中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
缩略词表 | 第9-14页 |
第一章 综述 | 第14-31页 |
·佛手概况 | 第14-17页 |
·佛手的品种及其特征 | 第14页 |
·资源分布 | 第14-15页 |
·真伪鉴别 | 第15页 |
·观赏价值 | 第15-16页 |
·药用价值 | 第16页 |
·化学成分 | 第16-17页 |
·植物遗传转化概述 | 第17-18页 |
·果树遗传转化 | 第18-20页 |
·主要基因转化方法 | 第20-28页 |
·农杆菌(Agrobacterium)介导的基因转化方法 | 第20-24页 |
·根癌农杆菌 | 第20-21页 |
·根癌农杆菌Ti质粒 | 第21-22页 |
·根癌农杆菌介导的基因转移机制 | 第22-23页 |
·根癌农杆菌介导方法的优缺点 | 第23-24页 |
·基因枪法 | 第24-27页 |
·理化因素 | 第25-26页 |
·生物因素 | 第26-27页 |
·基因枪法进行遗传转化的优缺点 | 第27页 |
·农杆菌介导法与基因枪法相结合的转化方法 | 第27-28页 |
·海藻糖及海藻糖合酶基因简介 | 第28-31页 |
·海藻糖的生物学功能 | 第28页 |
·海藻糖的应用前景 | 第28-29页 |
·海藻糖合酶基因遗传转化的研究进展 | 第29-31页 |
引言 | 第31-32页 |
第二章 实验材料与实验方法 | 第32-42页 |
·实验材料 | 第32页 |
·植物材料 | 第32页 |
·实验菌株 | 第32页 |
·试剂及主要仪器 | 第32-35页 |
·主要试剂 | 第32页 |
·PCR 引物 | 第32页 |
·培养基 | 第32页 |
·常用的溶液 | 第32-34页 |
·常用缓冲液及试剂的成分与配制 | 第32-34页 |
·抗生素储备液 | 第34页 |
·提取质粒DNA 所用试剂 | 第34页 |
·提取植物DNA 所用试剂 | 第34页 |
·主要仪器 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-42页 |
·佛手高效再生系统的建立 | 第35页 |
·转化受体选择压力的确定 | 第35页 |
·农杆菌介导转化法 | 第35-37页 |
·菌种的保存 | 第35页 |
·菌种的活化和预处理 | 第35页 |
·预培养时间对遗传转化效率的影响 | 第35-36页 |
·佛手叶片与农杆菌共培养 | 第36页 |
·侵染时间和浓度对遗传转化效率的影响 | 第36页 |
·共培养时间对遗传转化效率的影响 | 第36页 |
·乙酰丁香酮( AS)的添加对佛手转化效率的影响 | 第36页 |
·除菌培养时间对遗传转化的影响 | 第36页 |
·抑菌抗生素对叶片转化的影响 | 第36页 |
·转化体的筛选及植株再生 | 第36-37页 |
·基因枪法的遗传转化 | 第37-39页 |
·质粒的大量提取和纯化 | 第37页 |
·质粒DNA 的纯化 | 第37页 |
·质粒的浓度及纯度检测 | 第37-38页 |
·材料准备 | 第38页 |
·基因枪轰击操作 | 第38页 |
·试验采取的处理组合 | 第38-39页 |
·真空度对转化效率的影响 | 第39页 |
·轰击后恢复培养时间对转化效率的影响 | 第39页 |
·转化体的筛选 | 第39页 |
·GUS 活性的组织化学检测 | 第39-40页 |
·植株的PCR 检测 | 第40-42页 |
第三章 结果与分析 | 第42-63页 |
·再生体系的建立 | 第42-44页 |
·培养基类型对愈伤组织诱导的影响 | 第42页 |
·生长素类对愈伤组织诱导的影响 | 第42-44页 |
·植物激素组合对佛手愈伤组织诱导的效应 | 第44页 |
·遗传转化体系的建立 | 第44-55页 |
·卡那霉素敏感性实验 | 第44-47页 |
·不同浓度卡那霉素(Km)对佛手愈伤组织分化的影响 | 第47-48页 |
·预培养时间对遗传转化的影响 | 第48页 |
·农杆菌感染时间和浓度对遗传转化的影响 | 第48-50页 |
·菌液浓度对GUS 瞬时表达率的影响 | 第50-51页 |
·不同抗生素的抑菌效果比较 | 第51页 |
·羧苄青霉素和头孢霉素浓度的确定 | 第51-52页 |
·共培养对遗传转化的影响 | 第52-53页 |
·半胱氨酸的添加对佛手转化的影响 | 第53页 |
·乙酰丁香酮( AS)的添加对佛手转化效率的影响 | 第53-54页 |
·除菌培养时间对遗传转化的影响 | 第54-55页 |
·基因枪转化条件初探 | 第55-63页 |
·质粒的鉴定 | 第55页 |
·氦气压力对GUS 瞬时表达的影响. | 第55-56页 |
·真空度对GUS 瞬时表达的影响 | 第56-57页 |
·射程对GUS 瞬时表达的影响 | 第57-59页 |
·GUS 瞬时表达检测时间的确定 | 第59-61页 |
·轰击次数对GUS 瞬间表达的影响 | 第61-62页 |
·抗性愈伤的分子生物学鉴定 | 第62-63页 |
第四章 讨论 | 第63-69页 |
·激素对佛手叶片愈伤组织诱导和分化的影响 | 第63页 |
·愈伤组织增殖培养过程中应该注意的问题 | 第63-64页 |
·转基因方法的确定 | 第64页 |
·标记基因及选择剂的影响 | 第64-65页 |
·影响农杆菌方法遗传转化的主要因素 | 第65-67页 |
·农杆菌浓度对转化效率的影响 | 第65页 |
·外植体的影响 | 第65-66页 |
·预培养时间的影响 | 第66页 |
·共培养的影响 | 第66页 |
·液体除菌对遗传转化的影响 | 第66-67页 |
·乙酰丁香酮(As)对遗传转化的影响 | 第67页 |
·基因枪转化系统的优化 | 第67-68页 |
·转化体的筛选及鉴定 | 第68-69页 |
第五章 结论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
作者简介 | 第78页 |