首页--农业科学论文--农作物论文--禾谷类作物论文--稻论文

水稻杂种与亲本之间差异表达基因的分离克隆及表达研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-10页
目录第10-15页
第一章 文献综述第15-44页
 第一节 杂种优势机理研究进展第15-25页
   ·杂种优势的遗传基础第15-17页
     ·显性假说第15-16页
     ·超显性假说第16-17页
     ·上位性假说第17页
   ·经典假说的分子验证第17-20页
     ·显性假说的验证第17-18页
     ·超显性假说的验证第18页
     ·上位性假说的验证第18-19页
     ·显性、超显性和上位性假说的统一第19-20页
   ·多倍体与杂种优势第20页
   ·杂种优势的生理生化基础第20-21页
     ·物质积累与杂种优势第20-21页
     ·酶及生化代谢与杂种优势第21页
     ·生长素与杂种优势第21页
   ·基因网络系统与杂种优势第21-22页
   ·基因及基因表达调控与杂种优势第22-25页
     ·基因组DNA含量与杂种优势的关系第22-23页
     ·基因组甲基化水平与杂种优势第23页
     ·基因表达差异与杂种优势第23-24页
     ·基因表达模式与杂种优势第24-25页
   ·杂种优势的预测第25页
 第二节 卡尔文循环的调节及改良第25-31页
   ·卡尔文循环第25-26页
   ·Calvin循环的调节第26-28页
     ·自动催化作用第26-27页
     ·光调节作用第27页
     ·光合产物输出速率的调节第27-28页
   ·通过卡尔文循环改良农作物第28-31页
 第三节 差异表达基因的分离方法第31-38页
   ·序列克隆法第31-32页
   ·基于基因功能的克隆方法第32页
     ·根据基因表达的蛋白质第32页
     ·根据基因的表型突变互补功能第32页
   ·转座子或T-DNA标签法第32-33页
   ·图位克隆法第33页
   ·差异表达分析法第33-36页
     ·cDNA-RAPD分析法第33页
     ·差异显示第33-34页
     ·抑制消减杂交法第34页
     ·cDNA-AFLP第34页
     ·基因表达系列分析第34-35页
     ·cDNA微阵列第35-36页
   ·cDNA末端快速扩增技术第36-38页
 第四节 水稻功能基因组计划第38-44页
   ·水稻种植概况第38页
   ·水稻基因组特征第38页
   ·水稻功能基因组计划第38-42页
     ·准备水稻功能基因组研究所需要的材料第39页
     ·水稻转化体系的建立与完善第39页
     ·表达模式研究第39-40页
     ·生物信息学第40页
     ·发掘有重要应用价值的基因第40-42页
     ·功能基因组在水稻育种中的应用第42页
     ·整合全球水稻功能基因组资源第42页
   ·本研究的目的和意义第42-44页
第二章 杂种与亲本间差异表达基因的分离克隆第44-64页
 前言第44页
 1.材料与方法第44-50页
   ·材料种植第44页
   ·总RNA的提取第44-45页
   ·反转录第45页
   ·双链cDNA的合成第45页
   ·双链cDNA的酶切第45-46页
   ·连接反应第46页
   ·预扩增第46-47页
   ·扩增第47页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第47-48页
   ·银染第48页
   ·PCR产物的回收第48-49页
   ·PCR产物克隆第49页
   ·DH5a感受态细胞的制备与转化第49页
   ·阳性克隆的鉴定第49-50页
   ·接头及引物序列第50页
 2.结果与分析第50-59页
   ·总RNA的检测第50-51页
   ·双链cDNA的质量检测第51页
   ·酶切产物的预扩增第51-52页
   ·杂种与亲本基因表达谱的差异分析第52-54页
   ·部分差异片段的克隆、测序及BLAST分析第54-59页
   ·差异表达基因的验证第59页
   ·差异表达基因的染色体定位第59页
 3.讨论第59-64页
   ·cDNA-AFLP技术的优点第59-61页
   ·杂种与亲本间的基因表达差异第61-62页
   ·基因差异表达类型与经典遗传理论第62-63页
   ·差异表达基因在染色体上的分布第63-64页
第三章 水稻磷酸核酮糖激酶基因OsPrk的克隆、表达及生化特性分析第64-82页
 前言第64页
 1.材料与方法第64-72页
   ·实验材料第64-65页
   ·材料处理第65页
   ·RT-PCR第65-66页
   ·水稻基因组DNA的提取第66页
   ·Southern印迹第66-68页
     ·水稻总DNA的酶切第66页
     ·转膜第66-67页
     ·Southern杂交第67-68页
   ·总RNA的提取第68-69页
   ·Northern印迹第69-70页
     ·甲醛变性琼脂糖凝胶的制备第69页
     ·RNA样品制备第69页
     ·电泳及转膜第69-70页
   ·膜的再利用第70页
   ·RACE第70-72页
   ·酶活性测定第72页
     ·粗酶液提取缓冲液第72页
     ·粗酶液提取第72页
     ·PRKase活性测定第72页
 2.结果与分析第72-80页
   ·发水稻OsPrk基因的克隆及序列分析第72-75页
   ·Southern杂交及染色体定位第75-77页
   ·OsPrk基因在杂种与亲本间的差异表达第77页
   ·OsPrk基因的表达部位第77页
   ·光诱导OsPrk基因的表达第77-78页
   ·不同处理对Rprk表达的影响第78-79页
   ·水稻PRKase生化特性第79-80页
 3.讨论第80-82页
第四章 水稻景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶基因的克隆及表达分析第82-97页
 前言第82页
 1.材料与方法第82-83页
   ·材料与材料处理第82页
   ·DNA和RNA的提取第82页
   ·RT-PCR和RACE方法第82页
   ·Southern和Northern blot第82页
   ·PCR产物的回收、克隆、转化第82-83页
   ·SBPase酶活力测定第83页
 2.结果与分析第83-95页
   ·水稻OsSbp基因全长cDNA及基因组编码序列的分离第83页
   ·OsSbp序列分析第83-85页
   ·氨基酸序列分析第85-87页
   ·5’上游光调节序列的识别及特征分析第87-89页
   ·Southern杂交第89-90页
   ·OsSbp基因组织分布第90页
   ·光调节OsSbp基因的表达第90-91页
   ·OsSbp基因在杂种与亲本间的差异表达第91页
   ·不同处理对OsSbp基因表达的影响第91-93页
   ·Calvin循环基因5’上游序列调节结构域的预测和比较第93-95页
 3.讨论第95-97页
   ·OsSbp基因的克隆及光调节序列的识别第95页
   ·不同处理对Rsbp基因转录和酶活力的影响第95-97页
第五章 总讨论第97-100页
参考文献第100-113页
附录Ⅰ 杂种与亲本之间的部分差异表达基因片段第113-145页
附录Ⅱ 文中缩写说明第145-146页
在读期间发表和待发表的论文第146-147页
致谢第147页

论文共147页,点击 下载论文
上一篇:虚拟器件仿真与建模方法的研究
下一篇:企业资源计划环境下工作流建模方法及引擎设计的研究