| 缩略词表 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1． 前言 | 第11-21页 |
| 1．1 拟南芥中的MAPK及其级联途径的研究 | 第11-15页 |
| 1．1．1 植物中的MAP激酶级联途径 | 第11-12页 |
| 1．1．2 MAPK级联系统的复杂性和特异性 | 第12页 |
| 1．1．3 拟南芥中的MAPK多基因家族 | 第12-14页 |
| 1．1．4 研究植物MAPK的方法 | 第14-15页 |
| 1．2 RNA干涉及其在植物学研究中的应用 | 第15-20页 |
| 1．2．1 RNA干涉（RNA interference) | 第15-16页 |
| 1．2．2 RNA干涉的分子机制 | 第16-18页 |
| 1．2．3 RNA干涉技术 | 第18页 |
| 1．2．4 RNA干涉技术在植物中的研究及应用 | 第18-20页 |
| 1．3 立题依据 | 第20-21页 |
| 2． 材料与方法 | 第21-32页 |
| 2．1 实验材料和试剂 | 第21-22页 |
| 2．2 实验方法 | 第22-30页 |
| 2．2．1 拟南芥（Arabidopsis thaliana）野生型材料的种植方法 | 第22-23页 |
| 2．2．2 CTAB法制备拟南芥基因组DNA | 第23页 |
| 2．2．3 PCR扩增 | 第23-24页 |
| 2．2．4 DNA的琼脂糖电泳 | 第24页 |
| 2．2．5 从低熔点琼脂糖中回收目的DNA片段 | 第24页 |
| 2．2．6 DNA的定量 | 第24-25页 |
| 2．2．7 DNA的限制性内切酶消化 | 第25页 |
| 2．2．8 DNA片段的连接 | 第25页 |
| 2．2．9 大肠杆菌（E．coli）质粒提取 | 第25-26页 |
| 2．2．10 大肠杆菌（E．coli）感受态细胞的制备和转化 | 第26页 |
| 2．2．11 DNA末端的去磷酸化 | 第26-27页 |
| 2．2．12 农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）质粒提取 | 第27页 |
| 2．2．13 农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）感受态的制备及转化 | 第27页 |
| 2．2．14 农杆菌介导拟南芥转化（Floraldip) | 第27-28页 |
| 2．2．15 潜在转化株系的筛选 | 第28页 |
| 2．2．16 Trizol法提取拟南芥总RNA | 第28-29页 |
| 2．2．17 RNA的甲醛变性琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
| 2．2．18 反转录制备拟南芥cNDA | 第29页 |
| 2．2．19 从cDNA中扩增目的基因 | 第29-30页 |
| 2．2．20 拟南芥基因组DNA的快速小量提取 | 第30页 |
| 2．2．21 PCR法检测T-DNA序列的插入 | 第30页 |
| 2．3 实验溶液 | 第30-32页 |
| 2．3．1 常用溶液 | 第30-31页 |
| 2．3．2 抗生素 | 第31页 |
| 2．3．3 培养基 | 第31-32页 |
| 3． 实验步骤及结果 | 第32-50页 |
| 3．1 植物C亚族MAPK蛋白序列分析 | 第32-33页 |
| 3．2 拟南芥MAPK2基因片段的克隆 | 第33-35页 |
| 3．2．1 引物设计 | 第33-34页 |
| 3．2．2 基因扩增 | 第34页 |
| 3．2．3 目的基因扩增产物的测序 | 第34-35页 |
| 3．3 质粒构建 | 第35-43页 |
| 3．3．1 质粒构建策略 | 第35-39页 |
| 3．3．2 质粒pFGCmpk2s的构建 | 第39-40页 |
| 3．3．3 质粒pUCmT-mpk2的构建 | 第40-42页 |
| 3．3．4 质粒pFGCmpk2ds的构建 | 第42-43页 |
| 3．4 重组pFGCmpk2ds质粒对农杆菌转化 | 第43-44页 |
| 3．5 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第44页 |
| 3．6 潜在转化株的筛选 | 第44-45页 |
| 3．7 突变体中mapk2基因表达水平的检测 | 第45页 |
| 3．8 RNAi突变体的表型鉴定 | 第45-47页 |
| 3．9 T-DNA插入突变体基因型的鉴定 | 第47-50页 |
| 4． 讨论 | 第50-53页 |
| 4．1 质粒构建 | 第50页 |
| 4．2 潜在转化株的筛选和鉴定 | 第50-51页 |
| 4．3 转化株表型分析 | 第51-53页 |
| 5． 结论 | 第53-54页 |
| 6． 参考文献 | 第54-61页 |
| 7． 致谢 | 第61页 |
