
| 3 RNAI技术的原理及应用 | 第20-26页 |
| ·RNAi的分子作用机理 | 第21-23页 |
| ·RNAi技术的应用 | 第23-26页 |
| ·高通量地研究基因功能 | 第23页 |
| ·基因治疗 | 第23-24页 |
| ·基因表达调控 | 第24页 |
| ·作物遗传改良 | 第24-26页 |
| ·RNAi技术在作物品质改良方面的应用 | 第24-25页 |
| ·RNAi技术在作物抗病虫方面的应用 | 第25-26页 |
| 4 本论文研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-42页 |
| 1 试验材料 | 第27-29页 |
| ·供试水稻品种 | 第27页 |
| ·菌株和载体 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| ·培养基成分 | 第28-29页 |
| ·细菌培养基的配制 | 第28页 |
| ·适用于水稻的培养基 | 第28-29页 |
| 2 试验方法 | 第29-42页 |
| ·水稻OsELF3基因RNAi表达载体的构建及检测 | 第29-37页 |
| ·水稻材料RNA的提取 | 第29-30页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第30-31页 |
| ·OsELF3基因干涉片段扩增 | 第31-32页 |
| ·PCR产物的纯化和回收 | 第32页 |
| ·水稻OsELF3基因干涉片段与克隆载体的连接 | 第32页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第33页 |
| ·阳性克隆的筛选和鉴定 | 第33-34页 |
| ·质粒的提取 | 第34页 |
| ·DNA测序及核苷酸序列分析 | 第34页 |
| ·OsELF3基因干涉中间载体构建 | 第34-37页 |
| ·干涉载体pOsAct2-OsELF3-RNAi的构建及检测 | 第37页 |
| ·农杆菌介导水稻OsELF3基因RNAi表达载体的转化 | 第37-42页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第37-38页 |
| ·重组质粒对农杆菌的转化 | 第38页 |
| ·工程农杆菌的鉴定 | 第38页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第38-39页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第38页 |
| ·农杆菌菌株的活化 | 第38-39页 |
| ·共培养转化 | 第39页 |
| ·抗性愈伤组织筛选 | 第39页 |
| ·分化与生根 | 第39页 |
| ·转基因植株的分子生物学检测 | 第39-41页 |
| ·植物基因组DNA的提取 | 第39-40页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第40-41页 |
| ·转化植株叶片的潮霉素抗性鉴定 | 第41页 |
| ·抽穗期调查 | 第41-42页 |
| 第三章 结果与分析 | 第42-50页 |
| 1 水稻OsELF3基因RNAI载体的构建 | 第42-44页 |
| ·RNA提取和检测 | 第42页 |
| ·OsELF3基因干涉片段扩增 | 第42-43页 |
| ·Sence、Anti-Sence片段与pSK载体连接重组子的鉴定 | 第43页 |
| ·Sence、Anti-Sence片段插入pOsAct2-1-nos载体后BamHI和SalI双酶切鉴定 | 第43-44页 |
| 2 农杆菌介导水稻OsELF3基因表达载体的转化 | 第44-47页 |
| ·转化农杆菌的鉴定 | 第44-45页 |
| ·转OsELF3基因RNAi表达载体水稻植株的获得 | 第45-46页 |
| ·T_0代转基因植株的PCR检测 | 第46页 |
| ·T_0代转化植株叶片的潮霉素抗性鉴定 | 第46-47页 |
| 3 转基因植株后代T1的表型分析 | 第47-50页 |
| ·T_1代转基因植株的PCR检测 | 第47-48页 |
| ·T_1代转基因植株抽穗期调查 | 第48-50页 |
| 第四章 讨论 | 第50-53页 |
| 1 OsELF3基因RNAI表达载体的构建 | 第50页 |
| 2 拟南芥生物节律钟基因ELF3与水稻基因OsELF3 | 第50-51页 |
| 3 农杆菌介导水稻愈伤组织转化体系的优化 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 附录1:一般培养基配方 | 第60-61页 |
| 附录2:AAM培养基配方 | 第61页 |
