反义4-香豆酸：CoA连接酶（4CL）转基因杨树研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 縮略词与专有名词 | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-18页 |
| ·4CL的研究进展 | 第9-11页 |
| ·4CL的作用 | 第9-10页 |
| ·4CL基因的结构 | 第10页 |
| ·4CL蛋白的功能研究 | 第10-11页 |
| ·4CL同功酶的研究 | 第11页 |
| ·转基因研究 | 第11-15页 |
| ·林木转基因研究 | 第11-12页 |
| ·林木转基因研究存在的问题 | 第12-15页 |
| ·杨树转基因的研究 | 第15-17页 |
| ·降木质素的研究 | 第16页 |
| ·转丛因杨树的应用前景 | 第16-17页 |
| ·研究方案 | 第17-18页 |
| 2 毛白杨反义4CL酶切位点的加入 | 第18-27页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·菌体及质粒 | 第18页 |
| ·酶与生化试剂 | 第18页 |
| ·引物合成与DNA测序 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-22页 |
| ·带酶切位点的引物的设计 | 第18-19页 |
| ·毛白杨组培苗DNA的提取 | 第19页 |
| ·聚合酶链式反应 | 第19页 |
| ·PCR扩增产物的回收 | 第19-20页 |
| ·PCR扩增产物与pMD19-T载体连接 | 第20页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌JM109 | 第20-21页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第21-22页 |
| ·菌液测序 | 第22页 |
| ·结果与分析 | 第22-27页 |
| ·加入酶切位点的反义4CL基因片段的克隆 | 第22-23页 |
| ·克隆载体的构建 | 第23-27页 |
| 3 毛白杨遗传转化体系的优化 | 第27-31页 |
| ·诱导毛白杨叶片不定芽分化培养基的筛选 | 第27-28页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28页 |
| ·敏感性实验 | 第28-31页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-29页 |
| ·共培养 | 第28页 |
| ·选择培养 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-31页 |
| 4 杨树转基因 | 第31-42页 |
| ·反义4CL基因表达载体的构建 | 第31-34页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·载体 | 第31页 |
| ·酶与生化试剂 | 第31页 |
| ·引物合成 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-32页 |
| ·载体与目的基因的双酶切反应 | 第31页 |
| ·载体及目的片段的回收 | 第31-32页 |
| ·载体连接 | 第32页 |
| ·连接片段转化大肠杆菌JM109 | 第32页 |
| ·重组质粒的提取 | 第32页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第32页 |
| ·重组质粒凝胶电泳片段回收 | 第32页 |
| ·重组质粒PCR鉴定 | 第32页 |
| ·结果与分析 | 第32-34页 |
| ·目的片段转化农杆菌 | 第34-36页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-35页 |
| ·YEB培养基的配制 | 第34页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| ·重组质粒转入农杆菌菌株LBA4404细胞 | 第35页 |
| ·进行质粒双酶切鉴定和PCR鉴定 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-36页 |
| ·转化农杆菌侵染杨树 | 第36-39页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-38页 |
| ·预培养 | 第37页 |
| ·携带表达载体的农杆菌培养 | 第37页 |
| ·农杆菌介导法侵染杨树叶盘 | 第37页 |
| ·共培养 | 第37页 |
| ·选择培养 | 第37页 |
| ·继代选择培养 | 第37-38页 |
| ·生根培养 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-39页 |
| ·转基因杨树的PCR鉴定 | 第39-42页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·植物材料 | 第39页 |
| ·载体 | 第39页 |
| ·试剂 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-42页 |
| ·CTAB法提取转基因杨树总DNA | 第39页 |
| ·转基因杨树的PCR检测 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-42页 |
| 5 结论及讨论 | 第42-44页 |
| ·结论 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 个人简介 | 第49-50页 |
| 导师简介 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
