| 1． 文献综述 | 第1-30页 |
| 1．1 前言 | 第10-27页 |
| 1．1．1 兰花简介 | 第10页 |
| 1．1．2 兰花经济价值 | 第10-12页 |
| 1．1．3 兰花的繁殖及育种 | 第12-13页 |
| 1．1．4 花分生组织决定基因AP1转化石斛兰的研究 | 第13-16页 |
| 1．14．1 引言 | 第13页 |
| 1．1．4．2 花发育调控基 | 第13-15页 |
| 1．1．4．3 花分生组织决定基因及 AP1的作用 | 第15-16页 |
| 1．1．4．4 花分生组织决定基因的转基因植物研究 | 第16页 |
| 1．1．5 观赏植物的花色及 CHSA基因 | 第16-23页 |
| 1．1．5．1 花色的产生 | 第16-17页 |
| 1．1．5．2 类黄酮的生物合成 | 第17-18页 |
| 1．1．5．3 CHS基因家簇及 CHSA基因 | 第18-20页 |
| 1．1．5．4 花色基因工程操作及应用 | 第20-23页 |
| 1．1．6 进行兰花遗传转化的必要性 | 第23-24页 |
| 1．1．7 兰花转化进展及存在的问题 | 第24-27页 |
| 1．2 本研究的意义和目的 | 第27-30页 |
| 2． 材料与方法 | 第30-45页 |
| 2．1 实验材料 | 第30-31页 |
| 2．1．1 植物材料 | 第30页 |
| 2．1．2 菌株及质粒 | 第30-31页 |
| 2．1．3 试剂和酶 | 第31页 |
| 2．2 实验方法 | 第31-45页 |
| 2．2．1 PCR引物设计 | 第31-32页 |
| 2．2．1．1 AP1序列 | 第31-32页 |
| 2．2．1．2 CHSA序列 | 第32页 |
| 2．2．2 基因克隆 | 第32-36页 |
| 2．2．2．1 AP1基因的克隆，序列分析及载体构建 | 第32-33页 |
| 2．2．2．2 查尔酮合酶基因(CHSA)的中间载体的构建 | 第33-36页 |
| 2．2．3 培养基 | 第36-37页 |
| 2．2．4 石斛兰愈伤组织及 PLB的诱导和培养 | 第37页 |
| 2．2．5 转基因植株的获得 | 第37-39页 |
| 2．2．5．1 农杆菌感受态的制备及转化 | 第37-38页 |
| 2．2．5．2 农杆菌 PCR分析 | 第38页 |
| 2．2．5．3 兰花的遗传转化 | 第38-39页 |
| 2．2．6 GUS组织化学染色 | 第39-40页 |
| 2．2．7 转基因兰花的分子检测 | 第40-45页 |
| 2．2．7．1 总 DNA的提取 | 第40页 |
| 2．2．7．2 转基因植物的 PCR检测 | 第40-41页 |
| 2．2．7．3 Southern blot分析 | 第41-43页 |
| 2．2．7．4 用异硫氰酸胍法提取总 RNA | 第43-44页 |
| 2．2．7．5 转基因植物的Northern检测 | 第44-45页 |
| 3． 结果与分析 | 第45-54页 |
| 3．1 AP1基因的克隆及重组植物转化载体质粒p1301PAA的构建 | 第45-46页 |
| 3．2 CHSA基因的载体构建 | 第46-48页 |
| 3．3 石斛兰愈伤组织的诱导及培养 | 第48页 |
| 3．4 转基因 D．nobile的 GUS组织化学染色检测 | 第48-49页 |
| 3．5 转基因石斛兰植株的获得 | 第49-51页 |
| 3．6 转AP1基因兰花 D．nobile的 Southern blot检测 | 第51页 |
| 3．7 转基因石斛兰(CHSA基因)的 PCR检测 | 第51-52页 |
| 3．8 转基因石斛兰(CHSA基因)的 Southern blot检测 | 第52-53页 |
| 3．9 转基因石斛兰(CHSA基因)的 Southern blot检测 | 第53-54页 |
| 4． 讨论与结论 | 第54-62页 |
| 4．1 兰花的组织培养 | 第54页 |
| 4．2 农杆菌介导的转化效率 | 第54-55页 |
| 4．3 添加 AS对转化效率的影响 | 第55-56页 |
| 4．4 转AP1基因石斛兰的 Southern杂交 | 第56页 |
| 5．5 AP1转基因植物中可能的开花特性的改变 | 第56-58页 |
| 4．6 转 CHSA基因石斛兰的 Southern杂交 | 第58-59页 |
| 4．7 转 CHSA基因石斛兰的Northern杂交 | 第59-60页 |
| 4．8 转基因研究在观赏植物上的应用前景 | 第60-62页 |
| 总结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 发表文章 | 第71页 |
