| 1 前言 | 第1-27页 |
| ·美洲商陆抗病毒蛋白研究进展 | 第12-19页 |
| ·PAP发现的历史及意义 | 第12页 |
| ·PAP的来源及种类 | 第12-13页 |
| ·PAP的理化性质 | 第13页 |
| ·PAP晶体结构的研究 | 第13-14页 |
| ·PAP生物活性 | 第14-15页 |
| ·抑制植物病毒的活性 | 第14页 |
| ·抑制动物病毒的活性 | 第14页 |
| ·PAP的其他活性 | 第14-15页 |
| ·PAP的作用机理 | 第15-16页 |
| ·PAP基因的研究 | 第16-18页 |
| ·PAP基因的克隆与表达 | 第17页 |
| ·PAP的转基因植物 | 第17页 |
| ·PAP基因突变体的研究 | 第17-18页 |
| ·PAP在医学上的应用前景 | 第18-19页 |
| ·展望 | 第19页 |
| ·巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统 | 第19-27页 |
| ·巴斯德毕赤酵母生物学特性 | 第19-20页 |
| ·巴斯德毕赤酵母的分子生物学 | 第20-21页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统的优点 | 第21页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达受体菌 | 第21-22页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达载体 | 第22-23页 |
| ·巴斯德毕赤酵母的载体元件 | 第23-24页 |
| ·启动子 | 第23-24页 |
| ·选择标记 | 第24页 |
| ·信号肽序列 | 第24页 |
| ·影响异源蛋白表达量的因素 | 第24-25页 |
| ·外源基因的拷贝数 | 第24-25页 |
| ·产物稳定性 | 第25页 |
| ·培养条件 | 第25页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统的应用前景 | 第25-27页 |
| 2 材料和方法 | 第27-35页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·菌种和质粒 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-35页 |
| ·各种培养基的配制 | 第28-29页 |
| ·其他试剂配制 | 第29页 |
| ·质粒的提取 | 第29-30页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第30页 |
| ·GS115的转化 | 第30-31页 |
| ·转化子表型鉴定 | 第31页 |
| ·酵母总DNA的提取 | 第31-32页 |
| ·PCR鉴定阳性转化子 | 第32页 |
| ·双膜免疫杂交法筛选高表达转化子 | 第32-33页 |
| ·PAP基因的诱导表达 | 第33页 |
| ·细胞光密度分析 | 第33页 |
| ·SDS-PAGE分析蛋白含量及分子量 | 第33页 |
| ·Western-blotting分析 | 第33-34页 |
| ·表达产物抗病毒活性的检测 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-45页 |
| ·酵母电转化及转化子的筛选鉴定 | 第35-37页 |
| ·转化子的PCR鉴定 | 第35-36页 |
| ·PAP高表达转化子的筛选 | 第36-37页 |
| ·Mut~+和Mut~s重组子表达PAP的比较 | 第37-38页 |
| ·表达产物抗病毒生物活性的测定 | 第38-39页 |
| ·诱导时间对Mut~+重组子表达PAP的影响 | 第39-40页 |
| ·甲醇浓度对Mut~+重组子表达PAP的影响 | 第40-41页 |
| ·pH值对Mut~+重组子表达PAP的影响 | 第41-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| ·表达产物的分子量大小 | 第45页 |
| ·Mut~+和Mut~s型重组子 | 第45页 |
| ·PAP表达条件的探索 | 第45-46页 |
| ·PAP试剂的研制 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-59页 |
| 缩略语 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简历 | 第61页 |