| 英文摘要 | 第1-8页 |
| 目录 | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-30页 |
| 1．1 引言 | 第13页 |
| 1．2 紫杉烷生物合成研究进展 | 第13-26页 |
| 1．2．1 紫杉烷结构及性质 | 第13-14页 |
| 1．2．2 紫杉烷的生物合成途径 | 第14-23页 |
| 1．2．2．1 紫杉醇骨架的生物合成 | 第14-18页 |
| 1．2．2．2 紫杉醇侧链的生物合成 | 第18-21页 |
| 1．2．2．3 紫杉醇的最终生物合成 | 第21-23页 |
| 1．2．3 紫杉烷生物合成途径中的关键酶 | 第23-26页 |
| 1．2．3．1 GGPP合成酶（geranylgeranyl diphosphate synthase） | 第23-24页 |
| 1．2．3．2 紫杉二烯环化酶（Taxadiene cyclase） | 第24页 |
| 1．2．3．3 细胞色素P-450单体氧化酶 | 第24-25页 |
| 1．2．3．4 3 -羟基-3-戊二酰基辅酶A还原酶 | 第25-26页 |
| 1．2．3．5 乙酰基转移酶（Acetyl-transferase） | 第26页 |
| 1．3 紫杉烷生物合成的调控 | 第26-28页 |
| 1．4 本文的研究工作 | 第28-30页 |
| 第二章 紫杉烷生物合成过程中3-异戊烯基焦磷酸代谢途径研究 | 第30-48页 |
| 2．1 引言 | 第30-31页 |
| 2．2 研究材料与方法 | 第31-34页 |
| 2．2．1 药品配制 | 第31页 |
| 2．2．2 细胞株系及其培养 | 第31-32页 |
| 2．2．3 细胞生物量测定 | 第32页 |
| 2．2．4 细胞活性测定 | 第32页 |
| 2．2．5 紫杉烷类化合物的提取与检测 | 第32-33页 |
| 2．2．5．1 胞外紫杉烷类的提取 | 第32页 |
| 2．2．5．2 胞内紫杉烷类的提取 | 第32-33页 |
| 2．2．5．3 紫杉烷类的HPLC测定 | 第33页 |
| 2．2．6 实验设计 | 第33-34页 |
| 2．3 结果与讨论 | 第34-47页 |
| 2．3．1 紫杉烷类生物合成中IPP代谢路径研究 | 第34-40页 |
| 2．3．1．1 抑制剂MVS和CCC对细胞生物量的影响 | 第34-36页 |
| 2．3．1．2 抑制剂MVS和CCC对细胞活性的影响 | 第36-37页 |
| 2．3．1．3 抑制剂MVS和CCC对紫杉烷类化合物合成的影响 | 第37-40页 |
| 2．3．1．4 结论 | 第40页 |
| 2．3．2 紫杉烷类生物合成中IPP转运研究 | 第40-47页 |
| 2．3．2．1 抑制剂NaPP和DLG对细胞生物量的影响 | 第40-41页 |
| 2．3．2．2 抑制剂NaPP和DLG对细胞活性的影响 | 第41-46页 |
| 2．3．2．3 抑制剂NaPP和DLG对紫杉烷类化合物含量的影响 | 第42-46页 |
| 2．3．2．4 结论 | 第46-47页 |
| 2．4 小结 | 第47-48页 |
| 第三章 诱导子对紫杉烷合成诱导作用评价及对3-异戊烯基焦磷酸代谢途径的诱导调控研究 | 第48-82页 |
| 3．1 引言 | 第48页 |
| 3．2 研究材料与方法 | 第48-51页 |
| 3．2．1 药品配制 | 第48-49页 |
| 3．2．2 细胞株系及其培养 | 第49页 |
| 3．2．3 Hoechst33342和propidium-iodide（PI）双染进行细胞形态观察 | 第49页 |
| 3．2．4 细胞活性测定 | 第49页 |
| 3．2．5 Evansblue检测 | 第49页 |
| 3．2．6 电导率的测定 | 第49页 |
| 3．2．7 酶类的提取 | 第49-50页 |
| 3．2．8 可溶性蛋白质测定方法 | 第50页 |
| 3．2．9 PAL（苯丙氨酸解氨酶）活性测定 | 第50页 |
| 3．2．10 紫杉烷类化合物的提取与检测 | 第50页 |
| 3．2．11 实验设计 | 第50-51页 |
| 3．3 结果与讨论 | 第51-77页 |
| 3．3．1 MJ对红豆杉细胞基本代谢的影响 | 第51-55页 |
| 3．3．1．1 细胞形态的变化 | 第51-53页 |
| 3．3．1．2 细胞活力的变化 | 第53页 |
| 3．3．1．3 总蛋白含量 | 第53-54页 |
| 3．3．1．4 PAL（苯丙氨酸解氨酶）活性的变化 | 第54-55页 |
| 3．3．2 诱导模型及MJ对紫杉烷类生物合成的诱导作用评价 | 第55-58页 |
| 3．3．2．1 诱导模型及诱导参数的求解 | 第55-56页 |
| 3．3．2．2 细胞生长早期MJ对紫杉烷类合成的诱导 | 第56-57页 |
| 3．3．2．3 细胞生长晚期MJ对紫杉烷类合成的诱导 | 第57-58页 |
| 3．3．3 MJ对IPP生物合成的促进作用 | 第58-62页 |
| 3．3．3．1 MJ与抑制剂MVS或CCC联合使用对细胞活性的影响 | 第58页 |
| 3．3．3．2 MJ对于IPP合成路径的促进作用 | 第58-62页 |
| 3．3．3．3 结论 | 第62页 |
| 3．3．4 MJ对IPP转运的促进作用 | 第62-66页 |
| 3．3．4．1 MJ和抑制剂NaPP和DLG联合使用对细胞活性的影响 | 第62-63页 |
| 3．3．4．2 MJ对IPP转运的诱导调控研究 | 第63-66页 |
| 3．3．4．3 结论 | 第66页 |
| 3．3．5 SA对红豆杉细胞基本代谢的影响 | 第66-71页 |
| 3．3．5．1 SA对细胞活性的影响 | 第66-67页 |
| 3．3．5．2 Evansblue检测结果 | 第67-68页 |
| 3．3．5．3 Propidiumiodide（PI）和Hoechest33342双染 | 第68-69页 |
| 3．3．5．4 电导率的检测 | 第69-70页 |
| 3．3．5．5 SA对PAL的诱导 | 第70-71页 |
| 3．3．6 SA对紫杉烷类生物合成的诱导作用评价 | 第71-74页 |
| 3．3．6．1 细胞生长早期SA对紫杉烷类生物合成的诱导 | 第71-72页 |
| 3．3．6．2 SA诱导参数的计算及诱导作用评价 | 第72-73页 |
| 3．3．6．3 细胞生长晚期SA对紫杉醇生物合成的诱导 | 第73-74页 |
| 3．3．7 SA对IPP生物合成的促进作用 | 第74-76页 |
| 3．3．7．1 SA对于甲羟戊酸途径和非甲羟戊酸途径合成IPP的作用 | 第74-76页 |
| 3．3．7．2 结论 | 第76页 |
| 3．3．8 SA对IPP转运的促进作用 | 第76-77页 |
| 3．3．8．1 SA对IPP转运的诱导作用研究 | 第76-77页 |
| 3．3．8．2 结论 | 第77页 |
| 3．4 小结 | 第77-82页 |
| 第四章 紫杉烷类生物合成过程中细胞色素P-450加氧酶的诱导调控研究 | 第82-97页 |
| 4．1 引言 | 第82页 |
| 4．2 研究材料与方法 | 第82-83页 |
| 4．2．1 药品配制 | 第82-83页 |
| 4．2．2 细胞株系及其培养 | 第83页 |
| 4．2．3 细胞活性测定 | 第83页 |
| 4．2．4 紫杉烷类化合物的提取与检测 | 第83页 |
| 4．2．5 实验设计 | 第83页 |
| 4．3 结果与讨论 | 第83-94页 |
| 4．3．1 细胞生长早期P-450酶在紫杉烷合成中的作用 | 第83-84页 |
| 4．3．2 细胞生长晚期P-450酶在紫杉烷合成中的作用 | 第84-86页 |
| 4．3．3 MJ对细胞生长早期紫杉烷合成中细胞色素P-450加氧酶的诱导 | 第86-88页 |
| 4．3．3．1 MJ和ABT同时作用对紫杉烷合成的影响 | 第86-88页 |
| 4．3．3．2 结论 | 第88页 |
| 4．3．4 MJ对细胞生长晚期紫杉烷合成中细胞色素P-450加氧酶的诱导 | 第88-90页 |
| 4．3．4．1 MJ和ABT同时作用对紫杉烷合成的影响 | 第88-90页 |
| 4．3．4．3 结论 | 第90页 |
| 4．3．5 SA对细胞生长早期紫杉烷合成中细胞色素P-450加氧酶的诱导 | 第90-92页 |
| 4．3．5．1 SA和ABT同时作用对紫杉烷类合成的影响 | 第90-92页 |
| 4．3．5．2 结论 | 第92页 |
| 4．3．6 SA对细胞生长晚期紫杉烷合成中细胞色素P-450加氧酶的诱导 | 第92-94页 |
| 4．3．6．1 SA和ABT同时作用对紫杉烷类合成的影响 | 第92-94页 |
| 4．3．6．2 结论 | 第94页 |
| 4．4 小结 | 第94-97页 |
| 第五章 紫杉烷类生物合成及其诱导调控的代谢通量变化分析 | 第97-106页 |
| 5．1 引言 | 第97页 |
| 5．2 代谢通量变化分析 | 第97-102页 |
| 5．2．1 模型分析法的描述和基本假设 | 第98页 |
| 5．2．2 代谢模型的建立 | 第98-99页 |
| 5．2．3 代谢模型参数求解 | 第99-102页 |
| 5．4 结果与讨论 | 第102-105页 |
| 5．4．1 甲基茉莉酮酸作用下碳通量的改变 | 第102-103页 |
| 5．4．2 水杨酸作用下碳通量的改变 | 第103-104页 |
| 5．4．3 代谢通量模型的理论结果与实验结果的拟合 | 第104-105页 |
| 5．5 小结 | 第105-106页 |
| 第六章 结论与展望 | 第106-108页 |
| 6．1 结论 | 第106-107页 |
| 6．2 展望 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-119页 |
| 致谢 | 第119页 |
