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肺炎克雷伯氏菌荚膜免疫活性物质的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-12页
前言第12-14页
第一章 文献综述第14-34页
   ·免疫系统概述第14-17页
     ·抗原及抗体第14页
     ·细胞因子第14-15页
     ·免疫调节第15页
     ·细胞凋亡与免疫调节第15-17页
   ·免疫调节剂的研究概况第17-21页
     ·免疫调节剂的种类第17页
     ·免疫调节剂的作用机理第17-18页
     ·免疫调节剂的应用前景第18-19页
     ·细菌表面组分的免疫调节活性第19页
     ·多糖的免疫调节活性第19-20页
     ·糖蛋白的免疫调节活性第20-21页
   ·细菌荚膜第21-24页
     ·细菌荚膜的结构第21-22页
     ·荚膜的性质第22-23页
     ·细菌荚膜多糖的研究现状第23-24页
   ·肺炎克雷伯氏菌的研究进展第24-26页
     ·肺炎克雷伯氏菌的生物学特性第24页
     ·肺炎克雷伯氏菌的表面结构第24-25页
     ·Kp荚膜糖蛋白的开发第25-26页
     ·Kp荚膜多糖第26页
   ·研究意义和目的第26-27页
 参考文献第27-34页
第二章 肺炎克雷伯氏菌荚膜免疫活性物质的检测方法研究第34-52页
   ·实验材料第34-35页
     ·菌株第34-35页
     ·实验动物第35页
     ·试剂与仪器第35页
   ·实验方法第35-39页
     ·Kp荚膜免疫活性物质抗体的制备第35-37页
     ·酶联免疫吸附测定用溶液第37页
     ·ELISA操作程序第37-38页
     ·Kp荚膜免疫活性物质间接ELISA定量法第38页
     ·Kp全菌ELISA定量法第38-39页
   ·结果与分析第39-50页
     ·抗体的制备与纯化第39-44页
     ·Kp荚膜免疫活性物质ELISA检测方法的建立第44-47页
     ·Kp全菌ELISA法的建立第47-50页
   ·小结第50页
 参考文献第50-52页
第三章 肺炎克雷伯氏菌的体外培养条件优化第52-68页
   ·实验材料第52-53页
     ·菌株第52页
     ·实验动物第52页
     ·培养基第52-53页
     ·实验方法第53-54页
     ·细菌形态学的检测方法第53页
     ·发酵液还原糖的测定第53页
     ·Kp的培养方法第53-54页
   ·结果与分析第54-65页
     ·菌种的体内复壮第54页
     ·种子培养基及培养条件的确定第54-56页
     ·发酵培养基的优化第56-61页
     ·摇瓶发酵条件的优化第61-65页
   ·小结第65-66页
 参考文献第66-68页
第四章 Kp荚膜活性物质的提取与纯化第68-86页
     ·实验材料第68-69页
     ·实验方法第69-71页
     ·荚膜活性物质检测方法第69页
     ·核酸的检测方法第69页
     ·蛋白质检测方法第69页
     ·脂多糖的定性检测第69页
     ·糖醛酸的分析第69-70页
     ·CIA提取工艺第70页
     ·CPS纯化第70-71页
     ·结果与分析第71-83页
     ·菌体裂解第71-74页
     ·裂解液的浓缩第74-75页
     ·核酸去除第75-76页
     ·CIA的有机溶剂沉淀第76-77页
     ·CIA的组成分析第77页
     ·荚膜多糖的分离纯化第77-81页
     ·荚膜多糖的纯度第81-82页
     ·荚膜多糖的物质组成第82-83页
   ·小结第83页
 参考文献第83-86页
第五章 肺炎克雷伯氏菌荚膜活性物质免疫调节功能的研究第86-97页
   ·实验材料第86-87页
     ·实验样品第86页
     ·实验动物第86页
     ·细胞株第86页
     ·试剂第86-87页
     ·仪器第87页
   ·实验方法第87-90页
     ·对非特异性免疫的影响:碳粒廓清试验第87-88页
     ·对细胞免疫的影响:ConA体外刺激淋巴细胞增殖试验,MTT法第88页
     ·对体液免疫的影响:溶血空斑试验第88页
     ·对细胞因子TNF生成的影响第88-90页
     ·CPS的免疫原性研究第90页
     ·统计方法第90页
   ·结果与分析第90-95页
     ·对非特异性免疫功能的影响第90-91页
     ·CPS免疫原性第91页
     ·对细胞免疫功能的影响第91-93页
     ·对体液免疫功能的影响第93页
     ·对细胞因子TNF-α产生的影响第93-95页
   ·小结第95页
 参考文献第95-97页
第六章…Kp荚膜多糖诱导肿瘤细胞K562凋亡的初步研究第97-112页
   ·材料与方法第97-99页
     ·试剂第97-98页
     ·实验仪器第98页
     ·细胞株第98页
     ·细胞培养基及溶液第98-99页
   ·实验方法第99-101页
     ·细胞培养、传代、冻存和复苏第99页
     ·细胞毒性试验第99-100页
     ·形态学观察第100页
     ·CPS对K562细胞凋亡和细胞周期的影响第100-101页
   ·结果与分析第101-110页
     ·CPS的细胞毒性测定(MTT)第101-102页
     ·形态学观察第102-105页
     ·琼脂糖凝胶电泳观察—DNA片断化第105-106页
     ·细胞凋亡和细胞周期的变化第106-110页
   ·小结第110页
 参考文献第110-112页
第七章 肺炎克雷伯氏菌荚膜多糖的一级结构表征第112-128页
   ·材料与方法第112-113页
     ·主要试剂第112页
     ·主要仪器与设备第112-113页
   ·实验方法第113-115页
     ·摩尔质量的测定第113页
     ·紫外特征谱图分析第113页
     ·结合核酸分析第113页
     ·单糖组成分析第113-114页
     ·氨基酸组成分析第114页
     ·糖肽键连接方式分析第114页
     ·糖环构型和糖苷键类型分析第114页
     ·相邻单糖基连接方式的分析第114-115页
   ·结果与分析第115-126页
     ·CPS摩尔质量第115页
     ·紫外光谱分析第115-117页
     ·单糖组成分析第117-119页
     ·肽链的氨基酸组成分析第119-120页
     ·糖肽键连接方式的分析第120-122页
     ·糖苷键类型和糖环构形分析第122-125页
     ·相邻单糖基连接方式的分析第125-126页
   ·小结第126页
 参考文献第126-128页
第八章 结论与展望第128-132页
   ·结论第128-130页
   ·创新点第130页
     ·展望第130-132页
攻读博士学位期间发表论文情况第132-133页
致谢第133页

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