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小麦Mlo基因原核表达、抗体制备及免疫金标记

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
第一部分 文献综述第9-29页
 第一章 小麦与白粉病菌互作的研究概况第9-19页
   ·禾白粉病菌概述第9-11页
   ·白粉病菌与寄主互作的基本过程第11-12页
   ·寄主细胞抵御白粉病菌侵染的细胞反应第12-15页
     ·细胞质凝聚第12-13页
     ·晕环反应第13页
     ·乳突反应第13-14页
     ·过敏性反应第14-15页
   ·白粉病菌主要的侵染机构-吸器第15-19页
     ·吸器的超微结构第15-16页
     ·吸器外膜第16页
     ·吸器外基质第16-19页
 第二章 Mlo基因的研究进展第19-28页
   ·Mlo基因及其产物的结构特点第21-22页
   ·Mlo基因在信号传导中可能的功能第22-24页
     ·Mlo基因与Ror1、Ror2基因第23页
     ·MLO蛋白和G-蛋白耦合受体蛋白第23-24页
     ·MLO蛋白和钙调素(CaM)第24页
   ·Mlo基因的抗性机制第24-28页
 论文研究的目的与思路第28-29页
第二部分 实验部分第29-56页
 第一章 小麦MLO蛋白基因的原核表达及表达产物抗血清的制备第29-43页
  1 材料和方法第29-38页
   ·材料第29-33页
     ·菌种、质粒和抗体第29页
     ·引物第29-30页
     ·酶和生化试剂第30页
     ·缓冲液配制第30-33页
   ·方法第33-38页
     ·实验所涉及的常规分子生物学实验技术第33-38页
       ·碱法提取质粒第33-34页
       ·酶切鉴定第34页
       ·PCR反应及产物纯化第34-35页
       ·感受态细胞制备第35-36页
       ·连接方法第36页
       ·转化第36页
       ·Western-blot第36-37页
       ·表达严物纯化第37-38页
       ·间接ELISA第38页
  2 实验步骤第38-39页
   ·原核表达载体构建第38-39页
   ·诱导表达、SDS-PAGE分析和蛋白纯化第39页
   ·抗体制备、Western blot和免疫胶体金标记第39页
  3 实验结果与分析第39-41页
   ·小麦MLO蛋白羧基端多肽在大肠杆菌中的表达第39-40页
   ·表达产物抗血清的制备和检测第40-41页
  4 讨论第41-43页
 第二章 小麦与白粉病菌互作中MLO蛋白的细胞化学定位第43-56页
  1 材料和方法第44-45页
   ·供试材料与接种处理第44页
   ·低温包埋样品制备第44-45页
   ·细胞化学标记第45页
   ·统计方法第45页
  2 实验设计和结果分析第45-53页
   ·实验设计第45-46页
   ·实验结果和分析第46-53页
     ·一抗结合时间对标记结果的影响第46-49页
     ·不同抗血清标记即一抗替换标记实验和一抗缺失标记实验第49-51页
     ·MLO蛋白的免疫定位第51-53页
  3 讨论第53-56页
   ·标记条件对标记结果的影响第53页
   ·一抗缺失和一抗替换法确定小麦MLO蛋白的免疫定位第53-54页
   ·Mlo基因的作用机制第54-56页
参考文献第56-63页
致谢第63页

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