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破骨细胞形成抑制因子(OPG)的表达纯化及功能研究

第一章 前言第1-34页
 1 破骨细胞形成抑制因子研究进展第10-24页
   ·OPG/OCIF基因结构第10-11页
   ·OPG/OCIF蛋白结构和功能特征第11-13页
   ·OPG/OCIF的表达分布第13-14页
   ·OPG的生理功能第14-15页
   ·OPG的作用机理第15-16页
   ·OPG介导的信号传导第16-19页
   ·OPG的调控第19-20页
   ·OPG在骨疾病方面的潜在应用第20-22页
   ·展望第22-24页
 2 本课题的实验设计第24-27页
   ·研究目标第24页
   ·研究内容第24-25页
   ·拟采取的研究方案及可行性分析第25-27页
 参考文献第27-34页
第二章 破骨细胞形成抑制因子及突变体基因在E.coli中的表达、纯化及其生物活性测定第34-51页
 1 材料与方法第35-40页
   ·材料与试剂第35-37页
   ·重组表达质粒的构建及表达第37-38页
   ·SDS-PAGE和Western-blot分析第38页
   ·包涵体的提取第38-39页
   ·包涵体变性与复性第39页
   ·目的蛋白的纯化第39页
   ·抗体的制备第39页
   ·表达蛋白的降血钙活性测定第39页
   ·数据分析第39-40页
 2 结果第40-46页
   ·重组表达载体的构建与鉴定第40-41页
   ·重组表达载体在大肠杆菌中表达第41-44页
   ·大肠杆菌表达的OPG-T重组蛋白的纯化第44-45页
   ·抗体免疫活性测定第45页
   ·重组蛋白OPG-T降血钙活性第45-46页
 3 讨论第46-49页
 参考文献第49-51页
第三章 破骨细胞形成抑制因子在家蚕细胞、幼虫中表达第51-66页
 1 材料与方法第52-57页
   ·材料和试剂第52-54页
   ·实验方法第54-57页
 2 结果第57-62页
   ·重组转移载体pBacPAK8-OPG、pBacPAK8-OPG-372的构建及鉴定第57-58页
   ·重组病毒的筛选及鉴定第58-59页
   ·重组病毒Bm-OPG和Bm-OPG-372在家蚕细胞中表达第59-61页
   ·重组病毒Bm-OPG、Bm-OPG-372在家蚕幼虫中表达第61-62页
 3 讨论第62-65页
 参考文献第65-66页
第四章 家蚕表达的人OPG蛋白的纯化、定量和质谱鉴定第66-80页
 1 材料与方法第66-69页
   ·材料与试剂第66-67页
   ·方法第67-69页
 2 结果第69-77页
   ·目的蛋白的纯化第69-70页
   ·ELISA半定量法测定表达的重组蛋白含量第70-71页
   ·质谱鉴定分析第71-77页
 3 讨论第77-79页
 参考文献第79-80页
第五章 家蚕表达的人破骨细胞形成抑制因子及其突变体生物活性研究第80-95页
 1 材料与方法第81-83页
   ·材料与试剂第81页
   ·实验方法第81-83页
 2 结果第83-89页
   ·rh-OPG-372的体内降血钙作用第83页
   ·rh-OPG-372腹腔注射方式的体内降血钙作用的剂量效应第83-84页
   ·rh-OPG-372腹腔注射方式的体内降血钙作用的时间效应第84-85页
   ·rh-OPG口服给药方式的体内降血钙作用的剂量效应第85-86页
   ·rh-OPG口服给药方式的体内降血钙作用的时间效应第86-87页
   ·rh-OPG增加骨面积、防止骨流失作用第87-89页
 3 讨论第89-92页
 参考文献第92-95页
缩略语第95-96页
致谢第96页

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