摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-12页 |
前言 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-34页 |
·免疫系统概述 | 第14-17页 |
·抗原及抗体 | 第14页 |
·细胞因子 | 第14-15页 |
·免疫调节 | 第15页 |
·细胞凋亡与免疫调节 | 第15-17页 |
·免疫调节剂的研究概况 | 第17-21页 |
·免疫调节剂的种类 | 第17页 |
·免疫调节剂的作用机理 | 第17-18页 |
·免疫调节剂的应用前景 | 第18-19页 |
·细菌表面组分的免疫调节活性 | 第19页 |
·多糖的免疫调节活性 | 第19-20页 |
·糖蛋白的免疫调节活性 | 第20-21页 |
·细菌荚膜 | 第21-24页 |
·细菌荚膜的结构 | 第21-22页 |
·荚膜的性质 | 第22-23页 |
·细菌荚膜多糖的研究现状 | 第23-24页 |
·肺炎克雷伯氏菌的研究进展 | 第24-26页 |
·肺炎克雷伯氏菌的生物学特性 | 第24页 |
·肺炎克雷伯氏菌的表面结构 | 第24-25页 |
·Kp荚膜糖蛋白的开发 | 第25-26页 |
·Kp荚膜多糖 | 第26页 |
·研究意义和目的 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-34页 |
第二章 肺炎克雷伯氏菌荚膜免疫活性物质的检测方法研究 | 第34-52页 |
·实验材料 | 第34-35页 |
·菌株 | 第34-35页 |
·实验动物 | 第35页 |
·试剂与仪器 | 第35页 |
·实验方法 | 第35-39页 |
·Kp荚膜免疫活性物质抗体的制备 | 第35-37页 |
·酶联免疫吸附测定用溶液 | 第37页 |
·ELISA操作程序 | 第37-38页 |
·Kp荚膜免疫活性物质间接ELISA定量法 | 第38页 |
·Kp全菌ELISA定量法 | 第38-39页 |
·结果与分析 | 第39-50页 |
·抗体的制备与纯化 | 第39-44页 |
·Kp荚膜免疫活性物质ELISA检测方法的建立 | 第44-47页 |
·Kp全菌ELISA法的建立 | 第47-50页 |
·小结 | 第50页 |
参考文献 | 第50-52页 |
第三章 肺炎克雷伯氏菌的体外培养条件优化 | 第52-68页 |
·实验材料 | 第52-53页 |
·菌株 | 第52页 |
·实验动物 | 第52页 |
·培养基 | 第52-53页 |
·实验方法 | 第53-54页 |
·细菌形态学的检测方法 | 第53页 |
·发酵液还原糖的测定 | 第53页 |
·Kp的培养方法 | 第53-54页 |
·结果与分析 | 第54-65页 |
·菌种的体内复壮 | 第54页 |
·种子培养基及培养条件的确定 | 第54-56页 |
·发酵培养基的优化 | 第56-61页 |
·摇瓶发酵条件的优化 | 第61-65页 |
·小结 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-68页 |
第四章 Kp荚膜活性物质的提取与纯化 | 第68-86页 |
·实验材料 | 第68-69页 |
·实验方法 | 第69-71页 |
·荚膜活性物质检测方法 | 第69页 |
·核酸的检测方法 | 第69页 |
·蛋白质检测方法 | 第69页 |
·脂多糖的定性检测 | 第69页 |
·糖醛酸的分析 | 第69-70页 |
·CIA提取工艺 | 第70页 |
·CPS纯化 | 第70-71页 |
·结果与分析 | 第71-83页 |
·菌体裂解 | 第71-74页 |
·裂解液的浓缩 | 第74-75页 |
·核酸去除 | 第75-76页 |
·CIA的有机溶剂沉淀 | 第76-77页 |
·CIA的组成分析 | 第77页 |
·荚膜多糖的分离纯化 | 第77-81页 |
·荚膜多糖的纯度 | 第81-82页 |
·荚膜多糖的物质组成 | 第82-83页 |
·小结 | 第83页 |
参考文献 | 第83-86页 |
第五章 肺炎克雷伯氏菌荚膜活性物质免疫调节功能的研究 | 第86-97页 |
·实验材料 | 第86-87页 |
·实验样品 | 第86页 |
·实验动物 | 第86页 |
·细胞株 | 第86页 |
·试剂 | 第86-87页 |
·仪器 | 第87页 |
·实验方法 | 第87-90页 |
·对非特异性免疫的影响:碳粒廓清试验 | 第87-88页 |
·对细胞免疫的影响:ConA体外刺激淋巴细胞增殖试验,MTT法 | 第88页 |
·对体液免疫的影响:溶血空斑试验 | 第88页 |
·对细胞因子TNF生成的影响 | 第88-90页 |
·CPS的免疫原性研究 | 第90页 |
·统计方法 | 第90页 |
·结果与分析 | 第90-95页 |
·对非特异性免疫功能的影响 | 第90-91页 |
·CPS免疫原性 | 第91页 |
·对细胞免疫功能的影响 | 第91-93页 |
·对体液免疫功能的影响 | 第93页 |
·对细胞因子TNF-α产生的影响 | 第93-95页 |
·小结 | 第95页 |
参考文献 | 第95-97页 |
第六章…Kp荚膜多糖诱导肿瘤细胞K562凋亡的初步研究 | 第97-112页 |
·材料与方法 | 第97-99页 |
·试剂 | 第97-98页 |
·实验仪器 | 第98页 |
·细胞株 | 第98页 |
·细胞培养基及溶液 | 第98-99页 |
·实验方法 | 第99-101页 |
·细胞培养、传代、冻存和复苏 | 第99页 |
·细胞毒性试验 | 第99-100页 |
·形态学观察 | 第100页 |
·CPS对K562细胞凋亡和细胞周期的影响 | 第100-101页 |
·结果与分析 | 第101-110页 |
·CPS的细胞毒性测定(MTT) | 第101-102页 |
·形态学观察 | 第102-105页 |
·琼脂糖凝胶电泳观察—DNA片断化 | 第105-106页 |
·细胞凋亡和细胞周期的变化 | 第106-110页 |
·小结 | 第110页 |
参考文献 | 第110-112页 |
第七章 肺炎克雷伯氏菌荚膜多糖的一级结构表征 | 第112-128页 |
·材料与方法 | 第112-113页 |
·主要试剂 | 第112页 |
·主要仪器与设备 | 第112-113页 |
·实验方法 | 第113-115页 |
·摩尔质量的测定 | 第113页 |
·紫外特征谱图分析 | 第113页 |
·结合核酸分析 | 第113页 |
·单糖组成分析 | 第113-114页 |
·氨基酸组成分析 | 第114页 |
·糖肽键连接方式分析 | 第114页 |
·糖环构型和糖苷键类型分析 | 第114页 |
·相邻单糖基连接方式的分析 | 第114-115页 |
·结果与分析 | 第115-126页 |
·CPS摩尔质量 | 第115页 |
·紫外光谱分析 | 第115-117页 |
·单糖组成分析 | 第117-119页 |
·肽链的氨基酸组成分析 | 第119-120页 |
·糖肽键连接方式的分析 | 第120-122页 |
·糖苷键类型和糖环构形分析 | 第122-125页 |
·相邻单糖基连接方式的分析 | 第125-126页 |
·小结 | 第126页 |
参考文献 | 第126-128页 |
第八章 结论与展望 | 第128-132页 |
·结论 | 第128-130页 |
·创新点 | 第130页 |
·展望 | 第130-132页 |
攻读博士学位期间发表论文情况 | 第132-133页 |
致谢 | 第133页 |