| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-40页 |
| 1 溶瘤病毒 | 第11-35页 |
| ·溶瘤病毒裂解肿瘤细胞的机制 | 第12-14页 |
| ·溶瘤病毒抗癌特异性的机制 | 第14-17页 |
| ·改造病毒外壳结构，使病毒亲嗜性发生改变 | 第14-15页 |
| ·采用双功能接头达到靶向性溶瘤的效果 | 第15-16页 |
| ·通过特异性启动子使病毒只能在肿瘤细胞内增殖 | 第16页 |
| ·通过缺失病毒的某一种基因构建靶向性溶瘤病毒 | 第16-17页 |
| ·常见的几种溶瘤病毒 | 第17-33页 |
| ·单纯疱疹病毒 | 第17-27页 |
| ·腺病毒 | 第27-30页 |
| ·人呼肠孤病毒 | 第30-32页 |
| ·细小病毒 | 第32页 |
| ·新城疫病毒 | 第32-33页 |
| ·结语 | 第33-35页 |
| 2 本实验研究背景及目的 | 第35-40页 |
| ·研究背景 | 第35-38页 |
| ·研究目的 | 第38-40页 |
| 第二章 研究方法 | 第40-58页 |
| 1 基因克隆技术 | 第40-46页 |
| ·质粒DNA的制备 | 第40-42页 |
| ·限制性酶消化 | 第42页 |
| ·DNA片段回收 | 第42-44页 |
| ·DNA片段及载体的连接 | 第44页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第44-45页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第45-46页 |
| ·菌种的甘油保存 | 第46页 |
| 2 细胞培养 | 第46-49页 |
| ·细胞培养基的配制 | 第46-47页 |
| ·细胞传代培养 | 第47页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第47-48页 |
| ·细胞计数 | 第48-49页 |
| 3 病毒的增殖 | 第49-51页 |
| ·细胞转染 | 第49-50页 |
| ·病毒的扩增 | 第50页 |
| ·病毒粒子的纯化 | 第50页 |
| ·空斑试验 | 第50-51页 |
| 4 核蛋白质的抽提 | 第51-53页 |
| 5 蛋白的原核表达及纯化 | 第53-55页 |
| ·pET28原核系统的表达 | 第53-54页 |
| ·Ni~(2+)亲和层析法纯化蛋白 | 第54-55页 |
| 6 实验中所用到的溶液及试剂 | 第55-58页 |
| 第三章 mtHSV的体外选择性杀瘤效应研究 | 第58-67页 |
| 引言 | 第58-59页 |
| 1 材料与方法 | 第59-60页 |
| ·细胞与实验动物 | 第59-60页 |
| ·病毒在肿瘤细胞中的复制效率 | 第60页 |
| ·病毒对肿瘤细胞的感染 | 第60页 |
| 2 结果 | 第60-63页 |
| ·mtHSV在人肿瘤细胞中的选择性复制 | 第60-61页 |
| ·mtHSV对肿瘤细胞的靶向性杀伤效率 | 第61-63页 |
| 3 讨论 | 第63-67页 |
| ·突变型单纯疱疹病毒的安全性 | 第63-65页 |
| ·突变型单纯疱疹病毒的靶向性杀瘤作用 | 第65-67页 |
| 第四章 mtHSV对荷人肝癌Hep-3B裸鼠的治疗 | 第67-96页 |
| 引言 | 第68-69页 |
| 1 材料与方法 | 第69-75页 |
| ·细胞与实验动物 | 第69-70页 |
| ·Hep-3B细胞的大量培养及浓缩 | 第70-71页 |
| ·建立荷瘤裸鼠模型 | 第71页 |
| ·mtHSV的制备和保存 | 第71-72页 |
| ·mtHSV对荷Hep-3b裸鼠的治疗 | 第72页 |
| ·裸鼠各组织总RNA的提取和RT-PCR | 第72-74页 |
| ·血液学指标检测 | 第74页 |
| ·血液生化指标检测 | 第74页 |
| ·系统尸检及病理组织学检查 | 第74-75页 |
| ·统计学分析 | 第75页 |
| 2 结果 | 第75-92页 |
| ·荷人瘤Hep-3B裸鼠模型的建立 | 第75-76页 |
| ·mtHSV的抑瘤效应 | 第76-83页 |
| ·各治疗组裸鼠与空白对照组裸鼠外观比较 | 第76-78页 |
| ·mtHSV治疗组裸鼠肿瘤与对照组裸鼠肿瘤解剖后比较 | 第78页 |
| ·mtHSV对荷Hep-3B裸鼠在体肿瘤生长的抑制 | 第78-81页 |
| ·mtHSV对荷Hep-3B裸鼠肿瘤的抑制作用总结 | 第81-83页 |
| ·RT-PCR产物的电泳检测 | 第83-85页 |
| ·以pol基因作为引物的RT-PCR产物的电泳检测 | 第83-84页 |
| ·以tk基因作为引物的RT-PCR产物的电泳检测 | 第84-85页 |
| ·血液学指标检测结果 | 第85-86页 |
| ·血液生化指标检测结果 | 第86-88页 |
| ·系统尸检结果 | 第88-90页 |
| ·病理组织学检查结果 | 第90-92页 |
| 3 讨论 | 第92-96页 |
| ·mtHSV治疗荷人瘤裸鼠的有效性和安全性 | 第92-93页 |
| ·mtHSV靶向性溶癌的理论基础 | 第93页 |
| ·展望 | 第93-96页 |
| 参考文献 | 第96-106页 |
| 硕士期间发表和待发表的论文 | 第106-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
