| 缩略词表 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 引言 | 第14-33页 |
| 一、 细胞因子简介 | 第14-15页 |
| 二、 白细胞介素18的研究进展 | 第15-33页 |
| (一) IL-18的发现 | 第15页 |
| (二) IL-18的来源 | 第15-16页 |
| (三) IL-18的分子结构 | 第16-18页 |
| (四) IL-18的基因结构和基因表达调控 | 第18-19页 |
| (五) IL-18的处理机制 | 第19-20页 |
| (六) IL-18的受体和信号转导 | 第20-23页 |
| (七) IL-18的生物学功能 | 第23-30页 |
| (八) IL-18的检测 | 第30页 |
| (九) IL-18与变态反应性疾病 | 第30-31页 |
| (十) IL-18与自身免疫疾病 | 第31页 |
| (十一) IL-18引起内毒素诱导的肝损伤 | 第31页 |
| (十二) 鸡白细胞介素18的研究进展 | 第31-32页 |
| (十三) 结语 | 第32-33页 |
| 第一章 鸡白细胞介素18成熟蛋白全长基因的克隆与序列分析 | 第33-46页 |
| 1 材料与方法 | 第33-40页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·细胞系 | 第33页 |
| ·载体与受体菌 | 第33页 |
| ·工具酶与主要试剂 | 第33页 |
| ·主要溶液的配制 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-40页 |
| ·ChIL-18成熟蛋白全长基因的RT-PCR扩增 | 第34-36页 |
| ·ChIL-18成熟蛋白基因PCR产物的克隆 | 第36-39页 |
| ·鸡与人和其他11种动物IL-18成熟蛋白基因序列和推导的氨基酸序列分析 | 第39-40页 |
| 2 结果 | 第40-44页 |
| ·鸡IL-18 mRNA的RT-PCR扩增 | 第40页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第40页 |
| ·cDNA克隆片段的序列测定 | 第40页 |
| ·IL-18成熟蛋白基因核苷酸序列同源性比较及序列进化分析 | 第40页 |
| ·IL-18成熟蛋白氨基酸序列同源性比较及其进化树的绘制 | 第40-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| 第二章 鸡白细胞介素18成熟蛋白基因的原核表达及多克隆抗体制备 | 第46-63页 |
| 1 材料与方法 | 第46-54页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·菌株及质粒 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46-47页 |
| ·实验动物 | 第47页 |
| ·SDS-PAGE相关缓冲液 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-54页 |
| ·鸡IL-18成熟蛋白基因原核表达载体的构建 | 第47-49页 |
| ·重组原核表达质粒的鉴定 | 第49-50页 |
| ·pGEX-mChIL18重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达及表达条件的优化 | 第50-52页 |
| ·重组菌表达产物多克隆抗血清的制备 | 第52页 |
| ·重组菌菌体裂解物的免疫印迹分析 | 第52-53页 |
| ·GST-mChIL18融合蛋白的亲和纯化 | 第53-54页 |
| 2 结果 | 第54-62页 |
| ·mChIL-18重组表达质粒的鉴定 | 第54-55页 |
| ·mChIL-18融合蛋白的表达、鉴定与纯化 | 第55-62页 |
| 3 讨论 | 第62-63页 |
| 第三章 鸡白细胞介素18成熟蛋白基因真核表达质粒的构建及其在鸡胚成纤维细胞中的表达 | 第63-73页 |
| 1 材料与方法 | 第63-68页 |
| ·材料 | 第63-64页 |
| ·质粒及宿主菌 | 第63-64页 |
| ·主要试剂 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-68页 |
| ·ChIL-18成熟蛋白基因重组真核表达质粒的构建 | 第64-65页 |
| ·重组真核表达质粒的鉴定 | 第65-66页 |
| ·重组真核表达质粒转染鸡胚成纤维细胞 | 第66-68页 |
| 2 结果 | 第68-72页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第68页 |
| ·mChIL-18基因真核表达载体的构建及鉴定 | 第68-69页 |
| ·转染细胞中ChIL-18成熟蛋白表达的检测 | 第69-72页 |
| 3 讨论 | 第72-73页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-84页 |
| 附录 | 第84-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第88页 |
