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原生殖细胞和囊胚细胞为载体制备转基因家禽的初步研究

1 内容提要第1-8页
2 前言第8-19页
 2.1 禽类的早期胚胎发育特点制约了其转基因技术的发展第8-10页
 2.2 家禽转基因研究概况第10-17页
  2.2.1 逆转录病毒转染技术第10页
  2.2.2 精子介导法第10-11页
  2.2.3 DNA显微注射第11-12页
  2.2.4 利用嵌合体技术进行家禽转基因第12-17页
 2.3 转基因家禽研究的理想模型—骡鸭第17-19页
3 鸭胚胎血液PGCs数量及其外源DNA的体内转染第19-29页
 3.1 材料与方法第19-22页
  3.1.1 主要仪器第19-20页
  3.1.2 主要药品第20页
  3.1.3 菌株和质粒DNA第20页
  3.1.4 种蛋来源第20页
  3.1.5 胚胎孵化及分期第20页
  3.1.6 胚胎血液的抽取第20-21页
  3.1.7 血涂片的PAS反应第21页
  3.1.8 PGCs的记数方法第21页
  3.1.9 转染质粒DNA的制备第21页
  3.1.10 转染液的制备第21-22页
  3.1.11 转染液的注入第22页
  3.1.12 外源基因表达的检测第22页
 3.2 结果第22-27页
  3.2.1 原生殖细胞的形态学及组化观察第22-23页
  3.2.2 原生殖细胞的记数第23-25页
  3.2.3 外源DNA的体内表达情况第25-27页
 3.3 讨论第27-29页
4 囊胚细胞为供体的嵌合体制作第29-40页
 4.1 材料与方法第29-33页
  4.1.1 主要仪器第29-30页
  4.1.2 主要药品第30页
  4.1.3 菌株和质粒DNA第30页
  4.1.4 种蛋来源第30页
  4.1.5 胚胎孵化第30-31页
  4.1.6 转染质粒DNA的制备第31页
  4.1.7 囊胚细胞的分离和培养第31页
  4.1.8 胚胎提取物的制备第31页
  4.1.9 胚胎提取物对囊胚细胞生长的影响第31-32页
  4.1.10 囊胚细胞的体外转染第32页
  4.1.11 血清对转染效率的影响第32页
  4.1.12 囊胚细胞的转移第32页
  4.1.13 外源基因表达的检测第32-33页
 4.2 结果第33-38页
  4.2.1 囊胚细胞的体外培养第33-34页
  4.2.2 鸡胚提取物对细胞生长的影响第34-35页
  4.2.3 血清对脂质体转染效率的影响第35-36页
  4.2.4 转基因囊胚细胞制备嵌合体第36-38页
 4.3 讨论第38-40页
5 参考文献第40-48页
6 中文摘要第48-50页

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