| 中文摘要 | 第1-13页 |
| 英文摘要 | 第13-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-47页 |
| ·棉蚜抗药性的发生和研究现状 | 第18-22页 |
| ·棉蚜抗药性的发生和发展 | 第18-19页 |
| ·棉蚜抗药性机制的研究 | 第19-21页 |
| ·棉蚜抗药性治理 | 第21-22页 |
| ·杀虫剂神经靶标的分子生物学研究进展 | 第22-42页 |
| ·乙酰胆碱酯酶 | 第23-29页 |
| ·乙酰胆碱受体 | 第29-35页 |
| ·神经轴突钠离子通道 | 第35-42页 |
| ·害虫抗性分子检测技术研究进展 | 第42-47页 |
| ·害虫抗药性分子检测技术的应用 | 第42-45页 |
| ·常用害虫抗药性分子检测技术的优缺点 | 第45-46页 |
| ·结论与展望 | 第46-47页 |
| 第二章 棉蚜饲养新方法-笼罩法 | 第47-51页 |
| ·材料与方法 | 第47-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-50页 |
| ·结论 | 第50-51页 |
| 第三章 寄主对棉蚜羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的影响 | 第51-58页 |
| ·材料与方法 | 第51-53页 |
| ·供试棉蚜及饲养 | 第51-52页 |
| ·供试药剂 | 第52页 |
| ·酶液 | 第52页 |
| ·羧酸酯酶的活力及K_m、V_m的测定 | 第52页 |
| ·乙酰胆碱酯酶活力及K_m、V_m的测定 | 第52-53页 |
| ·乙酰胆碱酯酶抑制中浓度和K_i值的测定 | 第53页 |
| ·蛋白含量测定 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-57页 |
| ·取食不同寄主的棉蚜羧酸酯酶K_m和V_m值 | 第53-54页 |
| ·取食棉花的各品系棉蚜乙酰胆碱酯酶对甲胺磷的敏感性差异 | 第54页 |
| ·取食南瓜和木槿的各品系棉蚜乙酰胆碱酯酶对甲胺磷敏感性的变化 | 第54-55页 |
| ·取食不同寄主的各品系棉蚜AChE酶动力学参数的比较 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| 第四章 乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的变异与棉蚜抗性的关系 | 第58-65页 |
| ·材料与方法 | 第59-61页 |
| ·供试棉蚜及饲养 | 第59页 |
| ·供试药剂 | 第59页 |
| ·生物测定-浸叶法 | 第59页 |
| ·酶液 | 第59-60页 |
| ·乙酰胆碱酯酶活力及K_m、V_m真的测定 | 第60页 |
| ·乙酰胆碱酯酶抑制中浓度的测定 | 第60页 |
| ·全酯酶与羧酸酯酶的活力测定 | 第60-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-63页 |
| ·生物测定结果 | 第61页 |
| ·不同品系棉蚜乙酰胆碱酯酶对杀虫剂的敏感性差异 | 第61-62页 |
| ·不同品系棉蚜乙酰胆碱酯酶的米氏常数(K_m)和最大反应速度(V_m) | 第62-63页 |
| ·不同品系棉蚜全酯酶活力和羧酸酯酶的K_m和V_m值 | 第63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 第五章 棉蚜乙酰胆碱酯酶的纯化及其生化特性的研究 | 第65-77页 |
| ·材料与方法 | 第66-68页 |
| ·供试棉蚜及饲养 | 第66页 |
| ·供试药剂 | 第66页 |
| ·棉蚜乙酰胆碱酯酶的纯化步骤 | 第66-67页 |
| ·蛋白含量测定 | 第67页 |
| ·全酯酶和羧酸酯酶的活力测定 | 第67页 |
| ·非变性和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE和SDS-PAGE) | 第67页 |
| ·乙酰胆碱酯酶粗酶和纯化酶液的动力学参数测定 | 第67-68页 |
| ·乙酰胆碱酯酶抑制中浓度的测定 | 第68页 |
| ·结果与分析 | 第68-75页 |
| ·棉蚜乙酰胆碱酯酶的纯化指数 | 第68-69页 |
| ·不同反应条件下纯化前后乙酰胆碱酯酶活力的影响 | 第69-72页 |
| ·纯化前后棉蚜乙酰胆碱酯酶对抑制剂的敏感性差异 | 第72-75页 |
| ·讨论 | 第75-77页 |
| 第六章 棉蚜2个乙酰胆碱酯酶的基因克隆及序列分析 | 第77-92页 |
| ·材料与方法 | 第78-82页 |
| ·供试棉蚜与饲养 | 第78页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第78页 |
| ·总RNA提取和RT-PCR | 第78-79页 |
| ·引物 | 第79页 |
| ·PCR和RACE | 第79-80页 |
| ·PCR产物纯化 | 第80页 |
| ·质粒载体的连接反应和转化 | 第80-82页 |
| ·质粒DNA测序 | 第82页 |
| ·序列分析 | 第82页 |
| ·棉蚜2个乙酰胆碱酯酶的抑制性试验 | 第82页 |
| ·结果与分析 | 第82-89页 |
| ·棉蚜乙酰胆碱酯酶基因的克隆 | 第82-83页 |
| ·棉蚜乙酰胆碱酯酶的选择性剪接 | 第83页 |
| ·棉蚜乙酰胆碱酯酶的序列分析 | 第83-88页 |
| ·棉蚜体内存在2个乙酰胆碱酯酶的生化毒理学验证 | 第88-89页 |
| ·讨论 | 第89-92页 |
| 第七章 不同品系棉蚜乙酰胆碱酯酶的单核苷酸多态性 | 第92-104页 |
| ·材料与方法 | 第93-94页 |
| ·供试棉蚜及饲养 | 第93页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第93页 |
| ·总RNA的提取和单链cDNA的合成 | 第93页 |
| ·引物设计与合成 | 第93页 |
| ·PCR扩增、产物克隆与测序 | 第93-94页 |
| ·序列分析 | 第94页 |
| ·结果与分析 | 第94-99页 |
| ·不同地区抗性品系棉蚜acel基因的单核苷酸多态性(SNP) | 第94-97页 |
| ·不同地区抗性品系棉蚜acel基因的单核苷酸多态性(SNP) | 第97-99页 |
| ·讨论 | 第99-104页 |
| ·棉蚜AChE的单核苷酸多态性(SNPs)分析 | 第99-100页 |
| ·昆虫乙酰胆碱酯酶基因的核酸多态性 | 第100页 |
| ·家蝇中V180L和马铃薯甲虫中S291G的突变分析 | 第100页 |
| ·果蝇中的F368S突变分析 | 第100-102页 |
| ·昆虫AChE结构保守性突变的假设 | 第102-104页 |
| 第八章 乙酰胆碱酯酶的同源结构建模和分子进化分析 | 第104-114页 |
| ·材料与方法 | 第105-108页 |
| ·棉蚜2个乙酰胆碱酯酶的同源结构建模 | 第105页 |
| ·乙酰胆碱酯酶基因序列 | 第105页 |
| ·乙酰胆碱酯酶分子树的构建和系统发育分析 | 第105-108页 |
| ·结果与分析 | 第108-110页 |
| ·棉蚜2个乙酰胆碱酯酶的高级结构同源建模 | 第108-109页 |
| ·乙酰胆碱酯酶的序列分析和分子树的构建 | 第109-110页 |
| ·昆虫存在多个乙酰胆碱酯基因的可能进化机制 | 第110页 |
| ·结论 | 第110-114页 |
| 第九章 棉蚜乙酰胆碱受体亚基的选择性剪接和基因结构分析 | 第114-127页 |
| ·材料与方法 | 第115-118页 |
| ·供试棉蚜与饲养 | 第115-116页 |
| ·总RNA提取和RT-PCR | 第116页 |
| ·引物 | 第116页 |
| ·PCR和RACE | 第116页 |
| ·PCR产物纯化和测序 | 第116-118页 |
| ·序列分析 | 第118页 |
| ·结果与分析 | 第118-124页 |
| ·棉蚜烟碱型乙酰胆碱受体基因cDNA片段的克隆 | 第118页 |
| ·棉蚜3个烟碱型乙酰胆碱受体亚基因的全长序列 | 第118页 |
| ·棉蚜Ag α 1的基因结构分析 | 第118-119页 |
| ·棉蚜Ag β 1基因的选择性剪接 | 第119-124页 |
| ·讨论 | 第124-127页 |
| ·棉蚜Ag α 1和桃蚜Mp α 3基因的“精卫基因”起源机制的探讨 | 第124-126页 |
| ·棉蚜乙酰胆碱受体亚基的选择性剪接现象分析 | 第126-127页 |
| 第十章 烟碱型乙酰胆碱受体亚基的分子进化及其基因起源机制的探讨 | 第127-137页 |
| ·材料与方法 | 第128-132页 |
| ·乙酰胆碱受体亚基序列 | 第128页 |
| ·乙酰胆碱受体亚基分子树的构建 | 第128-132页 |
| ·结果与讨论 | 第132-137页 |
| ·烟碱型乙酰胆碱受体亚基的分子进化分析 | 第132-135页 |
| ·烟碱型乙酰胆碱受体亚基的基因起源机制的探讨 | 第135-137页 |
| 第十一章 棉蚜钠离子通道基因的克隆和Bi-PASA抗性突变检测技术 | 第137-147页 |
| ·材料与方法 | 第138-140页 |
| ·供试棉蚜 | 第138页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第138页 |
| ·引物设计与合成 | 第138页 |
| ·总RNA的提取和单链cDNA的合成 | 第138-139页 |
| ·棉蚜基因组DNA的提取 | 第139页 |
| ·钠离子通道基因的PCR扩增 | 第139页 |
| ·PCR产物回收、连接、转化与测序 | 第139-140页 |
| ·Bi-PASA抗性突变检测 | 第140页 |
| ·序列分析 | 第140页 |
| ·结果与分析 | 第140-145页 |
| ·棉蚜para型钠通道cDNA和基因组DNA片段的扩增 | 第140页 |
| ·序列分析 | 第140-141页 |
| ·Bi-PASA分子监测技术的初步摸索 | 第141-145页 |
| ·讨论 | 第145-147页 |
| 全文总结 | 第147-149页 |
| 参考文献 | 第149-162页 |
| 附录: 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第162-163页 |
| 致谢 | 第163页 |
